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兩種方法培養(yǎng)骨質(zhì)疏松癥小鼠脂肪干細(xì)胞的比較

發(fā)布時(shí)間:2018-05-07 08:36

  本文選題:干細(xì)胞 + 骨質(zhì)疏松; 參考:《中國組織工程研究》2017年29期


【摘要】:背景:獲得充足的脂肪干細(xì)胞是自體移植修復(fù)骨質(zhì)疏松癥骨缺損的前提,因此如何高效、簡便、經(jīng)濟(jì)的獲得自體原代脂肪干細(xì)胞是治療骨質(zhì)疏松癥的關(guān)鍵。目的:采用組織塊法和膠原酶消化法體外培養(yǎng)骨質(zhì)疏松癥小鼠脂肪干細(xì)胞,并對兩種培養(yǎng)方法進(jìn)行比較分析。方法:切除雌性C57BL/6小鼠雙側(cè)卵巢,制作骨質(zhì)疏松模型,造模成功后取小鼠皮下脂肪組織,分別采用組織塊法和膠原酶消化法分離培養(yǎng)脂肪干細(xì)胞。應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測第3代脂肪干細(xì)胞表面特異性抗原;培養(yǎng)7 d后,檢測細(xì)胞產(chǎn)量;檢測第3代脂肪干細(xì)胞的增殖;檢測第4代脂肪干細(xì)胞的成脂及成骨分化能力。結(jié)果與結(jié)論:①組織塊法培養(yǎng)第3代細(xì)胞CD34、CD146、Sca-1表達(dá)率分別為(15.22±1.85)%、(75.55±3.36)%、(83.48±4.22)%,膠原酶消化法第3代細(xì)胞CD34、CD146、Sca-1表達(dá)率分別為(13.46±2.21)%、(76.62±2.47)%、(84.84±3.56)%;②組織塊法每毫克脂肪組織獲得的細(xì)胞產(chǎn)量高于膠原酶消化法(P0.05);③培養(yǎng)24 h后,組織塊培養(yǎng)法的細(xì)胞增殖率高于膠原酶消化法;④兩種方法得到的脂肪干細(xì)胞均可向脂肪細(xì)胞和成骨細(xì)胞方向分化,兩組間成脂量及成骨量比較差異無顯著性意義(P0.05);⑤結(jié)果表明,組織塊法比膠原酶消化法更適合體外培養(yǎng)脂肪干細(xì)胞,可為骨質(zhì)疏松癥患者自體移植脂肪干細(xì)胞治療骨質(zhì)疏松性骨折和骨缺損研究提供充足的細(xì)胞來源。
[Abstract]:Background: obtaining sufficient adipose stem cells is the premise of autotransplantation to repair bone defect of osteoporosis. Therefore, how to obtain autologous primary adipose stem cells efficiently, conveniently and economically is the key to the treatment of osteoporosis. Aim: to culture adipose stem cells of osteoporosis mice in vitro by tissue mass method and collagenase digestion method. Methods: the ovarium of female C57BL/6 mice was excised and the model of osteoporosis was made. The adipose tissue was isolated and cultured by tissue block method and collagenase digestion method. The surface specific antigen of the third generation of adipose stem cells was detected by flow cytometry, the cell production was detected after 7 days of culture, the proliferation of the third generation of adipose stem cells was detected, and the ability of adipogenic and osteogenic differentiation of the fourth generation of adipose stem cells was detected. Results and conclusion the expression rates of CD34, CD146, Sca-1 were 15.22 鹵1.85, 75.55 鹵3.36 and 83.48 鹵4.22, respectively, and the expression rates of CD34 and CD146Sca-1 in the third passage were 13.46 鹵2.21, 76.62 鹵2.47 and 84.84 鹵3.56%, respectively. The cell yield per milligram of adipose tissue by collagenase digestion was higher than that of collagenase elimination. After 24 h culture of P0. 05 and P0. 05, P0. 05 and P0. 05%. The proliferation rate of adipose stem cells obtained by tissue mass culture method was higher than that by collagenase digestion method. The adipocytes and osteoblasts were differentiated into adipocytes and osteoblasts. There was no significant difference in fat production and osteogenesis between the two groups. The results showed that the tissue block method was more suitable than collagenase digestion method to culture adipose stem cells in vitro. It can provide sufficient cell source for the treatment of osteoporotic fracture and bone defect by autologous transplantation of adipose stem cells in patients with osteoporosis.
【作者單位】: 西南醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院口腔頜面外科;西南醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院口頜面修復(fù)重建和再生實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81371125) 四川省科技廳項(xiàng)目(2014JY0044) 四川省教育廳項(xiàng)目(10ZB030) 四川省衛(wèi)生廳項(xiàng)目(80170) 西南醫(yī)科大學(xué)重點(diǎn)項(xiàng)目(201207) 2015年瀘州市人民政府-西南醫(yī)科大學(xué)科技戰(zhàn)略合作項(xiàng)目[2015LZCYD-S05(2/12)] 西南醫(yī)大口院[(2017)20號(hào)]~~
【分類號(hào)】:R580

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本文編號(hào):1856217

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