本文關(guān)鍵詞：天津市糖尿病患者住院費(fèi)用分析及策略研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《山東大學(xué)》 2013年

葡萄糖和胰島素可通過調(diào)控GLUT4表達(dá)影響H9c2（2-1）細(xì)胞增殖

劉騫  

【摘要】：研究背景： 糖尿病是臨床最常見的危害大眾健康的慢性病之一,其主要死亡原因?yàn)樾难苁录８哐窃斐傻奶悄虿∧芰看x紊亂可影響心肌細(xì)胞的正常生理功能,這可能是糖尿病性心臟病的病因,同時(shí)也是各種心血管病變的基礎(chǔ)因素。因此,想要維持心肌細(xì)胞正常能量代謝,保證心肌細(xì)胞正常生理功能,減少糖尿病性心血管病變的發(fā)生,需要保證作為心肌細(xì)胞的主要能量來源的葡萄糖的正常轉(zhuǎn)運(yùn)和利用。 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(GLUT)介導(dǎo)細(xì)胞對(duì)內(nèi)環(huán)境中的葡萄糖的攝取。心肌細(xì)胞中主要存在GLUT1、GLUT4、GLUT12,以GLUT4作用最為重要。有研究證實(shí)慢性低血糖可引起GLUT表達(dá)代償性升高,增加葡萄糖攝取能力以適應(yīng)低血糖狀態(tài)。而我們前期研究發(fā)現(xiàn)慢性高血糖可使神經(jīng)細(xì)胞GLUT表達(dá)降調(diào)節(jié),作為一種代償性保護(hù)機(jī)制,降低細(xì)胞對(duì)葡萄糖的攝取,避免過多的葡萄糖進(jìn)入細(xì)胞造成高糖損傷,我們將其稱之為高血糖預(yù)適應(yīng)機(jī)制(hyperglycemia pre-accommodation HGPA)。心血管病變(CVD)是糖尿病患者的最主要的死因。但高血糖對(duì)心肌細(xì)胞生長(zhǎng)代謝的具體影響還不清楚,心肌細(xì)胞是否存在對(duì)高血糖的適應(yīng)性調(diào)節(jié)反應(yīng)亦不明確。本研究利用體外細(xì)胞培養(yǎng)模型技術(shù),探討不同葡萄糖濃度及胰島素濃度對(duì)H9c2(2-1)心肌細(xì)胞增殖與GLUT4表達(dá)的影響,評(píng)價(jià)心肌細(xì)胞增殖與GLUT4表達(dá)變化間的關(guān)系,驗(yàn)證心肌細(xì)胞是否存在高血糖預(yù)適應(yīng)機(jī)制,指導(dǎo)糖尿病心血管疾病的防治。 方法： 采用H9c2(2-1)大鼠心肌細(xì)胞株。根據(jù)培養(yǎng)液糖濃度將細(xì)胞分為5組進(jìn)行培養(yǎng)：對(duì)照組(NC)、低糖組(LG)、高糖1組(HG1)、高糖2組(HG2)、高糖3組(HG3)。各組對(duì)應(yīng)的葡萄糖濃度分別為5,0.1、10、15、20mmol/L.各組調(diào)整胰島素濃度分為：正常胰島素亞組(INSc,3.8mU/L胰島素),高胰島素亞組(INSh,7.6mU/L胰島素)。分別培養(yǎng)H9c2細(xì)胞1、2、3天。利用CCK-8法評(píng)價(jià)心肌細(xì)胞增殖情況,分別利用RT-PCR法(?)(?)Western blot法檢測(cè)(?)GLUT4mRNA和蛋白表達(dá)水平。統(tǒng)計(jì)分析評(píng)價(jià)心肌細(xì)胞增殖與GLUT4表達(dá)之間的關(guān)系。 結(jié)果： 1.LG、HG2、HG3組細(xì)胞增殖(吸光光度值,OD值)低于NC組(P0.05)。而HG1組OD值高于NC組(P0.05)。在HG1、HG2、HG3組中我們觀察到OD值與葡萄糖濃度呈負(fù)相關(guān)(P0.05)。INSc亞組細(xì)胞OD值低于INSh亞組(P0.05)。 2. LG、HG2、HG3組GLUT4mRNA表達(dá)低于對(duì)照組(P0.05)。HG1組GLUT4mRNA表達(dá)在培養(yǎng)第1天高于對(duì)照組,在培養(yǎng)第2、3天低于對(duì)照組(P0.05)。HG1、HG2、HG3組GLUT4mRNA表達(dá)與糖濃度呈負(fù)相關(guān)(P0.05)。INSc亞組細(xì)胞GLUT4mRNA表達(dá)低于INSh亞組(P0.05)。 3. GLUT4蛋白表達(dá)與GLUT4mRNA表達(dá)變化一致。 4.H9c2細(xì)胞增殖與相應(yīng)GLUT4mRNA和蛋白表達(dá)變化呈正相關(guān)關(guān)系(P0.01)。 結(jié)論： 1.葡萄糖濃度影響體外培養(yǎng)的心肌細(xì)胞的增殖。隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),葡萄糖濃度愈高細(xì)胞增殖水平愈低。二者呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。 2.葡萄糖濃度影響心肌細(xì)胞GLUT4mRNA及其蛋白表達(dá)水平。心肌細(xì)胞GLUT4mRNA及其蛋白表達(dá)水平隨糖濃度升高而下降,二者亦呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。即高糖條件下GLUT4表達(dá)降調(diào)節(jié)。 3.高胰島素水平改善細(xì)胞增殖,亦增力(?)GLUT4表達(dá)。 4.葡萄糖對(duì)心肌細(xì)胞增殖的影響可能是通過GLUT4調(diào)節(jié)介導(dǎo)的。胰島素水平亦是影響因素之一。 5.高糖情況下GLUT4表達(dá)降調(diào)節(jié),可以減少葡萄糖進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),以避免高糖對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用。這可能是心肌細(xì)胞對(duì)周圍高糖環(huán)境的代償性適應(yīng)性調(diào)節(jié)反應(yīng),即高血糖預(yù)適應(yīng)。 研究意義： 利用體外心肌細(xì)胞培養(yǎng)模型,通過探討葡萄糖及胰島素水平與細(xì)胞增殖及GLUT4表達(dá)變化之間的關(guān)系,發(fā)現(xiàn)葡萄糖和胰島素可通過調(diào)控GLUT4的表達(dá)影響心肌細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài),觀察至(?)JGLUT4表達(dá)隨血糖水平升高而存在降調(diào)節(jié),初步驗(yàn)證心臟HGPA(?)(?)說,找出適合心肌細(xì)胞生長(zhǎng)的內(nèi)環(huán)境。本研究可指導(dǎo)糖尿病心血管并發(fā)癥的防治。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R587.1
【目錄】：

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