本文選題：二甲雙胍 + 3T3-L1脂肪前體細(xì)胞��； 參考：《山東大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：目的：(1)研究二甲雙胍對(duì)3T3-L1脂肪前體細(xì)胞細(xì)胞增殖過程的影響；(2)研究二甲雙胍對(duì)3T3-L1脂肪前體細(xì)胞細(xì)胞分化過程的影響；通過上述研究,探討二甲雙胍對(duì)脂肪細(xì)胞的作用,以期明確二甲雙胍對(duì)脂肪前體細(xì)胞增殖和分化過程的干預(yù)是否為二甲雙胍減輕體重的機(jī)制之一,進(jìn)一步為肥胖的治療尋找新的理論依據(jù)。方法：(1)3T3-L1脂肪前體細(xì)胞細(xì)胞增殖的測定：①用不同濃度的二甲雙胍(0.05mmol/L, 0.5mmol/L,5mmol/L,10 mmol/L,20 mmol/L,50mmol/L)對(duì)體外培養(yǎng)的3T3-L1脂肪前體細(xì)胞細(xì)胞增殖過程進(jìn)行干預(yù)。②應(yīng)用倒置顯微鏡對(duì)細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行觀察,應(yīng)用MTT法測定二甲雙胍細(xì)胞增殖的影響并與對(duì)照組(二甲雙胍濃度為Ommol/L)進(jìn)行對(duì)照。③應(yīng)用酶標(biāo)儀在OD570nm處測量各組光密度值,以此來判斷不同濃度二甲雙胍對(duì)細(xì)胞增殖的影響。(2)3T3-L1脂肪前體細(xì)胞細(xì)胞分化的測定：①用不同濃度的二甲雙胍(0.05mmol/L, 0.5mmol/L,5mmol/L)對(duì)體外培養(yǎng)的3T3-L1脂肪前體細(xì)胞細(xì)胞分化過程進(jìn)行干預(yù)。②應(yīng)用倒置顯微鏡對(duì)細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行觀察,油紅O染色法鑒定脂肪細(xì)胞的分化程度,并與陰性對(duì)照組(未加成脂誘導(dǎo)液)和陽性對(duì)照組(加成脂誘導(dǎo)液,二甲雙胍濃度為Ommol/L)進(jìn)行對(duì)照。③應(yīng)用酶標(biāo)儀在OD510nm處測量各組的光密度值,以此來判斷不同濃度二甲雙胍對(duì)細(xì)胞分化的影響。結(jié)果：(1)二甲雙胍對(duì)細(xì)胞增殖的影響：顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)：在顯微鏡下觀察貼壁后的3T3-L1脂肪前體細(xì)胞,細(xì)胞成長條梭形,類似成纖維細(xì)胞。體外培養(yǎng)24小時(shí),0.05mmol/L和0.5 mmol/L的二甲雙胍組和對(duì)照組相比,鏡下細(xì)胞形態(tài)和密度無明顯差異,而5 mmol/L,10 mmol/L,20 mmol/L和50mmol/L的二甲雙胍組和對(duì)照組相比,細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變(變形、破壞、凋亡小體形成),數(shù)量明顯減少。且為濃度依賴性,濃度越高,細(xì)胞破壞越嚴(yán)重,細(xì)胞數(shù)量。繼續(xù)培養(yǎng)至72h,0.05 mmol/L和0.5 mmol/L的二甲雙胍組和對(duì)照組相比,鏡下細(xì)胞形態(tài)和密度亦無明顯差異,而5 mmol/L,10 mmol/L,20 mmol/L和50mmol/L的二甲雙胍組和對(duì)照組相比,隨著濃度的增加細(xì)胞破壞越嚴(yán)重,細(xì)胞數(shù)量越少。測量各組光密度值：(D0.05mmol/L(OD值：2.0±0.09)和0.5 mmol/L(OD值：1.99±0.09)二甲雙胍和對(duì)照組(OD值：2.14±0.14)比較,均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。②5mmol/L(OD值：1.53±0.20)、10mmol/L(OD值：1.29±0.14)、20mmol/L (OD值：1.03±0.12)和50 mmol/L二甲雙胍(OD值：0.70±0.13)和對(duì)照組(OD值：2.14±0.14)比較,均有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。③5mmol/L(OD值：1.53±0.20)、1 Ommol/L(OD值：1.29±0.14)、20mmol/L(OD值：1.03±0.12)和50 mmol/L二甲雙胍(OD值：0.70±0.13)各組之間比較,均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),且濃度越高,光密度值越小。(2)二甲雙胍對(duì)細(xì)胞分化的影響顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)(油紅0染色)：①陰性對(duì)照組細(xì)胞仍呈成梭形或橢圓形,油紅0染色無明顯著色。②陽性對(duì)照組可見80-90%的細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)有脂滴聚積,油紅0染色著色明顯。③0.05 mmol/L和0.5 mmol/L的二甲雙胍組亦可見80-90%的呈脂肪細(xì)胞表型,細(xì)胞內(nèi)有脂滴聚積,油紅0染色著色明顯,與陽性對(duì)照組相似。④5 mmol/L的二甲雙胍組脂肪細(xì)胞表型數(shù)量較對(duì)照組明顯減少,油紅0染色著色較對(duì)照組明顯減少。測量各組光密度值：①陽性對(duì)照組(OD值：0.61±0.060)、0.05mmol/L(OD值：0.59±0.055)、0.5 mmol/L(OD值：0.59±0.047)和5 mmol/L(OD值：0.42±0.027)和陰性對(duì)照組比較(OD值：0.34±0.017)均有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。②0.05mmol/L(OD值：0.59±0.055)、0.5 mmol/L(OD值：0.589±0.047)二甲雙胍和陽性對(duì)照組(OD值：0.61±0.060)比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。③5 mmol/L (OD值：0.42±0.027)二甲雙胍和陽性對(duì)照組(OD值：0.61±0.060)比較,有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。結(jié)論：(1) 0.05,0.5 mmol/L的二甲雙胍對(duì)3T3-L1脂肪前體細(xì)胞細(xì)胞增殖無影響；大于5mmol/L的二甲雙胍明顯抑制3T3-L1脂肪前體細(xì)胞細(xì)胞增殖,且隨著藥物濃度的增加抑制作用增強(qiáng)；大于5 mmol/L的二甲雙胍可能有促進(jìn)3T3-L1脂肪前體細(xì)胞細(xì)胞凋亡的作用。(2) 0.05、0.5 mmol/L的二甲雙胍對(duì)3T3-L1脂肪前體細(xì)胞細(xì)胞分化過程無影響；5mmol/L的二甲雙胍抑制3T3-L1脂肪前體細(xì)胞細(xì)胞分化。
[Abstract]:Objective: (1) to study the effect of metformin on the proliferation of 3T3-L1 fat precursor cells; (2) to study the effect of metformin on the differentiation of 3T3-L1 adipose progenitor cells, and to explore the effect of metformin on the adipocytes in order to clarify the effect of two metformin on the proliferation and differentiation of fat precursor cells. Whether it is one of the mechanisms of metformin reducing weight, and finding a new theoretical basis for the treatment of obesity. Methods: (1) the proliferation of 3T3-L1 fat precursor cells: (1) different concentrations of metformin (0.05mmol/L, 0.5mmol/L, 5mmol/L, 10 mmol/L, 20 mmol/L, 50mmol/L) were used for the in vitro culture of 3T3-L1 fat precursor cells The cell morphology was observed by inverted microscope. The effect of metformin cell proliferation was measured by MTT method and compared with the control group (metformin concentration of Ommol/L). (3) the light density values of each group were measured at OD570nm by the enzyme labeling instrument, so as to determine the increase of metformin at different concentrations to cells. Colonization. (2) determination of cell differentiation in 3T3-L1 fat precursor cells: (1) the differentiation process of 3T3-L1 adipose progenitor cells cultured in vitro was intervened with different concentrations of metformin (0.05mmol/L, 0.5mmol/L, 5mmol/L). Second, the cell morphology was observed by inverted microscope, and the differentiation of adipocytes was identified by oil red O staining. Degree, and compared with negative control group (without adipogenic inducer) and positive control group (addition of lipid inducer, metformin concentration of Ommol/L). (3) the effects of different concentrations of metformin on cell differentiation were measured at OD510nm at different concentrations. Results: (1) the effect of metformin on cell proliferation The morphology of the cells was observed under the microscope: the 3T3-L1 fat precursor cells after the wall were observed under the microscope, the cells grew spindle shaped and similar to fibroblasts. The cells were cultured for 24 hours in vitro. Compared with the control group, the morphology and density of the 0.05mmol/L and 0.5 mmol/L metformin groups were not significantly different, and 5 mmol/L, 10 mmol/L, 20 mmol/L and 50m. In the metformin group of mol/L, the cell morphology changes (deformation, destruction, and the formation of apoptotic bodies), and the number of cells decreased significantly. And the concentration dependent, the higher the concentration, the more serious the cell destruction, the number of cells. The cell morphology and density of the cells under the microscope were compared with the control group compared with the 0.05 mmol/L and 0.5 mmol/L metformin groups. There was no significant difference. Compared with the 5 mmol/L, 10 mmol/L, 20 mmol/L and 50mmol/L metformin groups, the more serious the cell destruction was, the less the cell number. The values of the light density were measured (D0.05mmol/L (OD: 2 + 0.09) and 0.5 mmol/L (OD: 1.99 + 0.09) and the control group (o value: 2.14 + 0.14) ratio. There was no statistical significance (P0.05). 2 5mmol/L (OD: 1.53 + 0.20), 10mmol/L (OD: 1.29 + 0.14), 20mmol/L (o value: 1.03 + 0.12) and 50 mmol/L metformin (o value: 0.70 + 0.13) and comparison group (o value: 2.14 + 0.14), there were significant statistical significance (P0.001), 5mmol/L (OD: 1.53 + 0.20) and 1 Ommol/L (OD value: 0.12 Ommol/L) 4), 20mmol/L (OD: 1.03 + 0.12) and 50 mmol/L metformin (OD: 0.70 + 0.13) had statistical significance (P0.05), and the higher the concentration, the smaller the light density. (2) the effect of metformin on cell differentiation was observed under microscope (oil red 0 staining): (1) the cells in the negative control group were still spindle shaped or oval, There was no obvious coloring in the oil red 0 staining. (2) the cells in the positive control group showed the accumulation of lipid droplets in the cell cells of 80-90% and the coloring of oil red 0. (3) the phenotype of 80-90% was also found in the group of 0.05 mmol/L and 0.5 mmol/L in metformin, and the lipid droplets were accumulated in the cells, and the oil red 0 staining was obvious, similar to the positive control group. (4) two of 5 mmol/L. The number of adipocyte phenotypes in metformin group was significantly lower than that of the control group, and the color of oil red 0 coloring was significantly lower than that of the control group. The values of light density were measured in each group: (1) positive control group (o value: 0.61 + 0.060), 0.05mmol/L (OD value: 0.59 + 0.055), 0.5 mmol/L (OD value: 0.59 + 0.047) and 5 mmol/L (o value: 0.42 + 0.027) and negative control group (o value) 0.34 + 0.017) had significant statistical significance (P0.001). 0.05mmol/L (OD: 0.59 + 0.055), 0.5 mmol/L (OD: 0.589 + 0.047) metformin and positive control group (o value: 0.61 + 0.060) had no statistical significance (P0.05). (3) 5 mmol/L (o value: 0.42 + 0.027) metformin and positive control group (OD: 0.61 + 0.060), there were Significant statistical significance (P0.001). Conclusion: (1) metformin in 0.05,0.5 mmol/L has no effect on the proliferation of 3T3-L1 adipose progenitor cells, and metformin, which is greater than 5mmol/L, obviously inhibits the proliferation of 3T3-L1 fat precursor cells and increases with the increase of drug concentration; metformin, which is greater than 5 mmol/L, may be promoted. The effect of 3T3-L1 fat precursor cell apoptosis. (2) metformin, 0.05,0.5 mmol/L, has no effect on the differentiation of 3T3-L1 adipose progenitor cells; 5mmol/L metformin inhibits the differentiation of 3T3-L1 fat precursor cells.

【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R587.1;R589.2

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 成杰;蔡明江;賈永莉;尹照華;;二甲雙胍的應(yīng)用現(xiàn)狀調(diào)查[J];實(shí)用糖尿病雜志;2005年06期

2 潘明政;;二甲雙胍傷腎嗎[J];醫(yī)藥與保健;2008年11期

3 衡先培;;二甲雙胍的臨床應(yīng)用[J];中國鄉(xiāng)村醫(yī)藥;2006年02期

4 H.Mehnert,邵丙揚(yáng);二甲雙胍在糖尿病治療中的地位[J];The Chinese-German Journal of Clinical Oncology;1999年02期

5 王煜;;二甲雙胍的臨床應(yīng)用療效評(píng)析[J];藥品評(píng)價(jià);2012年10期

6 伍曉玲,梁常禧,羅碧云;諾和靈與甲雙胍強(qiáng)化治療2型糖尿病22例效果觀察及護(hù)理[J];右江民族醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2002年04期

7 陳凌;二甲雙胍的臨床應(yīng)用體會(huì)[J];山東醫(yī)藥;1994年06期

8 趙紅玲;張雪坤;;二甲雙胍的降糖外作用研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)理論與實(shí)踐;2011年16期

9 ;古老的藥物 嶄新的應(yīng)用[J];科技傳播;2011年17期

10 鄭媛媛;;甲雙胍通過改變微生物葉酸和甲硫氨酸的代謝延緩秀麗隱桿線蟲的衰老[J];中國病理生理雜志;2013年10期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 侯沃霖;張丹丹;劉芳;陸蔚;殷峻;李鳴;盧逢娣;包玉倩;賈偉平;;二甲雙胍可降低女性2型糖尿病患者的血清CA125水平[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二次全國內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

2 朱云云;馮怡;沈嵐;王彬;阮克峰;從文娟;;二甲雙胍預(yù)防2型糖尿病的尿液代謝組學(xué)研究[A];2012年中國藥學(xué)大會(huì)暨第十二屆中國藥師周論文集[C];2012年

3 安慧杰;魏蕊;楊進(jìn);王廣;洪天配;;二甲雙胍促進(jìn)血管內(nèi)皮一氧化氮合酶復(fù)偶聯(lián)的作用及其機(jī)制[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二次全國內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

4 杜云波;趙英萍;;二甲雙胍致糖尿病乳酸性酸中毒12例的臨床分析[A];中國病理生理學(xué)會(huì)危重病醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會(huì)第八屆全國大會(huì)暨中華呼吸病學(xué)會(huì)呼吸生理和重癥監(jiān)護(hù)學(xué)組年會(huì)論文集[C];2008年

5 郭力;李顯筑;王梅;;二甲雙胍對(duì)糖尿病患者心血管危險(xiǎn)因素的影響及其機(jī)理探討[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第六次全國內(nèi)分泌學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

6 張丹丹;劉芳;唐峻嶺;鄭泰山;陸慧娟;謝君;盧逢娣;包玉倩;賈偉平;;2型糖尿病患者血清CA199水平的性別差異及二甲雙胍對(duì)其影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二次全國內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

7 吳加華;周嘉強(qiáng);;二甲雙胍對(duì)葡萄糖-6-磷酸酶基因表達(dá)的抑制作用及其機(jī)制[A];2013年（第三屆）中國藥物毒理學(xué)年會(huì)暨藥物非臨床安全性評(píng)價(jià)研究論壇論文摘要[C];2013年

8 吳加華;周嘉強(qiáng);;二甲雙胍對(duì)葡萄糖-6-磷酸酶基因表達(dá)的抑制作用及其機(jī)制[A];中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志(2013年6月第27卷第3期)[C];2013年

9 王述進(jìn);;二甲雙胍對(duì)2型糖尿病患者血清c反應(yīng)蛋白水平的影響[A];全國首屆代謝綜合征的基礎(chǔ)與臨床專題學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

10 安慧杰;劉金波;柯靜;王廣;洪天配;;二甲雙胍逆轉(zhuǎn)波動(dòng)性高糖誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞功能失調(diào)的機(jī)制研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十一次全國內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2012年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 秦家珍;服二甲雙胍監(jiān)測腎功能[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2007年

2 健康時(shí)報(bào)實(shí)習(xí)記者 井超;緩釋降糖藥別掰開吃[N];健康時(shí)報(bào);2009年

3 錢榮立;二甲雙胍不是減肥藥[N];健康報(bào);2003年

4 王欣;二甲雙胍的臨床新用[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2006年

5 彥珉;二甲雙胍的“后現(xiàn)代生活”[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2008年

6 徐述湘;50年應(yīng)用 二甲雙胍成為降糖經(jīng)典藥物[N];中國醫(yī)藥報(bào);2008年

7 章潮忠 袁克儉;“老當(dāng)益壯”的二甲雙胍[N];健康報(bào);2006年

8 韓詠霞;五種情況慎用二甲雙胍[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2008年

9 裘影萍;特殊人群慎服二甲雙胍[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2009年

10 健康時(shí)報(bào)記者 戴志悅;服二甲雙胍別喝酸奶[N];健康時(shí)報(bào);2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 姚新明;二甲雙胍對(duì)糖尿病腎臟疾病的保護(hù)作用及機(jī)制探討[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2014年

2 許國順;二甲雙胍對(duì)造血免疫系統(tǒng)輻射損傷防護(hù)作用及分子機(jī)制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

3 張艷飛;二甲雙胍對(duì)2型糖尿病合并結(jié)直腸癌患者預(yù)后的影響及其機(jī)制[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

4 張濤;二甲雙胍對(duì)膀胱癌的抑制作用及其機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2014年

5 李偉寧;二甲雙胍對(duì)HaCaT細(xì)胞增殖信號(hào)通路及豚鼠耳銀屑病模型影響研究[D];山東大學(xué);2014年

6 黃為;二甲雙胍對(duì)膽管癌細(xì)胞株RBE的作用及其機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2012年

7 肖行遠(yuǎn);二甲雙胍通過抑制IGF-1軸下調(diào)良性前列腺上皮細(xì)胞生長活性的研究[D];華中科技大學(xué);2012年

8 范軍;二甲雙胍對(duì)大鼠海馬神經(jīng)元GABA_A受體轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)及其抗焦慮作用[D];華中科技大學(xué);2014年

9 屈展;二甲雙胍對(duì)肝癌細(xì)胞體內(nèi)外增殖及凋亡的影響及其機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2012年

10 楊淑敏;二甲雙胍、羅格列酮對(duì)脂肪和肝臟色素上皮衍生因子表達(dá)分泌的影響及機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 許斌斌;二甲雙胍、塞來昔布對(duì)小鼠結(jié)直腸腫瘤預(yù)防作用的研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

2 王槐文;二甲雙胍聯(lián)合放療誘導(dǎo)結(jié)直腸癌細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

3 劉佳;二甲雙胍對(duì)糖尿病大鼠的骨保護(hù)作用與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的關(guān)系[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

4 王靜璐;二甲雙胍通過調(diào)節(jié)EGFR信號(hào)通路抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖的研究[D];鄭州大學(xué);2015年

5 史明星;二甲雙胍對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系脂聯(lián)素表達(dá)的影響[D];鄭州大學(xué);2015年

6 彭錚;二甲雙胍通過p38MAPK信號(hào)通路抑制ERCC1基因逆轉(zhuǎn)卵巢癌細(xì)胞的順鉑耐藥性[D];鄭州大學(xué);2015年

7 王濤;二甲雙胍對(duì)人食管癌細(xì)胞系KYSE450增殖和凋亡的影響及其機(jī)制[D];鄭州大學(xué);2015年

8 馬彥榮;基于Octs和Mate1分別探究阿替洛爾和美托洛爾對(duì)大鼠二甲雙胍藥動(dòng)學(xué)的影響[D];蘭州大學(xué);2015年

9 孟祥麗;二甲雙胍增加食管鱗癌對(duì)順鉑化療敏感性的機(jī)制研究[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;2015年

10 丁躍;二甲雙胍對(duì)人網(wǎng)膜脂肪細(xì)胞中v-SNAREs家族表達(dá)的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：1813985