本文關(guān)鍵詞：Nrf2、HO-1、VEGF在糖尿病大鼠腎臟中表達(dá)情況及萊菔硫烷對其干預(yù)作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《河北醫(yī)科大學(xué)》 2015年

Nrf2、HO-1、VEGF在糖尿病大鼠腎臟中表達(dá)情況及萊菔硫烷對其干預(yù)作用的研究

李琳  

【摘要】：目的:糖尿病腎病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病(diabetes mellitus,DM)最常見、最嚴(yán)重的微血管并發(fā)癥之一,已成為終末期腎病(end stage renal disease,ESRD)的主要原因之一。研究顯示DN的發(fā)病機制與糖代謝紊亂、血流動力學(xué)改變、內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙、炎癥、氧化應(yīng)激及自噬等多種因素有關(guān),糖尿病并發(fā)癥病理學(xué)的統(tǒng)一機制學(xué)說的提出,充分體現(xiàn)了高糖誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激在DN發(fā)生發(fā)展中的重要作用。近年來,誘導(dǎo)機體細(xì)胞的自然保護(hù)反應(yīng)正引起關(guān)注,即轉(zhuǎn)錄因子NF-E2相關(guān)的因子2(Nrf2)與其負(fù)調(diào)控蛋白Keap1共同調(diào)控的II相酶的表達(dá),被認(rèn)為是細(xì)胞抵御氧化應(yīng)激的最主要途徑。本研究通過建立糖尿病大鼠模型,測定腎組織中丙二醛(MDA)含量及總抗氧化能力(T-AOC)反應(yīng)糖尿病大鼠腎臟氧化應(yīng)激程度;應(yīng)用免疫組織化學(xué)、熒光定量PCR等方法檢測腎組織的Nrf2、HO-1、VEGF的表達(dá)情況;并給予II相酶誘導(dǎo)劑萊菔硫烷(sulforaphane,SF)進(jìn)行干預(yù),觀察其對腎臟MDA、T-AOC、Nrf2、HO-1、VEGF表達(dá)影響;探討Nrf2/ARE通路與DN氧化應(yīng)激的關(guān)系以及萊菔硫烷的干預(yù)效果,旨在為糖尿病腎病的防治提供實驗性理論依據(jù)。方法:清潔級健康雄性SD大鼠36只,體重200±20 g,按隨機數(shù)字法分為:正常對照組(NC組)、糖尿病模型組(DM組)、藥物干預(yù)組(DM+SF組),每組12只,其中DM組及DM+SF組給予腹腔一次性注射鏈脲佐菌素(STZ)65 mg/kg(溶于0.1 mol/L檸檬酸緩沖液中,PH 4.2),72 h后尾尖取血測定血糖,以血糖≥16.7 mmol/L,尿糖+++~++++,作為糖尿病模型成功的標(biāo)志,NC組給予等量檸檬酸緩沖液腹腔注射。實驗期間動物自由進(jìn)食、飲水,不使用降糖藥物。DM+SF組予以SF500μg/kg(溶于植物油中),灌胃,1次/日;NC組、DM組予以等量的植物油灌胃,1次/日。分別于實驗的第8周、第12周每組隨機取6只大鼠稱重后分別用代謝籠收集24 h尿,用于測定尿蛋白定量。心臟取血測定血糖、肌酐、尿素氮。留取腎組織標(biāo)本用于制作腎皮質(zhì)勻漿測定MDA及T-AOC濃度。制備病理組織切片并進(jìn)行HE、PAS染色明確腎臟病理變化。應(yīng)用免疫組織化學(xué)及熒光定量PCR方法檢測Nrf2、HO-1、VEGF在腎臟的表達(dá)部位并對其進(jìn)行定量檢測。對于滿足正態(tài)方差齊的數(shù)據(jù)采用單因素方差分析(One-Way ANOVA)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理,非正態(tài)或方差不齊時采用多個獨立樣本的秩和檢驗。P0.05表示有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果:1一般情況:NC組大鼠飲食及尿量無明顯變化,毛發(fā)光澤,反應(yīng)靈敏,體重明顯增長;DM組及DM+SF組逐漸出現(xiàn)多飲、多尿、多食、毛發(fā)枯黃,體重相對于同期NC組大鼠明顯下降(P0.05);但兩時間點DM組與DM+SF組相比體重差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2生化指標(biāo):各時間點血肌酐、尿素氮、血糖、24h尿蛋白定量DM組及DM+SF組較NC組明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);DM組及DM+SF組血糖值無明顯差異(P0.05);與DM組相比SF+DM組血肌酐、尿素氮、24h尿蛋白定量降低,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3 MDA、T-AOC水平:DM組及DM+SF組腎皮質(zhì)勻漿中MDA濃度高于NC組(P0.05),T-AOC活性小于NC組(P0.05);與DM組比較,兩個時間點,DM+SF組腎皮質(zhì)勻漿MDA濃度降低(P0.05),T-AOC活性增高(P0.05)。4腎臟組織HE及PAS染色:NC組大鼠腎小球結(jié)構(gòu)正常,腎小管上皮細(xì)胞排列整齊,結(jié)構(gòu)清晰,基底膜染色粗細(xì)均勻一致,無系膜細(xì)胞及系膜基質(zhì)增多等異常改變;DM組部分腎小球體積增大,系膜細(xì)胞及基質(zhì)增多,系膜區(qū)增寬,基底膜粗細(xì)不均,部分部位出現(xiàn)腎小管擴張,部分腎小管上皮細(xì)胞出現(xiàn)空泡變性,12周末上述病理改變最為突出,DM+SF組與DM組比較上述病理變化相對減輕。5免疫組織化學(xué)染色:Nrf-2、HO-1、VEGF在NC組腎臟組織少量表達(dá);兩時間點,DM組Nrf-2、HO-1、VEGF表達(dá)量較NC組相對增加;DM+SF組較DM組Nrf-2、HO-1表達(dá)增多,VEGF表達(dá)減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。6熒光定量PCR:與NC組相比兩時間點DM組中Nrf2、HO-1、VEGFm RNA相對表達(dá)量增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);DM+SF組較DM組Nrf2、HO-1m RNA表達(dá)量增加,VEGFm RNA表達(dá)量減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1糖尿病狀態(tài)下,大鼠腎臟存在氧化應(yīng)激,在氧化應(yīng)激狀態(tài)下Nrf2/ARE通路調(diào)控的抗氧化蛋白表達(dá)增多。2萊菔硫烷可以降低腎組織MDA含量,增加T-AOC的活力,誘導(dǎo)Nrf2及其下游的抗氧化蛋白HO-1的表達(dá),改善糖尿病大鼠腎臟的氧化應(yīng)激狀態(tài);也可通過抑制VEGF的表達(dá)來改善糖尿病時腎臟內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙。3萊菔硫烷對糖尿病大鼠腎臟具有保護(hù)作用,其機制可能是通過改善腎臟氧化應(yīng)激及內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙實現(xiàn)的。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R587.2
【目錄】：

下載全文 更多同類文獻(xiàn)

CAJ全文下載

(如何獲取全文？ 歡迎：購買知網(wǎng)充值卡、在線充值、在線咨詢)

CAJViewer閱讀器支持CAJ、PDF文件格式

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 馮敏;徐成波;溫俊平;林桂芳;呂琦;黃國良;;糖基化終產(chǎn)物對人腎小球系膜細(xì)胞氧化應(yīng)激及MCP-1表達(dá)的影響及機制[J];中國應(yīng)用生理學(xué)雜志;2014年04期

2 邵侃;黃珊;盧蘇梅;湯瑜斌;衡曉湘;裘佳穎;夏莉莉;;人體生物刺激反饋儀對2型糖尿病患者心血管自主神經(jīng)病變的篩查及相關(guān)危險因素分析[J];中國全科醫(yī)學(xué);2013年23期

3 馮曉紅;楊雪輝;吳巧敏;魏佳平;;高尿酸血癥對早期2型糖尿病腎病的影響[J];中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2010年08期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 韓孟;;針灸聯(lián)合硫辛酸治療糖尿病心血管自主神經(jīng)病變臨床觀察[J];中醫(yī)臨床研究;2016年21期

2 靳建忠;張榮;趙麗芝;;阿魏酸鈉治療糖尿病自主神經(jīng)病變的臨床效果觀察[J];醫(yī)學(xué)理論與實踐;2016年06期

3 李業(yè)瓊;;AGEs介導(dǎo)的糖尿病腎損傷機制及二甲雙胍的干預(yù)作用[J];臨床與病理雜志;2016年03期

4 樊文萍;商靜;楊彥娟;侯明輝;王建國;;2型糖尿病高血尿酸患者腎小球損傷及心腦血管事件發(fā)生情況分析[J];山東醫(yī)藥;2015年47期

5 路萬虹;張曉田;成少利;施秉銀;;復(fù)方丹參滴丸對大鼠糖尿病腎病早期的腎臟保護(hù)及作用機制[J];西安交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2016年01期

6 董春芳;李麗;;高尿酸血癥對2型糖尿病早期患者腎臟的危害性[J];國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志;2015年22期

7 任興芬;劉家生;;基于氧化應(yīng)激探討益氣活血通絡(luò)法防治糖尿病腎病[J];中醫(yī)藥臨床雜志;2015年09期

8 王欣;;趨化因子與糖尿病腎病關(guān)系的研究進(jìn)展[J];內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)雜志;2015年08期

9 陳予;林夏舫;陳景;;2型糖尿病腎病患者血尿酸水平與胰島素抵抗和腎臟損害的相關(guān)性分析[J];牡丹江醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2015年04期

10 戴彧君;翁敏;;2型糖尿病腎病相關(guān)危險因素分析[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2015年11期

【二級參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張利華;張薇;韋廣洪;楊沛;劉軍;牛曉琳;;α-亞麻酸對糖尿病大鼠炎癥介質(zhì)和氧化應(yīng)激的影響[J];中國應(yīng)用生理學(xué)雜志;2012年01期

2 鐘林娜;黃國良;馮敏;張瑩;;纈沙坦對人腎小球系膜細(xì)胞糖基化終產(chǎn)物受體表達(dá)的影響[J];中國應(yīng)用生理學(xué)雜志;2011年03期

3 王俊杰;朱蘇紅;劉梅芳;劉文彥;;尿酸與心腎疾病危險[J];四川生理科學(xué)雜志;2009年03期

4 張慶燕;劉志紅;;高尿酸血癥與腎臟損傷[J];腎臟病與透析腎移植雜志;2009年03期

5 陳惠萍;劉志紅;;提高高尿酸血癥腎臟損害的認(rèn)識[J];腎臟病與透析腎移植雜志;2009年03期

6 蔣升;李素華;;老年高尿酸血癥與糖尿病前期及胰島素抵抗的關(guān)系[J];中國全科醫(yī)學(xué);2009年01期

7 李香玲;郭振濤;劉曉霞;張喜燕;肖青;謝海;;~(99)Tc~m-DTPA腎動態(tài)顯像與β_2-MG及mAlb聯(lián)合檢測對糖尿病患者早期腎功能損害診斷價值的探討[J];中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2008年12期

8 任昊;劉宏發(fā);劉鄭榮;;高尿酸血癥和腎臟[J];現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志;2008年01期

9 張改華;饒向榮;;尿酸在慢性腎臟疾病進(jìn)展中的可能作用[J];中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2007年07期

10 寧光;;糖尿病周圍神經(jīng)病變診斷研究進(jìn)展[J];中國實用內(nèi)科雜志;2007年07期

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 夏薇,趙秀娟,吳坤,苑林宏;北方12種蔬菜中萊菔硫烷含量的測定[J];疾病控制雜志;2005年03期

2 孫超,仉郁芝;硫烷硫代謝庫[J];醫(yī)教研究;1995年03期

3 李斕;喻姍姍;李玲玉;吳曉穎;陳宴林;趙敬;;萊菔硫烷對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及機制研究[J];中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志;2012年04期

4 林娜;單毓娟;趙瑞芳;袁超;王舒然;;萊菔硫烷對血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子表達(dá)影響[J];中國公共衛(wèi)生;2009年03期

5 張國良;趙秀娟;張宇秋;趙艷;張海金;吳坤;;蔬菜中萊菔硫烷提取工藝的正交優(yōu)選[J];哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2009年06期

6 胡麗貞;李雅杰;薛宏鳳;王舒然;;萊菔硫烷對高脂環(huán)境下心肌細(xì)胞保護(hù)作用[J];中國公共衛(wèi)生;2013年10期

7 胡曄;梁浩;袁其朋;;十字花科植物種子中萊菔硫烷的薄層色譜鑒別[J];北京化工大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2006年02期

8 王麗紅;劉娟;王桂艷;杜娟;;光果葶藶中萊菔硫烷的提取及含量測定[J];中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué);2010年04期

9 張小林;翁惠萍;張海燕;;蘿卜硫烷的研究進(jìn)展[J];化工中間體;2008年12期

10 張小林;;蘿卜硫烷的研究進(jìn)展[J];化工中間體;2010年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 張國良;趙秀娟;張宇秋;吳坤;;蔬菜中萊菔硫烷的提取與純化技術(shù)[A];第四屆第二次中國毒理學(xué)會食品毒理學(xué)專業(yè)委員會與營養(yǎng)食品所毒理室聯(lián)合召開學(xué)術(shù)會議論文集[C];2008年

2 王敏;李延青;陳建;高艷景;于濤;楊曉云;袁孟彪;;萊菔硫烷誘導(dǎo)鼠結(jié)腸代謝酶活性及生物學(xué)效應(yīng)的實驗研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國消化病學(xué)術(shù)會議論文匯編（下冊）[C];2007年

3 潘萌;黃睿;何燦霞;趙越;單毓娟;;萊菔硫烷通過p38-NF-κB通路抑制環(huán)氧化酶-2的表達(dá)[A];中國毒理學(xué)會第三屆中青年學(xué)者科技論壇暨2011年全國前列腺藥理毒理學(xué)研討會論文集[C];2011年

4 楊方星;莊樹林;張超;戴和平;劉維屏;;萊菔硫烷對二噁英毒性的保護(hù)作用[A];第七次全國分析毒理學(xué)大會暨第四屆分析毒理專業(yè)委員會第二次會議論文摘要集[C];2012年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 劉霞;[N];科技日報;2011年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 梁浩;萊菔硫烷的制備及其抗癌活性的研究[D];北京化工大學(xué);2007年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李琳;Nrf2、HO-1、VEGF在糖尿病大鼠腎臟中表達(dá)情況及萊菔硫烷對其干預(yù)作用的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 楊述亮;PI3K/Akt/GSK-3β通路在萊菔硫烷調(diào)控心肌冷缺血再灌注損傷中的作用[D];華北理工大學(xué);2015年

3 肖倩;萊菔硫烷的穩(wěn)定性及胃漂浮片的研究[D];北京化工大學(xué);2007年

4 李揚;西蘭花芽苗菜中萊菔硫烷的分離純化及抗癌活性的測定[D];黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué);2009年

5 王慧;萊菔硫烷載藥體系的制備與評價[D];北京化工大學(xué);2011年

6 付建飛;萊菔硫烷對高脂膳食小鼠糖代謝的調(diào)控作用及機制研究[D];寧波大學(xué);2014年

7 李椿方;大孔吸附樹脂和逆流色譜分離純化萊菔硫烷的研究[D];北京化工大學(xué);2008年

8 閆旭;高純度萊菔硫烷的制備及其工業(yè)化放大研究[D];北京化工大學(xué);2011年

9 張勝智;西蘭花種子中硫代葡萄糖苷的提取及高純度萊菔硫烷的制備工藝研究[D];北京化工大學(xué);2012年

10 李斕;萊菔硫烷對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及機制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年

  本文關(guān)鍵詞：Nrf2、HO-1、VEGF在糖尿病大鼠腎臟中表達(dá)情況及萊菔硫烷對其干預(yù)作用的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：178030