本文選題：丹酚酸B + 糖尿病�。� 參考：《皖南醫(yī)學院》2017年碩士論文

【摘要】：目的:觀察丹酚酸B對糖尿病血糖波動模型大鼠胰島細胞的保護作用,并探討其可能機制。方法:1.動物實驗:采用高糖高脂加一次性腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)40mg·kg-1誘導糖尿病大鼠模型。將造模成功的大鼠(隨機血糖≥16.7 mmol/L)隨機分為波動血糖組(雙蒸水,5 ml·kg-1·d-1)、丹酚酸B高、低劑量組(160 mg·kg-1·d-1及80mg·kg-1·d-1),另設正常對照組(雙蒸水,5 ml·kg-1·d-1),連續(xù)灌胃給藥6周。波動血糖組與丹酚酸B治療組大鼠通過皮下注射胰島素或灌服葡萄糖建立糖尿病血糖波動模型,期間每周稱重一次,并檢測1日內(nèi)5點血糖波動水平,每2周檢測大鼠空腹血糖變化,于給藥6周末進行口服糖耐量(OGTT)試驗,計算曲線下面積(AUC)。腹主動脈取血,檢測大鼠血清總膽固醇(TC)、糖化血紅蛋白(GHb)和空腹血清胰島素(FINS)水平,并計算胰島素敏感指數(shù)(ISI)和胰島素抵抗指數(shù)(IR);測定血清和胰腺組織中總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量和胰腺組織Caspase-9、Caspase-3活性;HE染色及TUNEL染色分別檢測胰腺組織病理學改變及胰島細胞凋亡水平;Western blot法檢測胰腺組織JNK、NF-κB活化水平及胰十二指腸同源盒-1(PDX-1)、Bax、Bcl-2、Bim蛋白表達水平。2.INS-1細胞實驗:INS-1細胞與丹酚酸B(1×10-5,10-6,10-7mol/L)預孵24 h后暴露于間歇性高糖(11.1 mmol/L 12 h,33.3 mmol/L 12 h)72 h。CCK8法測定INS-1細胞活力,ELISA法檢測葡萄糖刺激的胰島素釋放水平,流式細胞術檢測細胞凋亡水平,熒光探針DCFH-DA、JC-1分別測定細胞內(nèi)活性氧(ROS)水平和線粒體膜電位變化,比色法測定細胞T-AOC、MDA含量及Caspase-9、Caspase-3活性,Western blot法檢測細胞JNK、NF-κB活化水平和PARP、PDX-1、Bax、Bcl-2、Bim蛋白表達情況。結果:1.動物實驗:(1)丹酚酸B可明顯增加糖尿病大鼠體重,降低糖化血紅蛋白含量,改善糖耐量水平(P0.05或P0.01)。(2)丹酚酸B可顯著增加胰島素分泌水平,降低空腹血糖、血清總膽固醇水平(P0.05或P0.01),改善胰島素抵抗并提高胰島素敏感指數(shù)(P0.05)。(3)丹酚酸B可明顯改善糖尿病大鼠胰島病理學改變,減少胰島細胞損傷,抑制JNK、NF-κB活化水平(P0.05或P0.01)。(4)丹酚酸B可明顯抑制糖尿病大鼠胰島細胞凋亡,上調(diào)PDX-1、Bcl-2蛋白水平,下調(diào)Bax、Bim蛋白表達(P0.05或P0.01),降低Caspase-9、Caspase-3活性(P0.05或P0.01)。(5)丹酚酸B能顯著提高大鼠血清及胰腺組織中SOD活性,增強總抗氧化能力(P0.05或P0.01),降低MDA水平(P0.05或P0.01)。2.INS-1細胞實驗:(1)丹酚酸B可明顯改善間歇性高糖誘導的INS-1細胞損傷和凋亡,增強細胞活力,上調(diào)Bcl-2蛋白表達,下調(diào)Bax、Bim表達水平,降低Caspase-9、Caspase-3活性和PARP剪切水平(P0.05或P0.01)。(2)丹酚酸B能顯著提高線粒體膜電位水平和胰島素釋放(P0.05或P0.01),增加PDX-1蛋白表達(P0.05或P0.01)。(2)丹酚酸B可明顯增強INS-1細胞總抗氧化能力,降低細胞內(nèi)ROS水平和MDA含量,抑制JNK、NF-κB活化水平(P0.05或P0.01)。結論:1.丹酚酸B可明顯改善糖尿病血糖波動模型大鼠胰島功能,抑制胰島細胞凋亡;2.丹酚酸B抑制胰島β細胞凋亡、增加胰島素分泌水平與增強抗氧化能力,抑制應激敏感性JNK、NF-κB信號通路、上調(diào)PDX-1蛋白表達有關;3.丹酚酸B抑制胰島β細胞凋亡還與調(diào)節(jié)Bcl-2家族蛋白表達失衡、降低線粒體膜通透性、進而抑制Caspase-9、Caspase-3活性有關。
[Abstract]:鐩殑:瑙傚療涓歸厷閰窧瀵圭硸灝跨梾琛，

本文編號：1754563