胡椒堿對(duì)HepG2細(xì)胞胰島素抵抗模型糖代謝AMPK信號(hào)通路上游靶點(diǎn)干預(yù)機(jī)制的研究
本文關(guān)鍵詞: 胡椒堿 磷酸腺苷激活的蛋白激酶 胰島素抵抗 瘦素 脂聯(lián)素 出處:《中國(guó)中藥雜志》2017年03期 論文類型:期刊論文
【摘要】:探討胡椒堿對(duì)胰島素抵抗(insulin resistance,IR)細(xì)胞模型糖代謝紊亂的作用及干預(yù)AMPK信號(hào)通路上游靶點(diǎn)的分子機(jī)制。通過脂肪乳誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞構(gòu)建胰島素抵抗模型。葡萄糖氧化酶(GOD-POD)法檢測(cè)各組葡萄糖消耗量;酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)法檢測(cè)上清液中脂聯(lián)素(adiponectin,APN)、瘦素(leptin,LEP)的水平;熒光定量PCR法檢測(cè)APN,LEP mRNA的表達(dá)水平,Western blotting法檢測(cè)AMPKα,р-AMPKα,瘦素受體(LepR),脂聯(lián)素受體1(AdipoR1)和脂聯(lián)素受體2(AdipoR2)蛋白的表達(dá)。結(jié)果顯示,胡椒堿與降糖藥羅格列酮、AMPK激動(dòng)劑AICAR均能明顯提高胰島素抵抗細(xì)胞模型的葡萄糖消耗量,升高脂聯(lián)素水平、增加脂聯(lián)素mRNA、脂聯(lián)素受體1蛋白的表達(dá),也增加AMPKαmRNA和р-AMPKα蛋白表達(dá);同時(shí)降低瘦素mRNA和瘦素受體蛋白的表達(dá)。結(jié)果表明,胡椒堿能顯著改善胰島素抵抗細(xì)胞模型糖代謝紊亂,其作用機(jī)制可能通過調(diào)控上游脂聯(lián)素和瘦素的表達(dá),從而激活A(yù)MPK信號(hào)通路。
[Abstract]:To investigate the effect of piperine on glucose metabolism disorder in insulin resistant insulin resistance (IRI) cell model and the molecular mechanism of interfering with upstream target of AMPK signaling pathway. Insulin resistance model was induced by fat emulsion in HepG2 cells. Glucose oxidase was used to induce insulin resistance in HepG2 cells. The glucose consumption in each group was measured by HPLC. Enzyme linked immunosorbent assay (Elisa) was used to detect the levels of adiponectin (AdipoR1) and leptin (AdipoR1) in the supernatant, and the expression of APNP-LEP mRNA by fluorescence quantitative PCR and AMPK 偽, AMPK 偽, leptin receptor 1 (AdipoR1) and adiponectin receptor 2AdipoR2 (AdipoR2) were detected by Western blotting. Both piperine and rosiglitazone AMPK agonist AICAR significantly increased glucose consumption, adiponectin level, adiponectin mRNAs, adiponectin receptor 1 protein expression and AMPK 偽 mRNA and mapk 偽 protein expression in insulin-resistant cells. At the same time, the expression of leptin mRNA and leptin receptor protein was decreased. The results showed that piperine could significantly improve the glucose metabolism disorder in insulin resistant cells, and its mechanism might be by regulating the expression of adiponectin and leptin in the upstream of insulin resistance cells. Thus, the AMPK signaling pathway is activated.
【作者單位】: 云南中醫(yī)學(xué)院國(guó)家中醫(yī)藥管理局中藥藥理(免疫)三級(jí)實(shí)驗(yàn)室;云南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81260671)
【分類號(hào)】:R587.1
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1554479
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