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水蕨抗艾滋病病毒蛋白CVNH及其突變體在畢赤酵母中的表達(英文)

發(fā)布時間:2018-01-29 03:04

  本文關(guān)鍵詞: 抗HIV蛋白 水蕨 突變體 畢赤酵母 出處:《中山大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)》2017年04期  論文類型:期刊論文


【摘要】:CVN(Cyanovirin-N)是一種高效的抗HIV蛋白。Cyanovirin-N(CVNH)家族是CVN的同源蛋白,具有與CVN的肽鏈折疊類型并且具有高度保守的抗HIV的結(jié)構(gòu)域。把水蕨Ceratopteris thalictroides野生型和突變型CtCVNH蛋白的編碼序列分別克隆到真核表達載體pP ICZαA,結(jié)果所有野生型wC tC VNH和突變型mCtCVNH基因分別產(chǎn)生兩條帶,Western blot確認(rèn)大小分別為22 000和24 000。采用超濾離心和Ni-NTA親和色譜法純化蛋白質(zhì),糖基化檢測證實wC tC VNH蛋白不存在N-糖基化位點,可能的原因是載體pPICZαA中α因子信號肽序列的不完全切割或存在一些非糖基化的其它翻譯后修飾,為今后進一步研究CtCVNH的藥代動力學(xué)和藥效學(xué)奠定了堅實的基礎(chǔ)。
[Abstract]:CVN Cyanovirin-N) is a highly efficient family of anti HIV protein. Cyanovirin-Ncv CVN family is a homologous protein of CVN. Has a peptide chain folding type with CVN and has a highly conserved domain of resistance to HIV. Ceratopteris. The encoding sequences of thalictroides wild-type and mutant CtCVNH protein were cloned into eukaryotic expression vector pP ICZ 偽 A. Results all wild-type wC tCVNH and mutant mCtCVNH genes produced two bands respectively. The size of Western blot was 22 000 and 24 000, respectively. The protein was purified by ultrafiltration centrifugation and Ni-NTA affinity chromatography. The results of glycosylation showed that there was no N-glycosylation site in WTC VNH protein. This may be due to incomplete cleavage of the 偽 -factor signal peptide sequence in the vector pPICZ 偽 A or other non-glycosylated post-translational modifications. It lays a solid foundation for the further study of pharmacokinetics and pharmacodynamics of CtCVNH.
【作者單位】: 中山大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;南京農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;華南農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;中山大學(xué)深圳研究院;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(31370364,31570652,31670200) 深圳市科技創(chuàng)新委員會資助項目(JCYJ20160425165447211)
【分類號】:Q78;R512.91
【正文快照】: AIDS(Acquired Immune Deficiency Syndrome)of the possible occurance of typical drawbacks such asis a global concern epidemic caused by human immu-short plasma half-life,proteolysis,and immunogenici-nodeficiency virus(HIV),which forces a great impactty,it

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本文編號:1472331

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