本文關(guān)鍵詞：胞外酸化對大鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞焦亡的影響及可能機制

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【摘要】：目的觀察胞外酸化對大鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞焦亡的影響,研究該過程中可能機制。方法利用酶消化法獲得原代大鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞。軟骨細胞分為不同pH處理組(pH7.4、pH 7.0、pH 6.5和pH 6.0)以及pH6.0酸化不同時間組(0、6、12、24、48 h),經(jīng)ROS還原劑NAC預(yù)處理的酸化組和正常組,Real-time PCR和Western blot觀察各組促炎細胞因子IL-1β、IL-18和炎癥小體組成成分ASC、NLRP3、caspase-1基因和蛋白的表達情況,ELISA檢測各組細胞培養(yǎng)基中的IL-1β、IL-18含量,AO/EB染色和LDH細胞毒性檢測試劑盒分析細胞的死亡情況,ROS測定試劑盒觀察細胞內(nèi)ROS熒光強弱。結(jié)果與pH 7.4組比較,酸化組的促炎細胞因子IL-1β、IL-18和炎癥小體組成成分ASC、NLRP3、caspase-1基因和蛋白的表達明顯增加,熒光顯微鏡觀察到ROS熒光明顯增強,AO/EB染色和LDH檢測實驗發(fā)現(xiàn)酸化可以誘導(dǎo)軟骨細胞死亡,且pH 6.0酸化處理組效果最明顯;ROS還原劑NAC預(yù)處理可以明顯下調(diào)IL-1β、IL-18、ASC、NLRP3、caspase-1基因和蛋白的表達,并且明顯減弱軟骨細胞內(nèi)ROS熒光,同時明顯下調(diào)細胞死亡率。結(jié)論胞外酸化可能通過上調(diào)細胞內(nèi)ROS的含量,促使軟骨細胞發(fā)生焦亡。
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 關(guān)節(jié)炎 關(guān)節(jié)軟骨細胞 細胞焦亡 炎癥小體 ROS NAC
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(No 81271949,30873080)
【分類號】：R593.22
【正文快照】： R593.22類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)是一種難治性多系統(tǒng)的免疫性疾病,累及患者的外周關(guān)節(jié),具有較高的致殘、致畸性,對人類的健康危害很大[1]。研究表明,關(guān)節(jié)腔內(nèi)炎性代謝物聚集導(dǎo)致的關(guān)節(jié)液p H值下降(可降至6.0及以下)是RA發(fā)病的主要原因之一,可導(dǎo)致軟骨細胞過度凋

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