本文關(guān)鍵詞：激光拉曼光譜系統(tǒng)下實(shí)時(shí)、非標(biāo)記監(jiān)測胰島β細(xì)胞胞吐活動(dòng)的研究

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【摘要】：目的：在單細(xì)胞水平上實(shí)時(shí)監(jiān)測胰島β細(xì)胞胞外分泌胰島素活動(dòng)既往主要有以下傳統(tǒng)的電生理學(xué)方法,如通常需要侵入性微電極穿刺或熒光蛋白標(biāo)記的全內(nèi)反射成像技術(shù)和雙光子成像技術(shù)。本研究通過利用激光鑷子拉曼光譜儀從胰島β細(xì)胞邊緣附近的區(qū)域捕獲胞吐活動(dòng)可能產(chǎn)生的拉曼散射信號(hào),證實(shí)拉曼光譜系統(tǒng)能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測胰島p細(xì)胞胰島素的胞吐活動(dòng),并建立拉曼光譜系統(tǒng)下細(xì)胞胞吐觀察的實(shí)驗(yàn)體系。方法：本研究通過將高濃度葡萄糖、氯化鉀作為刺激組,刺激胰島p細(xì)胞胞外分泌胰島素；而低濃度的葡萄糖和鈣通道阻滯劑(硝苯地平)分別作為空白對(duì)照組和條件對(duì)照組。單細(xì)胞水平上應(yīng)用：激光鑷子拉曼光譜儀從細(xì)胞邊緣附近的區(qū)域捕獲可能的拉曼光譜散射信號(hào)；FM1-43染料鑒定胰島p細(xì)胞胞吐位點(diǎn)。群體細(xì)胞水平上應(yīng)用：放射免疫法測胰島素含量,從而推測胰島素分泌情況。結(jié)果：單細(xì)胞水平上：刺激前各實(shí)驗(yàn)組之間光譜信號(hào)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；加入處理因素后,從刺激組細(xì)胞邊緣捕獲到的有意義的拉曼光譜信號(hào)不僅頻率比空白對(duì)照組和條件對(duì)照組多,而且光譜信號(hào)強(qiáng)度較強(qiáng),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；FM1-43染料染色后刺激組的細(xì)胞熒光強(qiáng)度較空白對(duì)照組和條件對(duì)照組強(qiáng),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而高糖組與氯化鉀組之間熒光強(qiáng)度無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。群體細(xì)胞水平上：刺激前各實(shí)驗(yàn)組胰島素分泌量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),加入處理因素后刺激組胰島素分泌量較空白對(duì)照組和條件對(duì)照組多,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),且與時(shí)間沒有關(guān)聯(lián)性(P0.05)。結(jié)合胰島p細(xì)胞細(xì)胞膜和胰島素的拉曼光譜信號(hào)進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)本研究所捕抓的拉曼光譜信號(hào)類似于胰島β細(xì)胞細(xì)胞膜的光譜信號(hào),而與胰島素的光譜信號(hào)相差較大。結(jié)論：1.胞吐活動(dòng)中在細(xì)胞邊緣所捕抓到的有意義拉曼光譜信號(hào)頻率與胞吐活動(dòng)的旺盛程度呈正相關(guān)。2.胞吐活動(dòng)中在細(xì)胞邊緣所捕抓到的有意義拉曼光譜信號(hào)類似于胰島β細(xì)胞細(xì)胞膜的光譜信號(hào)。3.拉曼光譜技術(shù)可以作為一種非侵入性、非標(biāo)記性地實(shí)時(shí)監(jiān)測胰島β細(xì)胞胞吐活動(dòng),特別是局部細(xì)胞膜空間結(jié)構(gòu)及物理性質(zhì)改變。
【關(guān)鍵詞】：胞吐活動(dòng) 單細(xì)胞光鑷?yán)饧夹g(shù) 胰島β細(xì)胞 拉曼光譜
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：O657.37;R587.1
【目錄】：

• 個(gè)人簡歷3-5
• 英文縮略詞表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-13
• 材料和方法13-30
• 結(jié)果30-36
• 討論36-40
• 結(jié)論40
• 參考文獻(xiàn)40-43
• 綜述43-55
• 綜述參考文獻(xiàn)50-55
• 致謝55-57
• 攻讀碩士研究生期間發(fā)表的論文57

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1008468