本文關(guān)鍵詞：運(yùn)動干預(yù)對大鼠多囊卵巢綜合征的影響和作用機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： 運(yùn)動干預(yù) 多囊卵巢綜合征 卵泡發(fā)育 瘦素抵抗 OB-Rb

【摘要】：目的觀察運(yùn)動干預(yù)對大鼠多囊卵巢綜合征的影響,研究瘦素(leptin)及其長型受體(OBRb)以及細(xì)胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制物3(SOCS3)在干預(yù)前后的變化,揭示運(yùn)動預(yù)防大鼠PCOS的作用機(jī)制,為明確PCOS的發(fā)病機(jī)制、預(yù)防和控制PCOS提供科學(xué)依據(jù)。方法本實(shí)驗(yàn)采取完全隨機(jī)設(shè)計(completely random design),設(shè)置對照組、模型組和干預(yù)組進(jìn)行實(shí)驗(yàn),其中干預(yù)組采取運(yùn)動的干預(yù)方式,分為高(2h/d)、中(1h/d)、低(0.5h/d)三個運(yùn)動強(qiáng)度。放射免疫法測大鼠血清性激素、空腹胰島素、瘦素水平;HE染色觀察卵巢組織學(xué)變化;實(shí)時熒光定量PCR法檢測大鼠卵巢組織中l(wèi)eptin、OB-Rb以及SOCS3mRNA水平;蛋白免疫印跡法檢測卵巢中OB-Rb及SOCS3蛋白水平;免疫組化法檢測OB-Rb、SOCS3蛋白在卵巢中的表達(dá)部位和強(qiáng)度。結(jié)果大鼠一般情況模型組大鼠PCOS構(gòu)建成功,表現(xiàn)為肥胖、瘦素抵抗、性激素紊亂、無排卵和卵巢內(nèi)大量囊狀卵泡;空腹胰島素(FINS)、瘦素(leptin)水平升高。0.5h干預(yù)組大鼠體重、血清性激素、瘦素水平均與模型組無統(tǒng)計學(xué)差別(P0.05);動情周期類似,卵巢內(nèi)含大量囊狀卵泡,罕見正常卵泡和黃體;空腹胰島素水平小幅下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。1h/d的運(yùn)動干預(yù)減輕了大鼠的體重,使之與對照組無統(tǒng)計學(xué)差別(P0.05),并幫助大鼠恢復(fù)排卵功能;卵巢內(nèi)可見正常卵泡和黃體,伴囊狀卵泡;孕酮(P)水平較模型組顯著上升但仍低于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);卵泡刺激素(FSH)水平顯著上升,FINS、leptin水平大幅降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),均與對照組水平無統(tǒng)計學(xué)差別(P0.05)。除雌二醇(E2)濃度低于對照組水平之外,2h干預(yù)組大鼠在體重、動情周期、卵巢形態(tài)學(xué)方面均有良好表現(xiàn):2h/d的運(yùn)動降低了PCOS大鼠睪酮(T)、黃體生成素(LH)、FINS、leptin水平,也提升了P和FSH水平,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);。卵巢組織中l(wèi)eptin、OB-Rb以及SOCS3基因的轉(zhuǎn)錄水平模型組大鼠卵巢leptin和SOCS3 mRNA高于對照水平,OB-Rb mRNA水平低于對照,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。0.5h干預(yù)組大鼠卵巢中l(wèi)eptin mRNA沒有發(fā)生變化,與模型組無統(tǒng)計學(xué)差別(P0.05),但OB-Rb mRNA升高,SOCS3 mRNA降低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。1h干預(yù)組大鼠卵巢中l(wèi)eptin mRNA低于0.5h組水平,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);OB-Rb mRNA和SOCS3 mRNA均與0.5h組水平無差別(P0.05)。2h組大鼠卵巢leptin mRNA水平與對照組無統(tǒng)計學(xué)差別(P0.05);OB-Rb mRNA、SOCS3 mRNA水平均高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。卵巢組織中OB-Rb、SOCS3基因的翻譯水平和表達(dá)部位OB-Rb在各階段發(fā)育卵泡的顆粒細(xì)胞以及卵母細(xì)胞中均有表達(dá)。隨著卵泡的發(fā)育,卵泡的顆粒細(xì)胞和卵母細(xì)胞中OB-Rb表達(dá)呈逐漸增強(qiáng)的趨勢。模型組和0.5h干預(yù)組各發(fā)育卵泡顆粒細(xì)胞和卵母細(xì)胞中OB-Rb表達(dá)量均顯著低于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。1h和2h的運(yùn)動干預(yù)促進(jìn)了卵泡和卵母細(xì)胞中OB-Rb的表達(dá),顯著高于模型組(P0.05)。三個干預(yù)組囊狀卵泡顆粒細(xì)胞中OB-Rb表達(dá)量在組間無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05),均高于模型組水平(P0.05)。SOCS3與OB-Rb的表達(dá)部位一致。在顆粒細(xì)胞中,發(fā)育卵泡中SOCS3的表達(dá)量與OB-Rb呈現(xiàn)相反趨勢;而在卵母細(xì)胞中則無明顯差別。0.5h和1h干預(yù)組各發(fā)育卵泡中SOCS3的表達(dá)量均低于模型組但高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),而2h干預(yù)組出現(xiàn)異常增高,這很可能與2h運(yùn)動干預(yù)顯著促進(jìn)OB-Rb在卵巢中的表達(dá)有關(guān)。結(jié)論瘦素抵抗是PCOS發(fā)病的原因之一;適量的運(yùn)動通過提高卵巢中OB-Rb的基因表達(dá)水平,改善瘦素抵抗,促進(jìn)卵泡發(fā)育,從而達(dá)到預(yù)防PCOS發(fā)病的效果。
【關(guān)鍵詞】：運(yùn)動干預(yù) 多囊卵巢綜合征 卵泡發(fā)育 瘦素抵抗 OB-Rb
【學(xué)位授予單位】：廣東藥科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R711.75
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• 第一章 序言10-14
• 1.1 多囊卵巢綜合征概述10
• 1.2 PCOS的診斷標(biāo)準(zhǔn)10-11
• 1.3 PCOS研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)與難點(diǎn)11-13
• 1.3.1 瘦素抵抗11-12
• 1.3.2 治療方法12
• 1.3.3 疾病預(yù)防12
• 1.3.4 PCOS動物模型12-13
• 1.4 本研究的主要目的與內(nèi)容13-14
• 第二章 運(yùn)動干預(yù)對大鼠多囊卵巢綜合征的影響14-28
• 2.1 引言14
• 2.2 實(shí)驗(yàn)材料14-15
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)動物14
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑14-15
• 2.2.3 主要儀器15
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法15-18
• 2.3.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計15
• 2.3.2 樣本量的確定15-16
• 2.3.3 實(shí)驗(yàn)步驟16-18
• 2.3.4 統(tǒng)計學(xué)分析18
• 2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果18-25
• 2.4.1 大鼠血清性激素水平比較18-19
• 2.4.2 大鼠動情周期變化19-21
• 2.4.3 大鼠卵巢形態(tài)和組織學(xué)變化21-23
• 2.4.4 大鼠體重變化23-24
• 2.4.5 大鼠血脂、空腹胰島素和瘦素水平比較24-25
• 2.5 討論25-28
• 2.5.1 PCOS大鼠模型評價25
• 2.5.2 運(yùn)動干預(yù)對大鼠多囊卵巢綜合征的影響25-28
• 第三章 運(yùn)動預(yù)防大鼠多囊卵巢綜合征的機(jī)制28-51
• 3.1 引言28-29
• 3.2 實(shí)驗(yàn)材料29-31
• 3.2.1 實(shí)驗(yàn)樣品29
• 3.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑29-30
• 3.2.3 主要儀器30-31
• 3.3 實(shí)驗(yàn)方法31-41
• 3.3.1 實(shí)時熒光定量PCR (Real-time PCR)31-34
• 3.3.2 蛋白免疫印跡 (Western Blot)34-39
• 3.3.3 免疫組化 (Immunocytochemistry)39-40
• 3.3.4 統(tǒng)計學(xué)分析40-41
• 3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果41-47
• 3.4.1 leptin、OB-Rb、SOCS3 mRNA在大鼠卵巢中的表達(dá)41-42
• 3.4.2 OB-Rb、SOCS3蛋白在大鼠卵巢中的表達(dá)42-43
• 3.4.3 OB-Rb、SOCS3蛋白在大鼠卵巢中的定位表達(dá)43-47
• 3.5 討論47-51
• 3.5.1 大鼠PCOS發(fā)病的可能原因47-48
• 3.5.2 運(yùn)動干預(yù)對大鼠卵巢中l(wèi)eptin、OB-Rb基因表達(dá)的影響48-50
• 3.5.3 運(yùn)動干預(yù)對大鼠卵巢中SOCS3基因表達(dá)的影響50-51
• 第四章 結(jié)論51-53
• 4.1 運(yùn)動干預(yù)對大鼠PCOS的影響和作用機(jī)制51-52
• 4.2 全文總結(jié)52
• 4.3 研究的局限與不足52-53
• 參考文獻(xiàn)53-61
• 攻讀碩士學(xué)位期間的學(xué)術(shù)成果61-62
• 致謝62

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本文編號：1008287