Rock蛋白抑制劑法舒地爾對前列腺癌PC3、DU145細(xì)胞侵襲、遷移和凋亡的影響
發(fā)布時間:2017-08-25 20:35
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【摘要】:目的:探討Rho A/Rock信號傳導(dǎo)通路在前列腺癌形成過程中的可能作用;研究Rock蛋白抑制劑法舒地爾潛在抗腫瘤侵襲、遷移和促凋亡的作用。方法:分別用5、10、20、40、80、160μmol/L濃度的法舒地爾作用于前列腺癌PC3、DU145細(xì)胞24 h,MTT法檢測細(xì)胞增殖抑制率,并計算其IC50,取法舒地爾IC50的1/4作為給藥劑量用于進(jìn)一步研究。免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測法舒地爾對PC3、DU145細(xì)胞Rho A、RockⅠ、RockⅡ蛋白表達(dá)的影響;Western印跡檢測法舒地爾對PC3、DU145細(xì)胞Rho A總蛋白、Rho A膜蛋白、RockⅠ、RockⅡ蛋白表達(dá)的影響;通過Transwell、劃痕實驗、流式細(xì)胞術(shù)評估細(xì)胞的侵襲、遷移、凋亡情況。結(jié)果:隨著法舒地爾作用濃度的增加,對PC3、DU145的抑制率分別從(9.29±1.23)%、(7.59±1.54)%增加到(81.37±3.97)%、(76.53±2.67)%,呈一定劑量依賴性(P均0.05);細(xì)胞遷移實驗中實驗組穿入下室的PC3、DU145細(xì)胞為(39.2±8.4)個和(34.2±6.7)個,陰性對照組分別為(116.8±9.3)和(112.5±10.8)個,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均0.05);劃痕實驗結(jié)果顯示實驗組PC3、DU145細(xì)胞24 h劃痕愈合率為(37.26±1.17)%和(32.38±2.73)%,陰性對照組愈合率為(78.12±4.16)%和(69.47±6.71)%(P均0.05);Annexin V-FITC/PI雙染色法的結(jié)果顯示,法舒地爾作用PC3、DU145細(xì)胞后凋亡率分別為(31.88±2.49)%、(28.65±2.99)%,顯著高于陰性對照組[(7.51±2.28)%、(7.13±1.61)%,P均0.05]。免疫細(xì)胞化學(xué)檢測顯示,法舒地爾能明顯降低RockⅠ和RockⅡ的表達(dá)(與陰性對照組比較P均0.05),而Rho A的表達(dá)與陰性對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);Western印跡也顯示,法舒地爾也明顯降低Rho A膜蛋白、RockⅠ、RockⅡ蛋白的表達(dá)(與陰性對照組比較P均0.05),而Rho A總蛋白表達(dá)與陰性對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:Rho A/Rock信號傳導(dǎo)途徑可能參與了前列腺癌的形成;法舒地爾能夠有效地抑制前列腺癌細(xì)胞的增殖、侵襲、遷移,并促進(jìn)其凋亡,其機制可能與法舒地爾下調(diào)Rho A/Rock信號通路有關(guān)。
【作者單位】: 南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院男科;
【關(guān)鍵詞】: 前列腺癌 RhoA/Rock通路 法舒地爾 侵襲 凋亡 PC DU
【基金】:南京市醫(yī)學(xué)科技發(fā)展項目(YKK14078)~~
【分類號】:R737.25
【正文快照】: Effects of the Rho-kinase inhibitor fasudil on the invasion,migration,and apoptosisof human prostate cancer PC3 and DU145 cellsGAO Qing-qiang,CHEN Hai,CHEN Yun,XU Zhi-peng,ZHU Lei-lei,YU Wen,HAN You-feng,DAI Yu-tianDepartment of Andrology,Drum Tower Hosp
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,本文編號:738167
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