本文關(guān)鍵詞：膀胱癌患者T淋巴細(xì)胞表達(dá)及遷移能力的變化以及PEDF在膀胱癌患者T淋巴細(xì)胞中的表達(dá)觀察，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：比較膀胱腫瘤細(xì)胞裂解物及腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清液對(duì)T淋巴細(xì)胞遷移能力影響的不同,檢測(cè)膀胱癌患者外周血中T淋巴細(xì)胞及PEDF基因在其內(nèi)細(xì)胞中的表達(dá)水平,探討其與膀胱腫瘤細(xì)胞之間的關(guān)系及它們之間的相關(guān)性,為膀胱癌的早期診斷、治療和判斷預(yù)后提供依據(jù)。方法：選取昆明醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院泌尿外科一病區(qū)2013年12月至2014年11月未經(jīng)治療的膀胱癌患者36例、20例健康志愿者,采集其外周血；通過(guò)淋巴細(xì)胞分離、計(jì)數(shù)技術(shù),明確T淋巴細(xì)胞在外周血的含量。運(yùn)用Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)膀胱腫瘤細(xì)胞裂解物及腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清液對(duì)T淋巴細(xì)胞遷移能力的影響。運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR、Western Blot法檢測(cè)PEDF基因在不同遷移趨化能力的T淋巴細(xì)胞中的表達(dá)。結(jié)果：1.未經(jīng)治療的膀胱癌患者外周血中T淋巴細(xì)胞的表達(dá)顯著低于健康志愿者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；2腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清液及凍融腫瘤細(xì)胞裂解物懸液對(duì)健康人外周血T淋巴細(xì)胞的遷移作用與無(wú)血清RPMI-1640培養(yǎng)液(空白對(duì)照組)相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P0.05),腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清液的遷移作用強(qiáng)于凍融瘤細(xì)胞裂解物懸液(均P0.05)；且在一定時(shí)間范圍內(nèi),腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清液的遷移能力隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)而減弱,(1H培養(yǎng)上清液組4H培養(yǎng)上清液組8H培養(yǎng)上清液組腫瘤細(xì)胞裂解物組1640組)；腫瘤細(xì)胞上清液及凍融腫瘤細(xì)胞裂解物懸液對(duì)患者外周血T淋巴細(xì)胞的遷移作用與無(wú)血清RPMI-1640培養(yǎng)液(空白對(duì)照組)相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P0.05),凍融瘤細(xì)胞裂解物懸液的遷移作用強(qiáng)于腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清液(均P0.05)；且在一定時(shí)間范圍內(nèi),腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清液的遷移能力隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)而減弱,(腫瘤細(xì)胞裂解物組1640組1H培養(yǎng)上清液組4H培養(yǎng)上清液組8H培養(yǎng)上清液組)；腫瘤細(xì)胞上清液及凍融腫瘤細(xì)胞裂解物懸液對(duì)健康志愿者及膀胱癌患者外周血T淋巴細(xì)胞的遷移作用影響的比較：(1)1640培養(yǎng)液：外周血T淋巴細(xì)胞的遷移率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)；膀胱癌患者組健康志愿者組(2)凍融腫瘤細(xì)胞裂解物懸液：外周血T淋巴細(xì)胞的遷移率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)；膀胱癌患者組健康志愿者組(3)腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清液1H：外周血T淋巴細(xì)胞的遷移率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)(4)腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清液4H：外周血T淋巴細(xì)胞的遷移率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)；膀胱癌患者組健康志愿者組(5)腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清液8H：外周血T淋巴細(xì)胞的遷移率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)；膀胱癌患者組健康志愿者組。3.通過(guò)qRT-PCR實(shí)驗(yàn)：PEDFmRNA表達(dá)水平在膀胱癌患者外周血T淋巴細(xì)胞的表達(dá)明顯降低；在不同培養(yǎng)條件下所侵襲出來(lái)的T淋巴細(xì)胞中PEDF基因表達(dá)是不同的,8小時(shí)腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清液表達(dá)最弱(1640組1H培養(yǎng)上清液組腫瘤細(xì)胞裂解物組4H培養(yǎng)上清液組8H培養(yǎng)上清液組)。應(yīng)用Western Blot實(shí)驗(yàn)：PEDF蛋白表達(dá)在膀胱癌患者外周血T淋巴細(xì)胞的表達(dá)明顯降低；在不同培養(yǎng)條件下所侵襲出來(lái)的T淋巴細(xì)胞中PEDF表達(dá)是不同的,8小時(shí)腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清液表達(dá)最弱(1640組1H培養(yǎng)上清液組腫瘤細(xì)胞裂解物組4H培養(yǎng)上清液組8H培養(yǎng)上清液組)。結(jié)論：1.膀胱癌患者外周血T淋巴細(xì)胞及其細(xì)胞比例明顯降低,其可能與膀胱癌細(xì)胞的免疫逃逸及免疫抑制狀態(tài)相關(guān),并可能在膀胱癌的發(fā)生發(fā)展中起重要作用,其具有成為膀胱癌免疫治療靶點(diǎn)的潛在價(jià)值。2.在膀胱腫瘤患者,凍融腫瘤細(xì)胞裂解物對(duì)T淋巴細(xì)胞的遷移能力明顯強(qiáng)于培養(yǎng)一定時(shí)間的膀胱腫瘤細(xì)胞上清液。3.PEDFmRNA及PEDF蛋白表達(dá)在膀胱癌患者外周血T淋巴細(xì)胞的表達(dá)明顯降低,在不同培養(yǎng)條件下所侵襲出來(lái)的T淋巴細(xì)胞中PEDF表達(dá)是不同的,1640組表達(dá)最強(qiáng),8小時(shí)腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清液表達(dá)最弱(1640組1H培養(yǎng)上清液組腫瘤細(xì)胞裂解物組4H培養(yǎng)上清液組8H培養(yǎng)上清液組)。推測(cè)PEDF基因可能參與了T淋巴細(xì)胞增殖、遷移和抗腫瘤免疫。
【關(guān)鍵詞】：膀胱尿路上皮癌 T淋巴細(xì)胞 PEDF 免疫抑制
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.14
【目錄】：

• 中英文縮略詞表5-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-16
• 技術(shù)路線圖16-17
• 第一部分 凍融膀胱癌細(xì)胞裂解物和細(xì)胞培養(yǎng)上清液對(duì)T淋巴細(xì)胞遷移能力的影響17-32
• 1 實(shí)驗(yàn)材料17-18
• 2 實(shí)驗(yàn)方法18-22
• 3 結(jié)果22-27
• 4 討論27-31
• 5 結(jié)論31-32
• 第二部分 PEDF在人外周血T淋巴細(xì)胞中的表達(dá)32-49
• 1 實(shí)驗(yàn)材料32-34
• 2 實(shí)驗(yàn)方法34-40
• 3 結(jié)果40-46
• 4 討論46-48
• 5 結(jié)論48-49
• 總結(jié)49-51
• 參考文獻(xiàn)51-54
• 綜述54-62
• 參考文獻(xiàn)59-62
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章62-63
• 致謝63

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 李嬋玉;韓健;韓磊;黃威;朱書(shū)力;鄭秀惠;郭建新;李力;;PEDF對(duì)小鼠樹(shù)突細(xì)胞表型及免疫功能影響的實(shí)驗(yàn)研究[J];重慶醫(yī)學(xué);2014年12期

2 李金麗;翟心慧;;整合素LFA-1與其配體ICAM-1的生理功能及相關(guān)疾病[J];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào);2013年08期

  本文關(guān)鍵詞：膀胱癌患者T淋巴細(xì)胞表達(dá)及遷移能力的變化以及PEDF在膀胱癌患者T淋巴細(xì)胞中的表達(dá)觀察，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：455283