本文關鍵詞：膀胱癌患者T淋巴細胞表達及遷移能力的變化以及PEDF在膀胱癌患者T淋巴細胞中的表達觀察，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：比較膀胱腫瘤細胞裂解物及腫瘤細胞培養(yǎng)上清液對T淋巴細胞遷移能力影響的不同,檢測膀胱癌患者外周血中T淋巴細胞及PEDF基因在其內(nèi)細胞中的表達水平,探討其與膀胱腫瘤細胞之間的關系及它們之間的相關性,為膀胱癌的早期診斷、治療和判斷預后提供依據(jù)。方法：選取昆明醫(yī)科大學第二附屬醫(yī)院泌尿外科一病區(qū)2013年12月至2014年11月未經(jīng)治療的膀胱癌患者36例、20例健康志愿者,采集其外周血；通過淋巴細胞分離、計數(shù)技術,明確T淋巴細胞在外周血的含量。運用Transwell侵襲實驗檢測膀胱腫瘤細胞裂解物及腫瘤細胞培養(yǎng)上清液對T淋巴細胞遷移能力的影響。運用實時熒光定量PCR、Western Blot法檢測PEDF基因在不同遷移趨化能力的T淋巴細胞中的表達。結果：1.未經(jīng)治療的膀胱癌患者外周血中T淋巴細胞的表達顯著低于健康志愿者,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)；2腫瘤細胞培養(yǎng)上清液及凍融腫瘤細胞裂解物懸液對健康人外周血T淋巴細胞的遷移作用與無血清RPMI-1640培養(yǎng)液(空白對照組)相比,差異均有統(tǒng)計學意義(均P0.05),腫瘤細胞培養(yǎng)上清液的遷移作用強于凍融瘤細胞裂解物懸液(均P0.05)；且在一定時間范圍內(nèi),腫瘤細胞培養(yǎng)上清液的遷移能力隨培養(yǎng)時間的延長而減弱,(1H培養(yǎng)上清液組4H培養(yǎng)上清液組8H培養(yǎng)上清液組腫瘤細胞裂解物組1640組)；腫瘤細胞上清液及凍融腫瘤細胞裂解物懸液對患者外周血T淋巴細胞的遷移作用與無血清RPMI-1640培養(yǎng)液(空白對照組)相比,差異均有統(tǒng)計學意義(均P0.05),凍融瘤細胞裂解物懸液的遷移作用強于腫瘤細胞培養(yǎng)上清液(均P0.05)；且在一定時間范圍內(nèi),腫瘤細胞培養(yǎng)上清液的遷移能力隨培養(yǎng)時間的延長而減弱,(腫瘤細胞裂解物組1640組1H培養(yǎng)上清液組4H培養(yǎng)上清液組8H培養(yǎng)上清液組)；腫瘤細胞上清液及凍融腫瘤細胞裂解物懸液對健康志愿者及膀胱癌患者外周血T淋巴細胞的遷移作用影響的比較：(1)1640培養(yǎng)液：外周血T淋巴細胞的遷移率有統(tǒng)計學差異(P0.05)；膀胱癌患者組健康志愿者組(2)凍融腫瘤細胞裂解物懸液：外周血T淋巴細胞的遷移率有統(tǒng)計學差異(P0.05)；膀胱癌患者組健康志愿者組(3)腫瘤細胞培養(yǎng)上清液1H：外周血T淋巴細胞的遷移率無統(tǒng)計學差異(P0.05)(4)腫瘤細胞培養(yǎng)上清液4H：外周血T淋巴細胞的遷移率有統(tǒng)計學差異(P0.05)；膀胱癌患者組健康志愿者組(5)腫瘤細胞培養(yǎng)上清液8H：外周血T淋巴細胞的遷移率有統(tǒng)計學差異(P0.05)；膀胱癌患者組健康志愿者組。3.通過qRT-PCR實驗：PEDFmRNA表達水平在膀胱癌患者外周血T淋巴細胞的表達明顯降低；在不同培養(yǎng)條件下所侵襲出來的T淋巴細胞中PEDF基因表達是不同的,8小時腫瘤細胞培養(yǎng)上清液表達最弱(1640組1H培養(yǎng)上清液組腫瘤細胞裂解物組4H培養(yǎng)上清液組8H培養(yǎng)上清液組)。應用Western Blot實驗：PEDF蛋白表達在膀胱癌患者外周血T淋巴細胞的表達明顯降低；在不同培養(yǎng)條件下所侵襲出來的T淋巴細胞中PEDF表達是不同的,8小時腫瘤細胞培養(yǎng)上清液表達最弱(1640組1H培養(yǎng)上清液組腫瘤細胞裂解物組4H培養(yǎng)上清液組8H培養(yǎng)上清液組)。結論：1.膀胱癌患者外周血T淋巴細胞及其細胞比例明顯降低,其可能與膀胱癌細胞的免疫逃逸及免疫抑制狀態(tài)相關,并可能在膀胱癌的發(fā)生發(fā)展中起重要作用,其具有成為膀胱癌免疫治療靶點的潛在價值。2.在膀胱腫瘤患者,凍融腫瘤細胞裂解物對T淋巴細胞的遷移能力明顯強于培養(yǎng)一定時間的膀胱腫瘤細胞上清液。3.PEDFmRNA及PEDF蛋白表達在膀胱癌患者外周血T淋巴細胞的表達明顯降低,在不同培養(yǎng)條件下所侵襲出來的T淋巴細胞中PEDF表達是不同的,1640組表達最強,8小時腫瘤細胞培養(yǎng)上清液表達最弱(1640組1H培養(yǎng)上清液組腫瘤細胞裂解物組4H培養(yǎng)上清液組8H培養(yǎng)上清液組)。推測PEDF基因可能參與了T淋巴細胞增殖、遷移和抗腫瘤免疫。
【關鍵詞】：膀胱尿路上皮癌 T淋巴細胞 PEDF 免疫抑制
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R737.14
【目錄】：

• 中英文縮略詞表5-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-16
• 技術路線圖16-17
• 第一部分 凍融膀胱癌細胞裂解物和細胞培養(yǎng)上清液對T淋巴細胞遷移能力的影響17-32
• 1 實驗材料17-18
• 2 實驗方法18-22
• 3 結果22-27
• 4 討論27-31
• 5 結論31-32
• 第二部分 PEDF在人外周血T淋巴細胞中的表達32-49
• 1 實驗材料32-34
• 2 實驗方法34-40
• 3 結果40-46
• 4 討論46-48
• 5 結論48-49
• 總結49-51
• 參考文獻51-54
• 綜述54-62
• 參考文獻59-62
• 攻讀學位期間發(fā)表文章62-63
• 致謝63

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 李嬋玉;韓健;韓磊;黃威;朱書力;鄭秀惠;郭建新;李力;;PEDF對小鼠樹突細胞表型及免疫功能影響的實驗研究[J];重慶醫(yī)學;2014年12期

2 李金麗;翟心慧;;整合素LFA-1與其配體ICAM-1的生理功能及相關疾病[J];中國細胞生物學學報;2013年08期

  本文關鍵詞：膀胱癌患者T淋巴細胞表達及遷移能力的變化以及PEDF在膀胱癌患者T淋巴細胞中的表達觀察，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：455283