目的： 通過(guò)檢測(cè)前列腺癌患者組織與血清中microRNA-218與microRNA-346的表達(dá)情況，探討microRNA-218與microRNA-346在前列腺癌組織與血清中表達(dá)的相關(guān)性，在前列腺癌診斷、進(jìn)展與預(yù)后中作為生物標(biāo)志物的價(jià)值。 方法： 收集20例首次診斷為前列腺癌患者(Prostate cancer, PCa)的組織與相應(yīng)術(shù)前血清，20例前列腺增生患者(Henign prostatic hyperplasia, BPH)組織與相應(yīng)術(shù)前血清，20例激素依賴(lài)性前列腺癌患者(Androgen-dependent prostate cancer, ADPC,經(jīng)內(nèi)分泌治療效果明顯且無(wú)進(jìn)展)血清，20例激素難治性前列腺癌患者(Hormone-refractoryprostate cancer, HRPC)血清。臨床資料通過(guò)回顧分析病人住院期間病歷資料獲得。采用實(shí)時(shí)熒光定量法檢測(cè)組織與血清中microRNA-218與microRNA-346的表達(dá)情況，分析其在前列腺組織與血清中表達(dá)的相關(guān)性，與臨床、病理特性及前列腺癌進(jìn)展的相關(guān)性。 結(jié)果： 前列腺增生與前列腺癌患者比較，其前列腺組織、...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1采血流程圖

1.2.2血清標(biāo)本的采集及儲(chǔ)存清晨空腹抽取靜脈全血3ml（不加抗凝劑），取血后，在37℃下使血液凝固不低于30min，不超過(guò)1h，當(dāng)血清自然析出后4h內(nèi)進(jìn)行兩部離心法獲取血清,如圖1所示。圖1采血流程圖1.3主要試劑及耗材1）Trizol試劑：invitrogen；TRI....

圖2microRNART原理圖

圖2microRNART原理圖2.4實(shí)時(shí)熒光定量PCR每個(gè)PCR反應(yīng)體系為20ul，反應(yīng)原理如圖3。加樣時(shí)各反應(yīng)體系多加12.5％以避免移液時(shí)的丟失。實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果以Ct值形式得到，所有的樣本同時(shí)對(duì)microRNA-218、microRNA-346和U6進(jìn)行擴(kuò)增，....

圖3熒光染料嵌合法（SYBRGreenⅡ）方法機(jī)理示意圖

圖2microRNART原理圖2.4實(shí)時(shí)熒光定量PCR每個(gè)PCR反應(yīng)體系為20ul，反應(yīng)原理如圖3。加樣時(shí)各反應(yīng)體系多加12.5％以避免移液時(shí)的丟失。實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果以Ct值形式得到，所有的樣本同時(shí)對(duì)microRNA-218、microRNA-346和U6進(jìn)行擴(kuò)增，....

圖5組織microRNA-218的QRT-PCR檢測(cè)情況

2>0.980；斜率（slope）反應(yīng)擴(kuò)增效率（Eff），Eff在90%-105%之間；溶解曲線均僅出現(xiàn)單峰；重復(fù)反應(yīng)一致性高。如圖5-8示。結(jié)果表明microRNAs在人體分離的血清中也同在組織中一樣穩(wěn)定并表達(dá)。圖5組織microRNA-218的QRT-PCR檢測(cè)情況a:m....

本文編號(hào)：4000689