本文關(guān)鍵詞：基于微流控共培養(yǎng)條件下膀胱腫瘤細(xì)胞能量代謝特點(diǎn)的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的系統(tǒng)分析膀胱腫瘤細(xì)胞及腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞能量代謝過程中線粒體相關(guān)蛋白質(zhì)的改變,并探討膀胱腫瘤細(xì)胞能量代謝特點(diǎn)。方法(1)應(yīng)用微流控芯片三維立體培養(yǎng)技術(shù)建立成纖維細(xì)胞及膀胱腫瘤細(xì)胞共培養(yǎng)體系;(2)用多功能酶標(biāo)儀檢測計(jì)算不同組別細(xì)胞培養(yǎng)后培養(yǎng)液內(nèi)乳酸的濃度(3)通過免疫熒光染色方法定性分析線粒體相關(guān)蛋白的改變;(4)通過蛋白印跡法定量分析線粒體相關(guān)蛋白的改變;(4)應(yīng)用spss軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。結(jié)果(1)乳酸濃度測定:結(jié)果由高到低依次為實(shí)驗(yàn)組、膀胱腫瘤細(xì)胞對照組、成纖維細(xì)胞對照組。(2)蛋白定性結(jié)果:對照組成纖維細(xì)胞線粒體相關(guān)蛋白熒光較膀胱腫瘤強(qiáng);實(shí)驗(yàn)組膀胱腫瘤線粒體相關(guān)蛋白熒光較成纖維強(qiáng);實(shí)驗(yàn)組膀胱腫瘤細(xì)胞線粒體相關(guān)蛋白熒光較對照組強(qiáng);對照組成纖維細(xì)胞線粒體相關(guān)蛋白熒光較實(shí)驗(yàn)組強(qiáng)。(3)蛋白定量結(jié)果:對照組線粒體相關(guān)蛋白的表達(dá)在膀胱腫瘤中較成纖維細(xì)胞明顯降低(p0.05);實(shí)驗(yàn)組膀胱腫瘤線粒體相關(guān)蛋白的表達(dá)在膀胱腫瘤中較成纖維細(xì)胞明顯增高(p0.05);成纖維細(xì)胞的線粒體相關(guān)蛋白的表達(dá)在實(shí)驗(yàn)組中較對照組的明顯降低(p0.05);膀胱腫瘤細(xì)胞中的線粒體相關(guān)蛋白在實(shí)驗(yàn)組中較對照組的明顯增高(p0.05)。結(jié)論膀胱腫瘤細(xì)胞的能量代謝并不完全是“瓦伯格”效應(yīng)所認(rèn)為的即便在氧供充足的條件下腫瘤仍以糖酵解的方式功能,在氧供充足的條件下膀胱腫瘤能量代謝也有高效氧化磷酸化的過程,同時(shí)也有腫瘤相關(guān)細(xì)胞有著密切聯(lián)系,即腫瘤能量代謝是通過誘導(dǎo)毗鄰的間質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行糖酵解,引起營養(yǎng)前體生成增多。這些高能的代謝產(chǎn)物通過定向轉(zhuǎn)運(yùn)轉(zhuǎn)移到毗鄰的腫瘤細(xì)胞并進(jìn)入三羧酸循環(huán),致使氧化磷酸化增加和足量的ATP生成,從而構(gòu)成代謝偶聯(lián)。
【關(guān)鍵詞】：能量代謝 瓦伯格效應(yīng) 三維立體細(xì)胞培養(yǎng) 腫瘤發(fā)生 微流控
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.14
【目錄】：

• 摘要2-3
• Abstract3-7
• 引言7-8
• 1 材料與試劑8-11
• 1.1 材料8
• 1.2 主要試劑8-9
• 1.3 主要儀器設(shè)備9-11
• 2 試驗(yàn)方法與步驟11-14
• 2.1 微流控芯片制作11-12
• 2.2 實(shí)驗(yàn)分組12
• 2.3 細(xì)胞系的建立12
• 2.4 培養(yǎng)液中乳酸濃度的測定12-13
• 2.5 蛋白定性分析：細(xì)胞免疫熒光法處理并觀察實(shí)驗(yàn)組及對照組細(xì)胞的不同13
• 2.6 蛋白定量分析：通過蛋白印跡法分析不同組別膀胱腫瘤及成纖維細(xì)胞中線粒體相關(guān)蛋白的變化13-14
• 3 結(jié)果14-18
• 3.1 乳酸濃度測定結(jié)果14-15
• 3.2 蛋白定性分析結(jié)果15-16
• 3.3 蛋白定量分析結(jié)果16-18
• 4 討論18-22
• 5 結(jié)論22-23
• 參考文獻(xiàn)23-27
• 綜述27-36
• 參考文獻(xiàn)33-36
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果36-37
• 致謝37-39

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本文編號：424932