發(fā)布時間：2025-01-01 00:51

　　目的 通過觀察高濃度葡萄糖對人足細(xì)胞Galectin-1及足細(xì)胞表面標(biāo)志物podocin表達的影響,初步探討Galectin-1與足細(xì)胞損傷的關(guān)系；轉(zhuǎn)染Galectin-1siRNA抑制人足細(xì)胞Galectin-1的表達,檢測podocin的表達,觀察Galectin-1siRNA能否抑制高糖誘導(dǎo)的足細(xì)胞損傷。 方法 以人足細(xì)胞株為研究對象,隨機分為5組：正常對照組、25mmM高糖刺激12小時組、25mmM高糖刺激24小時組、25mM高糖刺激48小時組、25mmM甘露醇刺激48小時組。采用實時定量PCR(Real-time PCR)、蛋白印跡(Westem-blot)及免疫熒光的方法測定Galectin-1、podocin的表達。 用TransIT-TKO-Transfection Reagent轉(zhuǎn)染Galectin-1siRNA至人足細(xì)胞,把足細(xì)胞分為3組：正常對照組(未轉(zhuǎn)染Galectin-1siRNA),高糖組(未轉(zhuǎn)染Galectin-1siRNA+25mM高糖刺激)和轉(zhuǎn)染組(轉(zhuǎn)染Galectin-1siRNA+25mM高糖刺激)。采用實時定量PCR(Real-ti...

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮略詞簡表
第一章 高糖對人足細(xì)胞Galectin-1表達的影響及與podocin的關(guān)系
    1.1 材料與方法
        1.1.1 實驗材料
        1.1.2 實驗方法
        1.1.3 統(tǒng)計學(xué)分析
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 未分化、分化成熟及高糖刺激后人足細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變
        1.2.2 25mM高糖刺激人足細(xì)胞不同時間對Galectin-1 mRNA表達的影響
        1.2.3 25mM高糖刺激人足細(xì)胞不同時間對Galectin-1蛋白表達的影響
        1.2.4 25mM高糖刺激人足細(xì)胞不同時間對podocin mRNA表達的影響
        1.2.5 25mM高糖刺激人足細(xì)胞不同時間對podocin蛋白表達的影響
        1.2.6 25mM高糖刺激人足細(xì)胞不同時間對Galectin-1、podocin熒光表達的影響
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
第二章 轉(zhuǎn)染Galectin-1 siRNA對人足細(xì)胞的影響
    2.1 材料與方法
        2.1.1 實驗材料
        2.1.2 實驗方法
        2.1.3 統(tǒng)計學(xué)分析
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 熒光檢測Galectin-1 siRNA轉(zhuǎn)染效率
        2.2.2 Galectin-1 siRNA對Galectin-1 mRNA水平的抑制效果
        2.2.3 Galectin-1 siRNA對Galectin-1蛋白水平的抑制效果
        2.2.4 Galectin-1 siRNA對podocin mRNA表達水平的影響
        2.2.5 Galectin-1 siRNA對podocin蛋白表達水平的影響
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
全文總結(jié)
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學(xué)位期間主要研究成果
致謝



本文編號：4021795