Hsa-miR-143對腎透明細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展的影響及其分子機(jī)制的初步研究
本文關(guān)鍵詞:Hsa-miR-143對腎透明細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展的影響及其分子機(jī)制的初步研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:研究hsa-miR-143對腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞株786-0的生物學(xué)功能的影響,尋找并鑒定Hsa-miR-143的靶基因,研究hsa-miR-143對腎透明細(xì)胞癌上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響,從而初步探討hsa-miR-143在腎透明細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展中的分子機(jī)制。方法:1、體外轉(zhuǎn)染hsa-miR-143及NC(陰性對照),48h后進(jìn)行細(xì)胞粘附實驗證實hsa-miR-143對786-0細(xì)胞粘附能力的影響;2、體外轉(zhuǎn)染hsa-miR143及NC,48h后進(jìn)行Transwell細(xì)胞遷移實驗證實hsa-miR-143對786-0細(xì)胞遷移能力的影響;3、通過生物信息學(xué)預(yù)測軟件Targetscan等預(yù)測hsa-miR-143的潛在靶基因,Luciferase實驗驗證hsa-miR-143是否能與靶基因3’-UTR結(jié)合;4、Western Blot實驗證實hsa-miR-143對靶基因及上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)蛋白的影響。結(jié)果:1、轉(zhuǎn)染Hsa-miR-143后,786-0細(xì)胞的粘附數(shù)為49.9±8.8,NC組的786-0細(xì)胞的粘附數(shù)為79.7±9.0,兩組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)2、轉(zhuǎn)染Hsa-miR-143后,786-0細(xì)胞的遷移數(shù)為71.5±9.0,NC組786-0細(xì)胞的遷移數(shù)為104.4±12.1,兩組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);3、將hsa-miR-143的靶基因確定為KRAS, Luciferase實驗驗證hsa-miR-143邑夠與KRAS的3’-UTR結(jié)合;4、Western Blot實驗顯示,轉(zhuǎn)染hsa-miR-143后786-0細(xì)胞中的KRAS表達(dá)量下降,E-cadherin(上皮型鈣黏蛋白)表達(dá)升高,Vimentin(波形蛋白)及N-cadherin(神經(jīng)性鈣粘附蛋白)表達(dá)下降。結(jié)論:在腎透明細(xì)胞癌的發(fā)生發(fā)展中,hsa-miR-143起到了抑癌基因的作用,此作用是通過抑制腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞粘附、遷移及上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化實現(xiàn)的。在腎透明細(xì)胞癌中,hsa-miR-143能夠靶向調(diào)控KRAS的表達(dá)。本實驗為hsa-miR-143成為腎細(xì)胞癌腫瘤學(xué)標(biāo)記物及新的治療靶點提供了一定的依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】:腎透明細(xì)胞癌 hsa-miR-143 粘附 遷移 KRAS
【學(xué)位授予單位】:東南大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R737.11
【目錄】:
- 中文摘要4-6
- 英文摘要6-9
- 縮略詞表9-11
- 前言11-13
- 文獻(xiàn)綜述13-16
- 第一部分 材料與方法16-35
- 第二部分 實驗結(jié)果35-38
- 第三部分 討論38-44
- 第四部分 結(jié)論44-45
- 致謝45-46
- 參考文獻(xiàn)46-53
- 作者簡介53
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本文編號:392009
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