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成人微小病變性腎病患者外周血中濾泡輔助性T細(xì)胞亞群的檢測及其臨床意義

發(fā)布時間:2017-05-24 16:16

  本文關(guān)鍵詞:成人微小病變性腎病患者外周血中濾泡輔助性T細(xì)胞亞群的檢測及其臨床意義,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:研究外周血中濾泡輔助性T細(xì)胞(Tfh)細(xì)胞亞群在成人微小病變性腎病(MCD)患者中表達(dá)水平,通過與一些臨床指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析例如:腎小球濾過率及尿蛋白等,進(jìn)而探討在MCD疾病中Tfh等免疫細(xì)胞所起的作用。方法:采集27例成人微小病變性腎病(minimal change disease,MCD)患者以及14例對照者(control subjets,CS)的外周血,應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清中Tfh相關(guān)的細(xì)胞因子IL-21的含量;應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測外周血中程序性死亡-1(PD-1)+、誘導(dǎo)性協(xié)同刺激分子(ICOS)+、IL-21+Tfh細(xì)胞的頻數(shù);Ig D+、CD27+、CD86+、CD95+B細(xì)胞的頻數(shù)。應(yīng)用拜耳ADVIA-2400全自動生化分析儀檢測外周血中的白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、甘油三酯、膽固醇、尿酸、白蛋白的水平;同時檢測24小時尿中的尿蛋白、腎小球濾過率的水平。應(yīng)用BD公司的微量樣本多重蛋白定量技術(shù)(Cytometric Bead Array,CBA)檢測血清中IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-10、IL-6、IL-17A的水平。結(jié)果:1.MCD患者外周血中CD4+CXCR5+Tfh細(xì)胞、ICOS+Tfh細(xì)胞、PD-1+Tfh細(xì)胞、IL-21+Tfh細(xì)胞的頻數(shù)明顯高于對照組(都P0.05);2.MCD患者血清IL-17A、IFN-γ、IL-10、IL-4、IL-2的水平與血清IL-21水平明顯高于對照組(都P0.05)3.MCD患者外周血中CD4+CXCR5+Tfh細(xì)胞與e GFR呈負(fù)相關(guān)(P=0.0104,R=0.4849),外周血PD-1+CXCR5+Tfh細(xì)胞的頻數(shù)與24小時蛋白尿、血清IL-21水平呈正相關(guān)(P=0.0141,R=0.4667;P=0.0007,R=0.6137),外周血ICOS+CXCR5+Tfh細(xì)胞的頻數(shù)與24小時蛋白尿、血清IL-21水平呈正相關(guān)(P0.0001,R=0.7519;P=0.006,R=0.6201),血清Ig G、Ig M的水平與血清IL-21的水平呈正相關(guān)(P=0.0255,R=0.4291;P=0.0005,R=0.6234),外周血ICOS+Tfh細(xì)胞的頻數(shù)與血清Ig G的水平呈正相關(guān)(P=0.0038,R=0.5375),外周血PD-1+Tfh細(xì)胞的頻數(shù)與血清Ig M的水平呈正相關(guān)(P=0.0077,R=0.5012),血清Ig M、Ig G的水平與外周血CD19+B細(xì)胞的頻數(shù)呈正相關(guān)(P=0.0078,R=0.5008;P=0.0018,R=0.4394);4.7名MCD患者經(jīng)過治療外周血中CD4+CXCR5+(P=0.0356)Tfh細(xì)胞、PD-1+(P=0.0127)Tfh細(xì)胞、ICOS+(P=0.0059)Tfh細(xì)胞都降低。血清IL-10(P=0.0009)和IL-4(P=0.0333)的水平升高。血清IL-21(P=0.0003)的水平降低;5.4名MCD患者經(jīng)過PDN治療外周血中CD4+CXCR5+(P=0.0417)Tfh細(xì)胞、PD-1+(P=0.0337)Tfh細(xì)胞、ICOS+(P=0.0403)Tfh細(xì)胞都降低。血清IL-10(P=0.0145)和IL-4(P=0.0003)的水平升高。血清IL-21(P=0.0083)的水平降低;6.外周血中Ig D+CD27-B細(xì)胞、CD86+B細(xì)胞、CD95+B細(xì)胞頻數(shù)明顯高于對照組,Ig D+CD27+B細(xì)胞頻數(shù)明顯低于對照組,差別有顯著的統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。外周血CD4+CXCR5+Tfh細(xì)胞的頻數(shù)與CD19+B細(xì)胞的頻數(shù)呈正相關(guān)(P0.001,R=0.8631)。外周血PD-1+CXCR5+Tfh細(xì)胞的頻數(shù)與CD95+B細(xì)胞的頻數(shù)呈正相關(guān)(P=0.0167,R=0.4565)。外周血ICOS+CXCR5+Tfh細(xì)胞的頻數(shù)與CD95+B細(xì)胞的頻數(shù)呈負(fù)相關(guān)(P=0.0041,R=0.5341)。結(jié)論:1.異;罨腡fh細(xì)胞通過表面功能分子ICOS、PD-1及分泌的細(xì)胞因子IL-21調(diào)節(jié)體液免疫反應(yīng),從而導(dǎo)致自身抗體的產(chǎn)生以及腎臟功能的損壞,提示MCD患者外周血中ICOS+Tfh細(xì)胞、PD-1+Tfh細(xì)胞以及血清IL-21可能與MCD的發(fā)生發(fā)展有關(guān);2.B細(xì)胞表面分子CD86或Ig D能夠刺激B細(xì)胞活化,進(jìn)而誘導(dǎo)體液免疫及分泌免疫球蛋白,表明MCD疾病的發(fā)展中可能有B細(xì)胞的參與;3.MCD患者的早期治療中,Tfh細(xì)胞和B細(xì)胞有可能作為一種干預(yù)手段參與,為臨床實(shí)踐提供了新思路。
【關(guān)鍵詞】:微小病變性腎病 濾泡輔助性T細(xì)胞 B細(xì)胞 白細(xì)胞介素-21
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R692
【目錄】:
  • 前言4-6
  • 中文摘要6-8
  • Abstract8-16
  • 第1章 緒論16-18
  • 第2章 綜述18-24
  • 2.1 腎小球疾病的免疫學(xué)研究進(jìn)展18-21
  • 2.1.1 致腎炎的抗原及抗體18-19
  • 2.1.2 腎小球循環(huán)免疫沉積物的形成19
  • 2.1.3 免疫沉積物在腎小球的定位19
  • 2.1.4 參與腎小球損害的免疫性因素19-21
  • 2.2 腎小管-間質(zhì)性腎病的免疫學(xué)研究進(jìn)展21-22
  • 2.2.1 免疫沉積物的作用21
  • 2.2.2 抗基底膜抗體的作用21-22
  • 2.2.3 細(xì)胞免疫的作用22
  • 2.2.4 其他免疫因素的作用22
  • 2.3 腎血管疾病的免疫學(xué)研究進(jìn)展22
  • 2.4 結(jié)語與展望22-24
  • 第3章 材料與方法24-31
  • 3.1 研究對象24-25
  • 3.1.1 成人微小病變性腎病患者24-25
  • 3.1.2 對照組25
  • 3.2 標(biāo)本采集、處理25
  • 3.3 主要儀器、試劑25-27
  • 3.3.1 主要儀器25-26
  • 3.3.2 主要試劑26-27
  • 3.4 實(shí)驗方法27-30
  • 3.4.1 外周血單個核細(xì)胞(PERIPHERAL BLOOD MONONUCLEAR CELLS,PBMC)分離和計數(shù)27
  • 3.4.2 流式細(xì)胞技術(shù)對外周血TFH細(xì)胞的檢測27-28
  • 3.4.3 流式細(xì)胞技術(shù)對外周血B細(xì)胞的檢測28
  • 3.4.4 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)對IL-21 細(xì)胞因子檢測.1328-29
  • 3.4.5 微量樣本多重蛋白定量技術(shù)(CBA)對TH1/TH2/TH17細(xì)胞因子檢測29-30
  • 3.5 統(tǒng)計學(xué)處理方法30-31
  • 第4章 結(jié)果31-41
  • 4.1 成人微小病變性腎病患者的臨床特點(diǎn)31-32
  • 4.2 成人微小病變性腎病患者治療后臨床指標(biāo)的變化32-33
  • 4.3 成人微小病變性腎病患者經(jīng)PDN治療后臨床指標(biāo)的變化33
  • 4.4 成人微小病變性腎病患者外周血TFH細(xì)胞及其亞群的表達(dá)1833-35
  • 4.5 成人微小病變性腎病患者外周血多種血清細(xì)胞因子及血清IL-21 的表達(dá)35
  • 4.6 成人微小病變性腎病患者外周血TFH細(xì)胞與臨床指標(biāo)的相關(guān)性分析35-37
  • 4.7 治療后成人微小病變性腎病患者外周血TFH細(xì)胞和血清細(xì)胞因子的變化37-38
  • 4.8 經(jīng)PDN治療后成人微小病變性腎病患者外周血TFH細(xì)胞和血清細(xì)胞因子的變化38
  • 4.9 成人微小病變性腎病患者外周血B細(xì)胞的表達(dá)38-41
  • 第5章 討論41-45
  • 第6章 結(jié)論45-46
  • 參考文獻(xiàn)46-53
  • 作者簡介及在學(xué)期間所取得的科研成果53-54
  • 致謝54

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  本文關(guān)鍵詞:成人微小病變性腎病患者外周血中濾泡輔助性T細(xì)胞亞群的檢測及其臨床意義,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:391310

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