本文關(guān)鍵詞：腎臟缺血再灌注期間乙醛脫氫酶2的表達變化以及miR-146a對其調(diào)控機制，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:器官移植的缺血過程不可避免,再灌注又會給器官帶來的二次損傷,這是各種臨床治療方法的矛盾所在,其復(fù)雜的發(fā)生機制使其進一步研究處于瓶頸。ALDH2是目前發(fā)現(xiàn)的在人體中具有重要作用的一種酶,其在多種器官IR中的保護作用已被證實。而在腎臟IR中的作用有待證實。另有研究發(fā)現(xiàn),mi R-146a可通過對ALDH2的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控,在心臟、小腸的IR損傷中發(fā)揮保護作用。因此,我們希望通過本實驗初步探討ALDH2在腎臟IR中的作用,以及mi R-146a對ALDH2的調(diào)控作用及其可能的調(diào)控機制。為進一步研究ALDH2在腎臟I/R中的作用提供理論依據(jù)。方法:第一部分為體內(nèi)實驗,采用雄性C57BL/6J(H-2Kb)小鼠,8-10周齡,夾閉雙腎腎蒂30min制作缺血再灌注損傷模型,各個時間點下腔靜脈取血及雙腎,HE染色觀察腎臟病理損傷情況,檢測血液肌酐水平,RT-PCR檢測ALDH2及mi R-146a表達,Western Blot檢測ALDH2蛋白表達。第二部分為體外實驗,采用雄性C57BL/6J(H-2Kb)小鼠,8-10周齡。分離提純小鼠腎小管上皮細胞及腹腔巨噬細胞,石蠟油法模擬I/R損傷,10u M H2O2模擬氧化應(yīng)激狀態(tài),各時間點Trizol法提取細胞RNA,RT-PCR檢測ALDH2及mi R-146a表達。結(jié)果:小鼠腎臟熱缺血IR后3h,ALDH2表達迅速上調(diào),隨后逐漸下降,IR后12h恢復(fù)到接近假手術(shù)組水平。mi R-146a在IR后3小時表達顯著升高,隨后上調(diào)幅度逐漸縮小,至IR后72小時,mi R-146a表達仍為對照組的3.7±0.7倍。腎臟缺血再灌注后1h,ALDH 2蛋白迅速減少,并于3h降至最低,隨后逐漸升高,12h蛋白水平仍明顯低于對照組,24h達到頂峰后逐漸下降。與假手術(shù)組相比,IR 1h、3h、6h、12h組ALDH-2蛋白表達顯著減少(P0.01或P0.001);IR 24h、72h組ALDH-2蛋白表達顯著增加(P0.001)。TEC:IR后3h,ALDH-2表達顯著升高,隨后逐漸降低,刺激后24小時ALDH-2表達仍顯著高于對照組;IR后3h,mi R-146a表達顯著降低;隨后逐漸升高,刺激后24小時mi R-146a表達顯著升高,約為對照組的4.2±0.8倍;H2O2刺激后3h,ALDH-2表達顯著升高,隨后逐漸降低,刺激后24小時ALDH-2表達仍顯著高于對照組;H2O2刺激后6h內(nèi),mi R-146a表達無明顯變化,刺激后24小時mi R-146a表達顯著升高,約為對照組的2.7±0.7倍。MΦ:IR后3h ALDH-2表達水平即顯著升高,刺激后24小時ALDH-2表達約為對照組的4.2±0.8倍;IR后,原代MΦ的mi R-146a表達水平無顯著變化;H2O2刺激后6h,ALDH-2表達水平顯著升高,刺激后24小時約為對照組的5.2±0.9倍;H2O2刺激后3h,mi R-146a表達即開始上調(diào),刺激后24小時mi R-146a表達約為對照組的5.7±1.2倍。結(jié)論:我們的研究結(jié)果表明在構(gòu)建的小鼠腎臟I/R模型中,腎臟組織ALDH2 m RNA表達迅速升高,ALDH2蛋白早期降低,隨后逐漸升高;mi R-146a體內(nèi)實驗顯示在I/R早期表達迅速上調(diào);體外細胞實驗發(fā)現(xiàn),I/R后及H2O2刺激后ALDH2表達均迅速上調(diào),而mi R-146a表達在早期降低,6h后逐漸升高,與體內(nèi)實驗結(jié)果不一致;mi R-146a有望成為腎臟I/R損傷的早期診斷標(biāo)記。
【關(guān)鍵詞】：乙醛脫氫酶2 mi R-146a 缺血再灌注 腎移植 腎小管上皮細胞
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R692
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 常用縮寫詞中英文對照表10-11
• 前言11-12
• 第一部分 小鼠腎臟缺血再灌注期間ALDH2及miR-146a的表達12-25
• 1 材料與方法13-19
• 1.1 實驗材料13-16
• 1.2 實驗方法16-19
• 2 結(jié)果19-23
• 2.1 小鼠腎臟缺血再灌注損傷模型制作成功19-21
• 2.2 小鼠腎臟IR后ALDH2與miR-146a表達上調(diào)21-22
• 2.3 小鼠腎臟IR后ALDH2蛋白表達有明顯變化22-23
• 3 討論23-25
• 第二部分 小鼠原代腎小管上皮細胞及腹腔巨噬細胞缺血再灌注期間ALDH2及miR-146a的表達25-31
• 1 材料與方法25-28
• 1.1 實驗材料25-26
• 1.2 實驗方法26-28
• 1.3 統(tǒng)計方法28
• 2 結(jié)果28-30
• 2.1 小鼠原代TEC在IR及H_2O_2刺激后ALDH2表達上調(diào)28-29
• 2.2 小鼠原代Mφ在IR及H_2O_2刺激后ALDH2表達上調(diào)29
• 2.3 小鼠原代TEC在IR及H_2O_2刺激后miR-146a表達上調(diào)29-30
• 2.4 小鼠原代Mφ在IR及H_2O_2刺激后miR-146a表達上調(diào)30
• 3 討論30-31
• 結(jié)論31-32
• 參考文獻32-36
• 綜述36-42
• 參考文獻39-42
• 致謝42-44
• 在學(xué)期間參與的科研課題與研究成果44-45
• 個人簡歷45-46

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 田南南;楊建新;;miR-146a在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中的表達及臨床意義[J];海南醫(yī)學(xué);2013年24期

2 岳聰;王苗苗;王美林;王煒;張正東;韓素萍;;miR-146a基因多態(tài)與卵巢癌易感性的關(guān)系:病例-對照研究[J];南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2011年04期

3 李友;朱菁;馬國達;李克深;崔理立;;miR-146a基因多態(tài)性與腔隙性腦梗死的關(guān)系[J];山東醫(yī)藥;2014年16期

4 ;[J];;年期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 韓志君;劉晶報;任天麗;孫懿;前仲人;;miR-146a調(diào)控原發(fā)性膽汁性肝硬化患者輔助性T細胞增殖[A];第17次全國風(fēng)濕病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2012年

2 韓志君;孫懿;胡志德;鄧安梅;仲人前;;miR-146a調(diào)控原發(fā)性膽汁性肝硬化患者輔助性T細胞增殖[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國中青年檢驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2012年

3 周娟;宋興勃;李冬冬;唐笛嬌;應(yīng)斌武;王蘭蘭;;miR-146a和miR-499基因單核苷酸多態(tài)性與原發(fā)性肝癌的關(guān)聯(lián)性分析[A];中華醫(yī)學(xué)會第九次全國檢驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議暨中國醫(yī)院協(xié)會臨床檢驗管理專業(yè)委員會第六屆全國臨床檢驗實驗室管理學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

4 侯志波;謝麗;禹立霞;錢曉萍;劉寶瑞;;miR-146a在胃癌組織中的表達及臨床意義[A];中華醫(yī)學(xué)會腫瘤學(xué)分會第七屆全國中青年腫瘤學(xué)術(shù)會議——中華醫(yī)學(xué)會腫瘤學(xué)分會“中華腫瘤 明日之星”大型評選活動暨中青年委員全國遴選論文匯編[C];2011年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 王麗娜;慢性粒細胞白血病中miR-146a低表達的調(diào)控機制研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2012年

2 許斌;miR-146a基因遺傳變異在前列腺癌發(fā)生發(fā)展的作用及其分子機制的探討[D];南京醫(yī)科大學(xué);2011年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 沈晶;miR-146a和轉(zhuǎn)錄共刺激子p300基因多態(tài)性與2型糖尿病患者頸動脈粥樣硬化的關(guān)系[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

2 凌志新;miR-146a對去勢抵抗性前列腺癌自噬的調(diào)控及其調(diào)控通路的初步探討[D];東南大學(xué);2015年

3 和安;腎臟缺血再灌注期間乙醛脫氫酶2的表達變化以及miR-146a對其調(diào)控機制[D];山西醫(yī)科大學(xué);2016年

4 林丹;miR-146a基因多態(tài)性與喉癌易感性的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2014年

  本文關(guān)鍵詞：腎臟缺血再灌注期間乙醛脫氫酶2的表達變化以及miR-146a對其調(diào)控機制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：391283