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抑癌基因NPRL2與腎癌臨床病理特征及細(xì)胞生物學(xué)特性的關(guān)系研究

發(fā)布時(shí)間:2017-05-18 06:18

  本文關(guān)鍵詞:抑癌基因NPRL2與腎癌臨床病理特征及細(xì)胞生物學(xué)特性的關(guān)系研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:(1)檢測抑癌基因NPRL2在人腎透明細(xì)胞癌組織中的表達(dá)情況并分析其與臨床病理特征的關(guān)系;(2)研究NPRL2蛋白的表達(dá)對人原代培養(yǎng)的腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞的增殖及凋亡的影響。方法:(1)用免疫組織化學(xué)方法檢測抑癌基因NPRL2在人腎透明細(xì)胞癌及其癌旁組織標(biāo)本的表達(dá)情況;(2)采用HG_TransGene將重組質(zhì)粒pEGFP-N1-NPRL2和pEGFP-N1轉(zhuǎn)染原代培養(yǎng)的人腎癌細(xì)胞;(3)應(yīng)用激光掃描共聚焦顯微鏡觀察質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染情況;(4)運(yùn)用qRT-PCR和Western blot分別檢測NPRL2 mRNA和融合蛋白在各組的表達(dá)情況;(5)MTT法檢測原代培養(yǎng)的人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞的增殖情況;(6)流式細(xì)胞術(shù)分析轉(zhuǎn)染后原代培養(yǎng)的人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞周期和凋亡情況。結(jié)果:(1)免疫組織化學(xué)顯示在78例腎癌和癌旁組織標(biāo)本中,腎癌組織中NPRL2的表達(dá)明顯低于癌旁組織(P0.001);臨床病理分析顯示NPRL2的表達(dá)與腫瘤組織學(xué)分型(P=0.044), TNM分期(P=0.025)和是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.028)密切相關(guān),而與患者年齡(P=0.892)及性別(P=0.873)無明顯關(guān)系;(2)激光掃描共聚焦顯微鏡結(jié)果顯示質(zhì)粒pEGFP-N1-NPRL2和pEGFP-N1成功轉(zhuǎn)染原代培養(yǎng)的人腎癌細(xì)胞;(3)實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示重組質(zhì)粒組NPRL2 mRNA的表達(dá)明顯高于空質(zhì)粒組和空白對照組(P0.001);(4)免疫印跡法結(jié)果顯示重組質(zhì)粒組有NPRL2融合蛋白的表達(dá),而空質(zhì)粒組和空白對照組未見其表達(dá);(5)MTT結(jié)果顯示NPRL2的表達(dá)能明顯抑制原代培養(yǎng)的人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞的增殖;(6)流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示NPRL2的表達(dá)能促進(jìn)原代培養(yǎng)的人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞的凋亡并使細(xì)胞周期阻滯在G0/G1期。結(jié)論:抑癌基因NPRL2在腎癌中呈低表達(dá)且與臨床病理特征密切相關(guān),并能抑制腫瘤細(xì)胞的增殖和促進(jìn)細(xì)胞凋亡。
【關(guān)鍵詞】:NPRL2 腎透明細(xì)胞癌 增殖 凋亡
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R737.11
【目錄】:
  • 英漢縮略語名詞對照5-7
  • 中文摘要7-9
  • 英文摘要9-12
  • 前言12-14
  • 1 材料及方法14-22
  • 2 結(jié)果22-28
  • 3 討論28-30
  • 4 結(jié)論30-31
  • 參考文獻(xiàn)31-34
  • 文獻(xiàn)綜述34-42
  • 參考文獻(xiàn)39-42
  • 致謝42-43
  • 碩士期間發(fā)表的論文43

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1 蔣立;唐偉;;抑癌基因NPRL2對腎癌786-O細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào);2013年01期

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  本文關(guān)鍵詞:抑癌基因NPRL2與腎癌臨床病理特征及細(xì)胞生物學(xué)特性的關(guān)系研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:375294

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