類固醇受體共激活因子-3在膀胱癌中的表達及對膀胱癌增殖作用的影響
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【摘要】:目的:研究類固醇受體共激活因子-3(Steroid Receptor Coactivator-3,SRC-3)在膀胱癌中的表達及其對膀胱癌增殖作用的影響方法:實時熒光定量聚合酶鏈式反應(quantitative real time polymerase chain reaction,q RT-PCR)和western blot檢測SRC-3 m RNA和蛋白在28例膀胱尿路上皮癌標本中的表達情況。構建SRC-3腺病毒過表達載體以及SRC-3小干擾RNA(small interference RNA,si RNA)轉染膀胱癌EJ細胞和T24細胞。q RT-PCR檢測SRC-3 m RNA過表達和沉默效果,Western blot分析過表達和沉默SRC-3后SRC-3蛋白表達水平。Brd U增殖實驗檢測過表達RC-3以及沉默SRC-3后,對膀胱癌EJ細胞和T24細胞增殖活性的影響。為了研究SRC-3的作用機制,在過表達和沉默SRC-3后,q RT-PCR和western blot檢測CXC趨化因子受體-4(C-X-C chemokine receptor type-4,CXCR4)m RNA和蛋白表達情況。同時過表達SRC-3細胞株中轉染CXCR4 si RNA沉默CXCR4基因,檢測干擾CXCR4后對過表達SRC-3的膀胱癌細胞增殖活性的影響。結果:實時熒光定量PCR和western blot結果顯示SRC-3 m RNA和蛋白在71.4%(20/28)的膀胱癌標本中表達上調,同癌旁正常組織相比,表達倍數(shù)變化具有統(tǒng)計學差異(SRC-3 m RNA,Normal vs Bladder cancer:7.1±2.3 vs 1.6±1.3,P0.01)。過表達SRC-3后,Brdu增殖實驗結果示膀胱癌EJ細胞和T24細胞增殖活性顯著增強,差異具有統(tǒng)計學意義(EJ,EV vs SRC-3:0.5±0.4 vs 0.8±0.6,P0.05;T24,EV vs SRC-3:0.6±0.2,0.8±1.0,P0.01);而si RNA干擾SRC-3表達后,EJ細胞和T24細胞增殖活性顯著下降,差異具有統(tǒng)計學意義(EJ,control vs si RNA:0.7±0.1 vs 0.44±0.1,P0.01;T24,control vs si RNA:0.78±0.2 vs0.43±0.06,P0.01)。過表達SRC-3的膀胱癌細胞中,CXCR4 m RNA(P0.05)和蛋白表達上調;沉默SRC-3后,CXCR4 m RNA(EV vs SRC-3:1.0±0.1 vs 2.8±0.3,P0.01)和蛋白表達下調。在過表達SRC-3細胞株中轉染CXCR4 si RNA后,過表達SRC-3的膀胱癌EJ細胞增殖活性顯著下降(EV vs SRC-3:0.87±0.2vs 0.58±0.4,P0.05),同空白對照組相比,增殖活性無明顯統(tǒng)計學差異。結論:SRC-3在膀胱癌中過表達,通過調節(jié)CXCR4促進膀胱癌細胞增殖。
【關鍵詞】:類固醇受體共激活因子-3 膀胱癌 增殖 CXC趨化因子受體-4
【學位授予單位】:蘇州大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R737.14
【目錄】:
- 中文摘要4-6
- 英文摘要6-9
- 序言9-12
- 參考文獻10-12
- 第一部分12-33
- 引言12
- 材料與方法12-26
- 結果26-29
- 討論29-30
- 參考文獻30-33
- 第二部分33-47
- 序言33
- 材料與方法33-41
- 結果41-43
- 討論43-44
- 參考文獻44-47
- 總結與展望47-48
- 綜述48-57
- 參考文獻53-57
- 中英文縮寫對照詞表57-58
- 攻讀碩士期間公開發(fā)表的論文58-59
- 致謝59-60
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本文編號:375168
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