目的探討miR-182-5p對前列腺癌PC-3細(xì)胞增殖的影響及可能機(jī)制。方法將前列腺癌PC-3細(xì)胞分為四組,分為空白組（未進(jìn)行轉(zhuǎn)染）、miR-182-5p陰性對照組（轉(zhuǎn)染無義序列）、miR-182-5p模擬物組（轉(zhuǎn)染miR-182-5p模擬物）、miR-182-5p抑制物組（轉(zhuǎn)染miR-182-5p抑制物）,采用實(shí)時(shí)定量PCR驗(yàn)證轉(zhuǎn)染效率,CCK-8法檢測各組PC-3細(xì)胞的增殖能力,Western blot檢測各組PC-3細(xì)胞SMAD4蛋白表達(dá),應(yīng)用生物信息學(xué)網(wǎng)站分析SMAD4是否為miR-182-5p的靶基因,應(yīng)用雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證。結(jié)果 CCK-8實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,miR-182-5p過表達(dá)后,PC-3細(xì)胞增殖能力增強(qiáng),SMAD4蛋白表達(dá)下降;抑制miR-182-5p表達(dá)后,PC-3細(xì)胞增殖能力降低,SMAD4蛋白表達(dá)升高。生物信息學(xué)分析結(jié)果顯示SMAD4基因3’UTR區(qū)存在miR-182-5p的結(jié)合位點(diǎn),雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)證實(shí)了SMAD4為miR-182-5p的靶基因。結(jié)論 miR-182-5p可能通過靶向SMAD4調(diào)控前列腺癌PC-3細(xì)胞的增殖。 

【文章來源】：解剖科學(xué)進(jìn)展. 2020,26(05)

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
    1.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測mi R-182-5p的表達(dá)
    1.5 Western blot檢測SMAD4蛋白表達(dá)
    1.6 CCK-8檢測細(xì)胞增殖
    1.7 mi R-182-5p的靶基因預(yù)測及雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)
    1.8 統(tǒng)計(jì)分析
2 結(jié)果
    2.1 細(xì)胞培養(yǎng)及mi R-182-5p表達(dá)的檢測
    2.2 Western blot檢測SMAD4蛋白表達(dá)
    2.3 CCK-8檢測細(xì)胞增殖活性
    2.4 mi R-182-5p靶基因預(yù)測結(jié)果
3 討論



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