慢性腎臟�。╟hronic kidney disease,CKD）具有發(fā)病率逐年增高、治療手段有限、轉(zhuǎn)歸預(yù)后差、醫(yī)療費(fèi)用昂貴等特點(diǎn),已成為全球范圍內(nèi)的公共健康問(wèn)題。2012年對(duì)我國(guó)成年人進(jìn)行的一項(xiàng)大型橫斷面研究結(jié)果顯示CKD發(fā)病率為10.8%,累及大概1.19億人群^[1]。而流行性病學(xué)研究表明急性腎損傷（acute kidney injury,AKI）是CKD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,急性腎損傷的程度、發(fā)生頻率及持續(xù)時(shí)間都與CKD進(jìn)展有關(guān),AKI到CKD的轉(zhuǎn)變是進(jìn)展性腎功能惡化的重要病因。AKI到CKD轉(zhuǎn)變是復(fù)雜的病理生理過(guò)程,目前研究包括腎小管細(xì)胞不完全再生（發(fā)生EMT和G2/M細(xì)胞周期停滯等）、持續(xù)慢性炎癥反應(yīng)（M1巨噬細(xì)胞表型轉(zhuǎn)變?yōu)镸2）、線(xiàn)粒體功能障礙、遺傳學(xué)修飾（DNA甲基化和microRNA表達(dá)）、RAS激活、內(nèi)皮細(xì)胞失功能和微血管稀疏等^[2]。腎小管上皮細(xì)胞是新陳代謝極度活躍細(xì)胞,對(duì)氧化還原反應(yīng)失衡尤其敏感,大量研究表明腎小管上皮細(xì)胞氧化損傷在AKI、AKI-CKD以及CKD的發(fā)生發(fā)展中均具有重要作用^[3]。在體內(nèi)維... 

【文章來(lái)源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：107 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

1.1.：葉酸腎損傷小鼠模型回顧性研究實(shí)驗(yàn)流程圖

圖 4.1.1.2.：葉酸損傷后低肌酐組和高肌酐組腎臟形態(tài)和功能變化對(duì)比。圖 A：葉酸損傷第 28 天對(duì)照組、低肌酐組、高肌酐組腎臟形態(tài)學(xué)改變。圖 B：葉酸損傷 28 天時(shí)低肌酐組與高肌酐組腎重體重比值。**P<0.01vs 低肌酐組。圖 C：高肌酐組與低肌酐組血肌酐變化：根據(jù)第 28 天時(shí)所有小鼠的血肌酐中位數(shù)分為兩組，再回顧性統(tǒng)計(jì)所有小鼠在不同時(shí)間點(diǎn)的肌酐值。*P<0.05 vs 低肌酐組。4.1.2 小鼠急性腎損傷的轉(zhuǎn)歸與腎小管氧化應(yīng)激損傷程度有關(guān)為了進(jìn)一步探討葉酸誘導(dǎo)的 AKI 進(jìn)展為 CKD 的發(fā)病機(jī)制，如圖 4.1.2.，與低肌酐組相比，高肌酐組小鼠腎臟膠原纖維增多，纖維粘連蛋白（Fibronectin ，F(xiàn)N）表達(dá)也增強(qiáng)，表明急性腎臟損傷后高肌酐組的腎臟發(fā)生纖維化病變，已具備慢性腎臟病的典型病理改變；而與溶劑對(duì)照組相比，低肌酐組 FN 和膠原Ⅰ的表達(dá)也有所增多，表明低肌酐組也有一定的慢性損傷。磷酸化組蛋白 H3（p-Histone H3）是評(píng)估有絲分裂停滯，細(xì)胞周期異常的重要指標(biāo)，免疫組化結(jié)果顯示 p-Histone H3在腎小管上皮細(xì)胞中有陽(yáng)性表達(dá)（三角箭頭所示），與低肌酐組比較，高肌酐組陽(yáng)性表達(dá)增多，這與 western blot 結(jié)果一致。8-OHdG 和硝基酪氨酸（Nitrotyrosine）作為機(jī)體氧化應(yīng)激損傷的重要生物學(xué)指標(biāo)，免疫組化

圖 4.1.2.：在葉酸誘導(dǎo)的小鼠腎損傷模型中，腎小管上皮細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷程度與腎臟預(yù)后相關(guān)。A：在葉酸損傷第 28 天，腎組織標(biāo)本進(jìn)行 Masson's trichrome 染色檢測(cè)膠原纖維的變化（標(biāo)尺為 200μm）；Fibronectin 免疫熒光染色檢測(cè)其表達(dá)（標(biāo)尺為 50 μm）；p-HistoneH3 免疫組化染色檢測(cè)其表達(dá)（標(biāo)尺為 20 μm），黑色三角箭頭顯示為腎小管上皮細(xì)胞中p-Histone H3 陽(yáng)性著色；8-OHdG 免疫組化染色檢測(cè)腎組織氧化應(yīng)激損傷（標(biāo)尺為 50 μm）。B：葉酸損傷第 28 天將各組腎組織勻漿，用 western blot 方法檢測(cè) FN、CollagenⅠ、p-HistoneH3 和 Nitrotyrosine 的蛋白表達(dá)水平。4.2 在葉酸誘導(dǎo)的小鼠腎損傷前瞻性分析研究中，AKI 到 CKD 的進(jìn)展與腎小管上皮細(xì)胞持續(xù)的氧化應(yīng)激損傷有關(guān)4.2.1 葉酸誘導(dǎo)的小鼠腎損傷前瞻性分析研究為了進(jìn)一步研究前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果，我們?cè)O(shè)計(jì)了葉酸誘導(dǎo)腎損傷模型的前瞻性研究。圖 4.2.1.1 所示，為了讓小鼠的急性腎損傷程度盡可能一致，避免因急性損傷程度不同導(dǎo)致的長(zhǎng)期預(yù)后不同，在損傷后的第 3天急性期時(shí)收集所有小鼠血標(biāo)本，檢測(cè)血肌酐，選擇血肌酐值在 2.0-2.4 之間的小鼠進(jìn)行長(zhǎng)期研究，并在入選的小鼠中隨機(jī)選擇 5只處死，留取腎組織等標(biāo)本備用。在第 7、14、28天時(shí)間


本文編號(hào)：3410894