目的:探討低蛋白熱量限制對2型糖尿病大鼠腎臟的保護作用及其可能的機制。方法:采用高脂飲食結(jié)合小劑量鏈脲佐菌素（STZ）腹腔注射的方法,建立2型糖尿病大鼠模型。將成模大鼠隨機分為正常進食組（NP）,低蛋白正常進食組（LP）,低蛋白熱量限制組（LP-CR）,并設(shè)立正常對照組（NC）。LP-CR進食量為LP的70%。飲食干預(yù)4周后進行相關(guān)生理生化指標的檢測,光鏡下觀察腎組織病理形態(tài)學的變化,計算腎小球系膜基質(zhì)相對面積和腎小球足細胞相對密度。透射電鏡下觀察足細胞內(nèi)自噬泡（包括自噬體及自噬溶酶體）數(shù)目,并計算腎小球基底膜厚度。用篩網(wǎng)法提取大鼠腎小球,并用免疫印跡法檢測腎小球內(nèi)微管相關(guān)蛋白1輕鏈3（LC3）、AMP活化蛋白激酶（AMPK）、磷酸化AMPK（p-AMPK）、哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、磷酸化mTOR（p-mTOR）的蛋白表達水平。結(jié)果:（1）該2型糖尿病大鼠模型在注射STZ 6周后（飲食干預(yù)4周后）已出現(xiàn)糖尿病腎病的早期改變,包括微量白蛋白尿、腎臟肥大、腎小球系膜基質(zhì)積聚、腎小球基底膜增厚等。（2）飲食干預(yù)4周后,LPCR組與NP組相比,空腹血糖、胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-I... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學江蘇省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

低蛋白熱量限制對糖尿病大鼠腎組織損傷的影響

南京醫(yī)科大學博士學位論文透射電鏡下觀察超薄切片，NP 組大鼠 GBM 節(jié)段性增厚，可見足突融合,LPCR 組足突融合及基底膜增厚的程度較 NP 組減輕，而 LP 組的變化程度不明顯。應(yīng)用 Image-ProPlus 6.0 軟件分析后，結(jié)果顯示：與 NC 組相比，三組糖尿病大鼠的 GBM 平均厚度均明顯增加（P<0.05）；干預(yù) 4 周后，LPCR 組的 GBM平均厚度較 NP 組和 LP 組均明顯減少（P<0.05），而 LP 組較 NP 組有所減少，但差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。見圖 2C、2D。

南京醫(yī)科大學博士學位論文生理狀態(tài)下，腎小球的自噬水平明顯高于腎小管，而腎小球高水平的自噬則歸因于足細胞[11]，因此本實驗通過研究腎小球裂解物中自噬標志物 LC3 的表達水平來大致反映足細胞的自噬水平。免疫印跡分析結(jié)果顯示：與 NC 組比較，NP 組大鼠腎小球 LC3-II/LC3-I 的比值有所下降，但差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；干預(yù) 4 周后，LPCR 組大鼠腎小球 LC3-II/LC3-I 的比值較 NP 組和 LP 組均明顯上升（P<0.05），而 LP 組大鼠的這項比值結(jié)果與 NP 組相比，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。見圖 3C。


本文編號：3320929