發(fā)布時(shí)間：2021-08-01 05:10

　　目的：1．在培養(yǎng)基中加入氯化鈷（CoCl2）模擬缺氧環(huán)境培養(yǎng)細(xì)胞，以觀察低氧條件下缺氧誘導(dǎo)因子-2α（Hypoxia inducible factor-2α，HIF-2α）在人前列腺癌細(xì)胞PC-3中的表達(dá)。2．利用CoCl2建立的低氧模型，觀察HIF-2α干擾對(duì)前列腺癌細(xì)胞PC-3中HIF-2α表達(dá)及其增殖和凋亡的影響。方法：1．在培養(yǎng)基中加入CoCl2模擬缺氧，用MTT法檢測(cè)CoCl2對(duì)PC-3細(xì)胞的抑制情況；采用反轉(zhuǎn)錄PCR （RT-PCR）檢測(cè)CoCl2與HIF-2α的mRNA轉(zhuǎn)錄的量-效和時(shí)-效關(guān)系，從而為腫瘤細(xì)胞的缺氧模型選擇一個(gè)最佳的作用濃度和最佳的作用時(shí)間。2．將實(shí)驗(yàn)分成常氧組、低氧組、低氧+脂質(zhì)體組、低氧+HIF-2αsiRNA組，用RT-PCR方法檢測(cè)48h各組中HIF-2α的mRNA水平；蛋白印跡實(shí)驗(yàn)（Western blotting）檢測(cè)前列腺癌細(xì)胞PC-3中HIF-2α蛋白的表達(dá)；MTT法檢測(cè)沉默HIF-2α基因?qū)?xì)胞生長(zhǎng)的影響；利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞的凋亡。結(jié)果：1．100μmol/L CoCl2作用48h可作為最佳前列腺癌細(xì)胞PC-3缺氧模型。2．各實(shí)驗(yàn)組都... 

【文章來(lái)源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁(yè)數(shù)】：53 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
英漢略縮語(yǔ)名詞對(duì)照
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分氯化鈷誘導(dǎo)缺氧對(duì)人前列腺癌細(xì)胞 HIF-2α表達(dá)的影響
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
第二部分 siRNA干擾HIF-2α基因?qū)η傲邢侔┘?xì)胞增殖和凋亡的影響
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]缺氧誘導(dǎo)因子-2α對(duì)人結(jié)腸癌SW480細(xì)胞凋亡的影響[J]. 張和平,王敬敏.  中國(guó)肛腸病雜志. 2012 (06)
[2]RNA干擾缺氧誘導(dǎo)因子2對(duì)腎癌786-0細(xì)胞的影響[J]. 潘周輝,陳昭典.  中國(guó)病理生理雜志. 2008(03)



本文編號(hào)：3314879