發(fā)布時(shí)間：2021-07-28 03:40

　　目的構(gòu)建以CREKA肽修飾的包載多西他賽脂質(zhì)體（CREKA-lipo-DTX）,評(píng)價(jià)該藥物傳遞系統(tǒng)體外靶向性和體外抗腫瘤效應(yīng)。方法首先采用邁克爾加成反應(yīng)合成靶向部分DSPE-PEG2000-CREKA,隨后使用薄膜水化-超聲法制備CREKA-lipo-DTX并對(duì)其基本表征進(jìn)行評(píng)價(jià);將PC-3細(xì)胞和RWPE-1細(xì)胞分別分為3組（n=3）:空白對(duì)照組、PEG-lipo-DiI組和CREKA-PEG-DiI組,脂質(zhì)體與細(xì)胞共孵育后,用激光共聚焦顯微鏡和流式細(xì)胞術(shù)分別對(duì)脂質(zhì)體的細(xì)胞攝入進(jìn)行定性和定量的分析,從而評(píng)價(jià)CREKA修飾脂質(zhì)體對(duì)PC-3細(xì)胞的靶向性;將PC-3細(xì)胞分為4組（n=3）:空白對(duì)照組、游離DTX組、PEG-lipo-DiI組和CREKA-PEG-DiI組,通過(guò)CCK-8法和Annexin V/PI雙染色法評(píng)價(jià)該藥物載體對(duì)PC-3細(xì)胞的增殖抑制效應(yīng)。結(jié)果成功制備出CREKA肽修飾的載藥脂質(zhì)體（CREKA-lipo-DTX）,其粒徑為（130.37±1.44）nm,包封率為（91.93±4.64）%。該藥物載體穩(wěn)定性良好,體外釋放結(jié)果顯示其具有較好的緩釋性。激光共聚焦顯微鏡和流式... 

【文章來(lái)源】：第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,42(21)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：9 頁(yè)

【部分圖文】：

DSPE-PEG2000-MAL、CREKA與DSPE-PEG2000-CREKA 的核磁氫譜圖

表1 不同脂質(zhì)體的粒徑、PDI、Zeta電位及包封率 ( x ˉ ±s,n=3) 組別 粒徑/nm 多分散系數(shù) Zeta電位/mV 包封率(%) PEG-lipo組 103.27±2.23 0.16±0.03 -31.81±0.33 - CREKA-lipo組 108.34±1.97 0.18±0.02 -27.49±0.48 - PEG-lipo-DTX組 120.70±2.43 0.22±0.01 -28.33±0.09 96.45±0.89 CREKA-lipo-DTX組 130.37±1.44 0.24±0.03 -30.74±0.28 91.93±4.642.3 體外細(xì)胞攝入實(shí)驗(yàn)

為了進(jìn)一步說(shuō)明細(xì)胞對(duì)脂質(zhì)體的攝取能力,采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)并分析細(xì)胞攝入脂質(zhì)體后的平均熒光強(qiáng)度來(lái)定量分析細(xì)胞攝取能力。結(jié)果顯示,在PC-3細(xì)胞中,CREKA-lipo-DiI組的脂質(zhì)體攝入量大約是PEG-lipo-DiI組的3倍(圖3C);而在RWPE-1細(xì)胞中,CREKA-lipo-DiI組的脂質(zhì)體攝入量只略高于PEG-lipo-DiI組,差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05,圖3D),與激光共聚焦顯微鏡觀察結(jié)果是一致的。PC-3細(xì)胞對(duì)脂質(zhì)體的攝入隨著時(shí)間的增加而增加,共孵育1 h時(shí),CREKA-lipo-DiI組的平均熒光強(qiáng)度與PEG-lipo-DiI組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);共孵育2 h時(shí),CREKA-lipo-DiI組的平均熒光強(qiáng)度顯著高于PEG-lipo-DiI組(P<0.05);共孵育4 h時(shí),CREKA-lipo-DiI組的平均熒光強(qiáng)度與PEG-lipo-DiI組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,圖4A)。圖4 時(shí)間和游離CREKA肽對(duì)PC-3細(xì)胞脂質(zhì)體攝入的影響(n=3)


本文編號(hào)：3307134