工作目的觀察組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶抑制劑C646分子聯(lián)合腰果酸（Anacardic acid,AA）對(duì)雄激素非依賴性前列癌細(xì)胞的增殖、凋亡、細(xì)胞周期、遷移能力的影響，并探討其機(jī)制。研究方法先采用MTS檢測方法觀察兩種藥物分別作用于各種前列腺癌細(xì)胞株及正常前列腺細(xì)胞后的毒性反應(yīng)，篩選出毒性相對(duì)較大的雄激素非依賴性前列腺癌細(xì)胞株繼續(xù)進(jìn)行分組實(shí)驗(yàn)，通過MTS、Trans-well實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞儀、倒置顯微鏡直接觀察等進(jìn)行細(xì)胞毒性檢測、增殖檢測、遷移能力檢測、凋亡檢測及細(xì)胞周期的檢測。并結(jié)合已有研究對(duì)其可能的作用機(jī)制進(jìn)行分析。結(jié)果MTS檢測發(fā)現(xiàn)兩種藥物對(duì)四種細(xì)胞株的毒性效應(yīng)相似,均表現(xiàn)為LNCaP>DU-145>PC-3>PNT1A，我們選擇DU-145進(jìn)行進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)，C646組對(duì)DU-145細(xì)胞株的毒性較為明顯，半抑制濃度約為20μmol/L，AA組的毒性作用相對(duì)較弱，半抑制濃度約為75μmol/L，但對(duì)正常前列腺細(xì)胞影響較大，當(dāng)小于25μmol/L時(shí)對(duì)正常細(xì)胞影響較小,后面的實(shí)驗(yàn)所用的就是這個(gè)濃度。C646組、AA組及聯(lián)合用藥組藥物分別作用于DU-145細(xì)胞后，（1）MTS檢測... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

不同濃度的C646分子對(duì)三種前列腺癌細(xì)胞株及一種正常前列腺上皮細(xì)胞株的毒性作用

圖 1b：不同濃度的 AA 對(duì)三種前列腺癌細(xì)胞株及一種正常前列腺上皮細(xì)胞株的毒性作用。故后續(xù)實(shí)驗(yàn)選用 AA 25μmol/L 作為對(duì)前列腺癌細(xì)胞有毒性作用的安全濃度。圖中，DU-145 細(xì)胞對(duì)兩種藥的敏感性在雄激素非依賴性前列腺癌細(xì)胞株中均為最高：LNCaP> DU-145>PC-3>PNT1A。2、兩種藥物單獨(dú)及聯(lián)合作用對(duì)雄激素非依賴性前列腺癌細(xì)胞系 DU-14的毒性作用用 DU-145 細(xì)胞加藥后 48h 做 MTS 實(shí)驗(yàn)比較兩個(gè)藥單獨(dú)用及聯(lián)用時(shí)的效果并比較不同加藥順序?qū)λ幬镄Ч挠绊�，結(jié)果顯示加藥順序?qū)λ幮]有區(qū)別,三組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），使用半抑制濃度的 C646 以及安全濃度的 AA 后，C646 組、A

圖 2：C646 及 AA 單獨(dú)作用及聯(lián)合作用時(shí)對(duì) DU-145 細(xì)胞的毒性作用。第二節(jié) 兩種藥物細(xì)胞毒性作用的鏡下表現(xiàn)不同濃度的兩藥或兩藥組合處理細(xì)胞 36 小時(shí)后，倒置顯微鏡（20X）下觀察發(fā)現(xiàn)正常的 DU-145 細(xì)胞呈長梭型，貼壁良好，折光度佳。與對(duì)照 1 相比，2 中細(xì)胞形態(tài)已開始變化，雖然大多數(shù)細(xì)胞形態(tài)仍正常但少數(shù)細(xì)胞已開始變圓，細(xì)胞數(shù)目已明顯減少，3 由于沒有達(dá)到 AA 的半抑制濃度，故對(duì)細(xì)胞的殺傷不如 2 明顯，提示 AA 對(duì)細(xì)胞的毒性不如 C646 強(qiáng)。但是，兩藥聯(lián)用后，C646 能明顯增加 AA 對(duì)細(xì)胞的毒性，4 中的細(xì)胞形態(tài)更圓，凋亡更多，大多數(shù)細(xì)胞趨向聚集，胞質(zhì)已不透明；5 中，加入更大劑量的 C646 后，不管是與 2 比，還是與 4 比，5 中細(xì)胞已聚集成塊，胞質(zhì)變暗，無法表現(xiàn)出細(xì)胞的正常形態(tài)結(jié)構(gòu)。綜上所述，兩藥聯(lián)用有協(xié)同作用， C646 能增強(qiáng) AA 對(duì)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]姜黃素誘導(dǎo)雄激素非依賴性前列腺癌PC3細(xì)胞周期阻滯和凋亡研究[J]. 胡志全,郭輝,諶科,王志華,余建華,葉章群.  中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2005(10)
[2]腫瘤壞死因子-α對(duì)膀胱癌細(xì)胞系中核轉(zhuǎn)錄因子kB的表達(dá)及對(duì)其調(diào)控基因的影響[J]. 謝東華,唐孝達(dá),譚建明,徐達(dá),王祥慧,夏術(shù)階,蔡勇.  中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2002(03)



本文編號(hào)：3264488