本文關(guān)鍵詞：p38蛋白激酶在高鹽誘導(dǎo)蛋白尿中的作用及其分子機制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:蛋白尿是腎臟疾病常見的臨床表現(xiàn)之一,其發(fā)病機制尚未得到明確,因此也未有針對性藥物治療,p38蛋白激酶是絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族成員之一,也是控制炎癥反應(yīng)的最重要成員,可以因高滲,紫外線等而激活。本課題主要是探討p38蛋白激酶在高鹽誘導(dǎo)蛋白尿中的作用,并從體內(nèi)、體外實驗探討其分子機制。目的就是在了解機體處于疾病狀態(tài)下高鹽誘導(dǎo)蛋白尿的發(fā)病機制的基礎(chǔ)上研究其靶向治療藥物。方法:1.將ICR小鼠36只(雄性,8-10周)隨機分為六組,每組各6只,分別為正常小鼠高鹽組,糖尿病小鼠高鹽組,糖尿病小鼠對照組,單側(cè)腎臟切除小鼠高鹽組,單側(cè)腎臟切除小鼠對照組,單側(cè)腎臟切除小鼠高鹽+p38抑制劑(SB202190)組。2.糖尿病小鼠組及單側(cè)腎臟切除小鼠組(1).用1%鏈脲佐菌素(STZ)給小鼠腹腔注射,剪鼠尾巴測血糖,血糖16mmol/L,并維持穩(wěn)定即糖尿病小鼠建模成功,四周后收集尿液。(2).單側(cè)腎臟切除小鼠即采用左側(cè)臥位,切除右側(cè)腎臟。1周后收集尿液。(3).給予4%高鹽水喂養(yǎng)糖尿病、單側(cè)腎臟切除高鹽組及正常高鹽組的小鼠,自由飲。給予無鹽水喂養(yǎng)各組對照組小鼠,自由飲,收集六組小鼠飲水12h,24h,36h,48h后的尿液,及停鹽水后12h,24h,36h的尿液。3.單側(cè)腎臟切除+p38抑制劑組小鼠在喂養(yǎng)4%高鹽水24h后腹腔注射一次p38抑制劑(SB202190),按上述時間點停鹽,并收集尿液。4.用考馬斯亮藍(lán)G250染色法,Elisa測尿白蛋白。取單側(cè)腎臟切除高鹽組及其對照組的脾臟組織,應(yīng)用PCR技術(shù)檢測NFAT5和IL-13 m RNA的表達(dá)情況。5.將ICR小鼠隨機分組,分為兩組,各組6只,一組為正常小鼠組,二組為單側(cè)腎臟切除組。6.分別取出正常小鼠組和單側(cè)腎臟切除組小鼠的脾臟、骨髓組織,分離單個核細(xì)胞,設(shè)立高鹽組、高鹽+p38抑制劑組(SB202190)和對照組,予細(xì)胞培養(yǎng)。采用PCR技術(shù)檢測NFAT5和IL-13 m RNA的表達(dá)情況。結(jié)果:1.考馬斯亮藍(lán)染色:糖尿病,單側(cè)腎臟切除小鼠高鹽組尿蛋白明顯高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),兩種模型的高鹽組尿蛋白也明顯高于正常小鼠高鹽組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。單側(cè)腎臟切除+p38抑制劑組于24h后尿蛋白明顯低于單側(cè)腎臟切除高鹽組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。Elisa:結(jié)果同考馬斯亮藍(lán)染色。PCR:單側(cè)腎臟側(cè)切除高鹽組脾臟組織NFAT5與其對照組表達(dá)無明顯差異,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)IL-13的表達(dá)明顯高于單側(cè)腎臟切除對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。2.細(xì)胞培養(yǎng)后,PCR:高鹽組NFAT5與IL-13明顯高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),高鹽+p38抑制劑組NFAT5與IL-13表達(dá)明顯低于高鹽組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論:在糖尿病及單側(cè)腎臟切除的小鼠中,予4%高鹽水喂養(yǎng)后,尿蛋白明顯高于其模型對照組,并也明顯高于正常小鼠高鹽組的尿蛋白。在單側(cè)腎臟切除高鹽+p38抑制劑組中,注射p38抑制劑后,尿蛋白明顯低于單側(cè)腎臟切除高鹽組。在單側(cè)腎臟切除高鹽組小鼠中,脾臟組織的IL-13明顯高于單側(cè)腎臟切除模型對照組,而NFAT5的表達(dá)無明顯區(qū)別。脾臟和骨髓單個核細(xì)胞在高鹽培養(yǎng)后,NFAT5和IL-13的表達(dá)明顯高于對照組,加入p38抑制劑(SB202190)后,表達(dá)水平下調(diào)。提示在處于疾病狀態(tài)時,予高鹽刺激后,產(chǎn)生的蛋白尿可能與p38蛋白激酶活化后NFAT5、IL-13的表達(dá)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：單側(cè)腎臟切除 尿蛋白 p38抑制劑 高鹽 NFAT5 IL-13
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R692
【目錄】：

• 英文縮略詞表4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 前言10-12
• 第一部分 從體內(nèi)實驗探討p38 蛋白激酶在高鹽誘導(dǎo)蛋白尿中的作用及其分子機制12-31
• 引言12
• 一、材料和方法12-24
• 二、結(jié)果24-27
• 三、討論27-30
• 四、小結(jié)30-31
• 第二部分 從體外實驗探討p38 蛋白激酶在高鹽誘導(dǎo)蛋白尿中的作用及其分子機制31-45
• 引言31
• 一、材料和方法31-39
• 二、結(jié)果39-43
• 三、討論43-44
• 四、小結(jié)44-45
• 總結(jié)論45-46
• 參考文獻46-49
• 綜述49-55
• 參考文獻52-55
• 致謝55

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 時凱鋒;戴飛;王昕;蔡潯遠(yuǎn);徐友妹;;白細(xì)胞介素-13與腎臟疾病的研究近況[J];中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2006年04期

2 蔡潯遠(yuǎn);戴飛;時凱峰;王昕;;益腎化瘀泄?jié)岱ㄕ{(diào)節(jié)慢性腎衰竭患者血清IL-13的臨床研究[J];中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2006年12期

3 李小會;;白細(xì)胞介素-13與腎臟疾病[J];中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2009年02期

4 劉海燕,唐德q，

本文編號：324009