目的：探討富氫HC-A腎保存液對大鼠腎臟冷缺血再灌注損傷的保護作用及相關機制。方法：健康雄性Wistar大鼠24只,周齡8-10周,體重200～250g,采用隨機數(shù)字表法,將其隨機分為3組：對照組（H1組）大鼠僅切除右腎；普通腎保存液組（H2組）大鼠采用冷缺血再灌注模型,經(jīng)右腎動脈穿刺置管,作為灌注道,經(jīng)右腎靜脈穿刺置管至左腎靜脈,作為流出道,于右側(cè)腎蒂上方和左側(cè)腎蒂下方同時阻斷腹主動脈及下腔靜脈,用4℃普通HC-A腎保存液經(jīng)右腎動脈插管灌注左腎,用吸引器及時吸凈右腎靜脈插管流出的血和灌注液,完成灌注后切除右腎,將左腎置于裝有4℃HC-A腎保存液的容器中冷保存60min,隨即恢復左腎血液灌注,沖洗腹腔后關腹；富氫腎保存液組（H3組）大鼠操作同H2組,灌注液及保存液換用自制的4℃富氫HC-A腎保存液。于再灌注24h時抽取下腔靜脈血樣,測定血清BUN、Cr、TNF-α和IL-6濃度。切取左腎,取部分腎臟制成腎組織勻漿,測定腎組織MDA、8-OHdG的含量及caspase-3活性。另取部分左腎組織用10%甲醛溶液固定,常規(guī)石蠟包埋,切成4μm薄片,行HE染色后于光學顯微鏡下觀察腎組織病理學結(jié)... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
1 對象和方法
    1.1 對象
        1.1.1 實驗動物
        1.1.2 主要儀器和設備
        1.1.3 主要藥品與試劑
    1.2 富氫HC-A腎保存液的制備
        1.2.1 制備方法與儲存條件
        1.2.2 氫氣濃度的檢測
    1.3 動物模型的制備和分組
        1.3.1 大鼠腎臟冷缺血再灌注損傷模型的建立
        1.3.2 動物分組
    1.4 標本采集
        1.4.1 血標本采集
        1.4.2 腎組織勻漿的制備
        1.4.3 腎組織石蠟切片的制備
    1.5 檢測指標與檢測方法
        1.5.1 腎功能的測定
        1.5.2 腎組織MDA和8-OHdG的測定
        1.5.3 血清TNF-α和IL-6的測定
        1.5.4 腎組織caspase-3活性的測定
        1.5.5 HE染色方法
        1.5.6 Paller評分法
        1.5.7 TUNEL染色方法
    1.6 統(tǒng)計學處理
2 結(jié)果
    2.1 腎功能
    2.2 腎組織MDA和8-OHdG含量
    2.3 血清TNF-α和IL-6水平
    2.4 腎組織caspase-3活性
    2.5 組織形態(tài)學改變
    2.6 細胞凋亡檢測結(jié)果
3 討論
    3.1 動物模型的建立
        3.1.1 實驗動物的選擇
        3.1.2 大鼠冷缺血再灌注模型的特點
    3.2 移植腎缺血再灌注損傷的機制
        3.2.1 再灌注組織活性氧的來源
        3.2.2 活性氧的損傷作用
    3.3 氫氣的選擇性抗氧化作用
    3.4 氫氣與缺血再灌注損傷
        3.4.1 氫氣對氧化應激的影響
        3.4.2 氫氣對炎癥反應的影響
        3.4.3 氫氣對細胞凋亡的影響
4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述
    綜述參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]靜脈注射含飽和氫氣生理鹽水對大鼠急性重癥胰腺炎的作用及其機制[J]. 張德慶,祝建紅.  中華醫(yī)學雜志. 2012 (34)
[2]氫氣飽和生理鹽水對百草枯中毒大鼠肺組織的作用[J]. 張慧利,柳遠飛,羅序睿,譚位華,陳耿靖.  中華急診醫(yī)學雜志. 2011 (07)
[3]大鼠腎冷缺血再灌注損傷模型的建立[J]. 楊鐵軍,謝小娟,陳小兵,王躍,張廣偉.  中華實驗外科雜志. 2011 (06)
[4]含飽和氫氣生理鹽水減輕小鼠肝臟缺血再灌注損傷[J]. 卞學藝,姜保成.  中華器官移植雜志. 2011 (03)
[5]含氫保存液降低大鼠供心保存過程中氧化應激和炎性損傷[J]. 孫向東,陸方林,崔勇,孫學軍,徐志云.  第二軍醫(yī)大學學報. 2010(09)
[6]含氫溶液對四氯化碳誘導小鼠急性肝損傷的保護作用[J]. 謝江,陳國慶,曹保軒.  中華消化雜志. 2010 (07)
[7]靜脈注射含飽和氫氣生理鹽水減輕小鼠腎臟缺血再灌注損傷[J]. 宋少華,沈筱蕓,傅志仁,劉芳,郭聞淵,傅宏,王正昕,丁國善.  中華器官移植雜志. 2010 (02)
[8]Expression of iNOS in early injury in a rat model of small-for-size liver transplantation[J]. Wei-Wei Jiang,Lian-Bao Kong,Guo-Qiang Li and Xue-Hao Wang The National Institute of Living Donor Liver Transplantation;Liver Transplantation Center,First Affiliated Hospital,Nanjing Medical University,Nanjing 210029,China.  Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International. 2009(02)



本文編號：3232742