本文關(guān)鍵詞：硫酸吲哚酚誘導(dǎo)臍靜脈內(nèi)皮細胞損傷及α-硫辛酸的干預(yù)作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景:內(nèi)皮細胞功能障礙和氧化應(yīng)激是心血管疾病發(fā)生發(fā)展的主要機制,慢性腎臟病(Chronic renal disease CKD)患者體內(nèi)尿毒癥毒素堆積是并發(fā)心血管疾病的高風(fēng)險因素;其中蛋白結(jié)合型尿毒癥毒素硫酸吲哚酚(Indoxyl Sulfate IS)能產(chǎn)生促氧化的作用,誘導(dǎo)血管內(nèi)皮功能障礙,促進心血管疾病的發(fā)生發(fā)展,近年來抗氧化劑改善內(nèi)皮細胞功能障礙的研究備受關(guān)注。目的:以人臍靜脈內(nèi)皮細胞(Human umbilical vein endothelial cells HUVEC)為實驗?zāi)Ｐ?探討抗氧化劑硫辛酸(alpha-lipoic acid LA)是能否干預(yù)尿毒癥毒素硫酸吲哚酚(IS)誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激和血管內(nèi)皮細胞損傷并初步探討其作用機制。方法:對人臍靜脈內(nèi)皮傳代細胞進行體外培養(yǎng),將其分成正常對照組、硫酸吲哚酚(IS)組、硫辛酸(LA)組及硫酸吲哚酚和硫辛酸聯(lián)合組(簡稱LA+IS組);通過ELISA法測定細胞內(nèi)3-硝基酪氨酸(3-Nitro-L-tyrosine3-NT)的含量,黃嘌呤氧化酶法測定細胞超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase SOD)活性,比色法測還原性谷胱甘肽(Glutathione GSH)的含量,硝酸還原酶法測量細胞培養(yǎng)液中一氧化氮(Nitric oxide NO)的含量及比色法測一氧化氮合成酶(Nitric oxide synthase NOS)活性,通過RT-PCR及熒光定量PCR技術(shù)分析內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(Endothelial nitric oxide synthase e NOS)的表達。統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS17.0軟件,結(jié)果用均數(shù)±標準差表示。多組間均數(shù)比較采用單因素方差分析(ANOVA),均數(shù)兩兩比較采用Bonferroni法檢驗,P0.05具有統(tǒng)計學(xué)意義。各組實驗至少重復(fù)4次。結(jié)果:1血管內(nèi)皮細胞氧化應(yīng)激指標①測定培養(yǎng)液GSH含量,與正常對照組(78.426±2.543mg/l)相比,IS組(54.683±3.408mg/l)GSH水平明顯降低(P0.001),LA組(89.754±2.938 mg/l)較之升高(P0.001),使用LA干預(yù)后的IS+LA組(81.348±3.254mg/l)較IS組(54.683±3.408mg/l)GSH升高(P0.001)。②相比對照組SOD活性(18.186±2.106U/mgprot),IS組(12.984±1.413U/mgprot)明顯降低(P0.001),使用LA干預(yù)后(20.390±1.124 U/mgprot)活性升高(P0.001),而使用IS+LA同時干預(yù)后(16.806±1.237U/mgprot)較IS組(12.984±1.413U/mgprot)SOD升高(P0.001)。2內(nèi)皮細胞NO相關(guān)指標①與對照組NO(48.235±2.508umol/l)相比,IS組(35.618±3.843umol/l)顯著性降低(P0.001);LA組(52.329±2.935umol/l)和IS+LA組(42.565±3.273umol/l)較IS組(35.618±3.843umol/l)NO升高(P0.001)。②NOS活性IS組(0.835±0.057U/L)較對照組(0.967±0.032U/L)相比,顯著性降低(P0.001),LA組(1.054±0.083 U/L)較之明顯升高(P0.001),IS+LA組(0.902±0.064U/L)較IS組(0.835±0.057U/L)NOS活性升高(P0.05)。③用ELISA法測定勻漿中3-NT含量,與對照組(38.175±5.403nmol/l)相比,IS組(47.665±4.934nmol/l)產(chǎn)生3-NT含量明顯增加(P0.001),LA組(30.473±3.496nmol/l)較之水平下降(P0.001),而IS+LA組(35.661±4.726nmol/l)較IS組(47.665±4.934nmol/l)產(chǎn)生3-NT的水平明顯下降(P0.001)。④RT-PCR檢測結(jié)果提示:e NOS表達與對照組(1.091±0.064)相比,IS組(1.054±0.092)呈現(xiàn)表達下調(diào)(P0.05),而用LA處理后,LA組(1.287±0.113)明顯上調(diào)(P0.05),IS+LA組(1.096±0.073)e NOS的表達水平也比較高(P0.05)。結(jié)論:1硫酸吲哚酚可誘導(dǎo)內(nèi)皮細胞氧化應(yīng)激2α-硫辛酸可能通過糾正e NOS脫偶聯(lián),清除多種ROS,改善硫酸吲哚酚對內(nèi)皮細胞的氧化損傷
【關(guān)鍵詞】：硫辛酸 硫酸吲哚酚 氧化應(yīng)激 一氧化氮 eNOS脫偶
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R692;R54
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-9
• 英文縮寫9-10
• 前言10-12
• 材料和方法12-21
• 結(jié)果21-23
• 附圖23-28
• 附表28-30
• 討論30-35
• 結(jié)論35-36
• 參考文獻36-39
• 綜述 Α-硫辛酸在慢性腎臟疾病中的應(yīng)用39-51
• 參考文獻46-51
• 致謝51-52
• 個人簡歷52

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 Yu-Feng Tian;Chih-Tsueng He;Yu-Ting Chen;Po-Shiuan Hsieh;;Lipoic acid suppresses portal endotoxemia-induced steatohepatitis and pancreatic inflammation in rats[J];World Journal of Gastroenterology;2013年18期

  本文關(guān)鍵詞：硫酸吲哚酚誘導(dǎo)臍靜脈內(nèi)皮細胞損傷及α-硫辛酸的干預(yù)作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：321532