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硫辛酸對高Hcy、高糖所致小鼠足細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激性凋亡的影響

發(fā)布時間:2021-04-15 22:51
  目的:在體外培養(yǎng)條件永生化小鼠足細(xì)胞,細(xì)胞分化后應(yīng)用高濃度同型半胱氨酸(high homocysteine, hHcy)、高濃度葡萄糖及硫辛酸處理足細(xì)胞,作用48h后觀察各組細(xì)胞形態(tài)及測定凋亡率,同時檢測內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)(Endoplasmic reticulum stress, ERS)標(biāo)志分子:半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(Caspase-12)和葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)的表達(dá)量,探究足細(xì)胞凋亡的發(fā)生與ERS的關(guān)系。方法:1、實驗分組:足細(xì)胞分化好以后隨機分為同型半光氨酸和葡萄糖兩大干預(yù)組,分別作用48h。其中Hcy組包含3個亞組:正常對照組、hHcy組、硫辛酸+hHcy組;高糖組包含4個亞組:高滲對照組、正常糖濃度對照組、高糖組、硫辛酸+高糖組。其中各試劑濃度如下:hHcy濃度:200umol/l、硫辛酸濃度:500umol/l、甘露醇濃度:25mmol/l、正常葡萄糖濃度:5.6mraol/l、高糖濃度:25mmol/l。需要檢測的指標(biāo)和使用的方法:Annexin V-FITC雙染足細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率;RT-PCR技術(shù)檢測GRP78及Caspase-12mRNA... 

【文章來源】:山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】:53 頁

【學(xué)位級別】:碩士

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