研究背景和目的糖尿病腎臟�。╠iabetic kidney disease,DKD）作為糖尿病最重要的并發(fā)癥之一,因為人們生活水平的提高,糖尿病也逐漸成為了影響人類健康的重要疾病,而糖尿病腎臟病的發(fā)病率自然是隨之不斷升高,目前在許多國家和地區(qū)已經(jīng)成為終末期腎病（ESRD）的首位原因,顯著增加了糖尿病患者的死亡率。由于糖尿病腎臟病患者體內(nèi)存在著復(fù)雜的代謝紊亂現(xiàn)象,使對發(fā)展到終末期的DKD進行治療面臨著極大的挑戰(zhàn)和困難,非常容易導(dǎo)致患者死亡。因此,尋求更早期、更有效的預(yù)防和治療糖尿病腎病的新切入點,阻止或延緩DKD進展是醫(yī)學(xué)界至今未能解決的一項難題,探討DKD的發(fā)病機制,尋找新的、有效的防御和治療方法具有緊迫性,也具有著非常重要的醫(yī)療和社會價值。過去人們以為,糖尿病腎臟疾病是以腎小球病變?yōu)橹鞯募膊?新近的研究發(fā)現(xiàn):在DKD的發(fā)生發(fā)病過程當中,腎小管細胞的損傷發(fā)揮著與腎小球損傷同等甚至更早期的重要作用。有鑒于此,對腎小管損傷的研究顯得非常重要而必要,使其成為了近年來對DKD相關(guān)研究的一個重要領(lǐng)域。microRNA（miRNA）是一種單鏈非編碼RNA,大概由22-24個核苷酸組合而成,能夠特異... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：122 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．１兩組ｍｉＲ－１５５－５ｐ的表達（ｎ＝３）??－－＝

測軟件ＴａｒｇｅｔＳｃａｎ分析，ｍｉＲ－１５５－５ｐ可與Ｓｉｒｔｌ－３＇ＵＴＲ靶向結(jié)合，因此將這個??位點構(gòu)建載體。利用Ｘｈｏｌ、Ｎｏｔｌ兩個限制性內(nèi)切酶將目的基因片段克隆到載體??中，載體圖譜如圖２．２??ＢａｆｎＨｉ４４５ｉ??ＳＶ４０?Ｌａｔｅ??ｐｏ＜ｙ（Ａ）?ｆ??ｍ－Ｋｐｒ．ＩＳＢ??１６７４?Ｎ〇？ｌ?＾？ＳＶ４０？Ａｆｆｙ??＾３?Ａ?＼?ａ，：??似?＿丨?／?＼、＼?ｒ７??■??圖２．２?ｐｓｉ－ＣＨＥＣＫ２載體工作原理圖??Ｆｉｇｕｒｅ?２．２?Ｗｏｒｋｉｎｇ?ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ?ｏｆ?ｐｓｉ－ＣＨＥＣＫ２?ｃａｒｒｉｅｒ??合成Ｓｉｒｔｌ－３＇ＵＴＲ基因于ｐｓｉ－ＣＨＥＣＫ２載體，序列如下：??ＴＧＴＡＡＴＡＡＴＴＧＴＧＣＡＧＧＴＡＣＡＧＧＡＡＴＴＧＴＴＣＣＡＣＣＡＧＣＡＴＴＡＧＧＡＡ??ＣＴＴＴＡＧＣＡＴＧＴＣＡＡＡＡＴＧＡＡＴＧＴＴＴＡＣＴＴＧＴＧＡＡＣＴＣＧＡＴＡＧＡＧＣＡＡ

圖２．１過表達后ｍｉＲ－１５５－５ｐ轉(zhuǎn)染效率驗證（ｎ＝３）??Ｖｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｍｉＲ－１５５－５ｐ?ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ?ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ?ａｆｔｅｒ?ｏｖｅｒｅｘｐ轉(zhuǎn)染?ｍｉＲ－１５５－５ｐ?ｍｉｍｉｃ?后?Ｓｉｒｔｌ、Ａｔｇ５、Ａｔｇ７?及?Ｃｏ況??ｉＲ－１５５－５ｐ?ｍｉｍｉｃ轉(zhuǎn)染有效之后，我們再次用ｍｉＲ－１５２細胞，使ｍｉＲ－ｌ５５－５ｐ過表達，同時設(shè)置陰性對照的總ＲＮＡ觀察Ｓｉｒｔｌ、Ａｔｇ５、Ａｔｇ７及Ｃｏｌ－１基因的ｍ，轉(zhuǎn)染７２小時后，ｍｉＲ－１５５－５ｐｍｉｍｉｃ組Ｓｉｒｔｌ、Ａｔｇ５水平均比ＮＣ組明顯降低，而Ｃｏｌ－１基因的ｍＲＮＡＳｉｒｔｌ（１．０００±０＿２５０?ＶＳ０．３７２±０＿０８３，＜０＿０５）；?Ａｔｇ５（ｌ＿０＜０．０５）；?Ａｔｇ７（ｌ＿０００±０．１０２?ＶＳ?０．４６９士０．０１１，＜０．０５）；??．１９８?ＶＳ?１．７４０士０．１６８，?＜０．０５）。（表?２－２，圖?２．２）??


本文編號：3140040