目的本課題通過對體外培養(yǎng)的不同特性的前列腺癌細胞株（LNCAP、PC3、DU145）及人正常前列腺腺上皮細胞（RWPE-1）中EN2（Engrailed-2）表達進行檢測，通過對前列腺癌患者腫瘤組織及前列腺增生患者組織中EN2表達情況分析，并分析EN2蛋白表達水平與前列腺癌病理分級之間的關(guān)系。探求EN2與前列腺癌的相關(guān)性，旨在尋求和發(fā)現(xiàn)一種對前列腺癌患者具有臨床應(yīng)用價值的早期診斷、預(yù)防、治療的標志物。方法通過細胞免疫熒光和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶反應(yīng)（RT-PCR）方法對不同前列腺癌細胞系（LNCAP、PC3、DU145）和人正常前列腺腺上皮細胞（RWPE-1）中EN2mRNA及蛋白進行檢測。通過對暨南大學(xué)附屬第一醫(yī)院2007.4-2012.3年間51例經(jīng)病理確診為前列腺癌的患者調(diào)取臨床資料和病理標本，并選取57例良性前列腺增生患者組織，進行EN2的免疫組化染色、Western blot檢測。并分析EN2表達水平與前列腺癌病理分級間之間的關(guān)系。結(jié)果1.前列腺癌細胞株中EN2在蛋白水平和分子水平都較人正常前列腺上皮細胞高表達；2. EN2在激素依賴性前列腺癌細胞表達水平又較激素非依賴性前列腺癌細胞增... 

【文章來源】：暨南大學(xué)廣東省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

-1含有同源框結(jié)構(gòu)的蛋白具有調(diào)節(jié)細胞周期的作用注：HOX11、HSIX1、MSX1和GAX為含有同源框結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)，其中HSIX1、MSX1

一． 圖1. EN2蛋白功能域示意圖注：引自Richard Morgan[22]作為細胞間傳遞信息的轉(zhuǎn)錄因子，EN2 可通過非經(jīng)典蛋白分泌途徑和內(nèi)攝活動而被細胞分泌和內(nèi)攝[23]。絕大部分 EN-2 作為轉(zhuǎn)錄因子定位于核內(nèi)并通過其DNA 結(jié)合結(jié)構(gòu)域與特異的 DNA 結(jié)合從而激活其下游基因的轉(zhuǎn)錄來執(zhí)行轉(zhuǎn)錄因子的相關(guān)功能[24, 25]，但是亦有少部分 EN2（< 5%）位于胞漿內(nèi)[26]。Engrailed 基因最初被認為只是果蠅的一個節(jié)段極性基因，隨后研究發(fā)現(xiàn) EN-2 蛋白參與了機體的多種病理生理活動，如胚胎發(fā)育[27]、突觸選擇[28]、視神經(jīng)軸突導(dǎo)向[19]、帕金森綜合癥、自閉癥等。二、EN2 與腫瘤關(guān)系最近研究發(fā)現(xiàn)，EN2 還與某些腫瘤的發(fā)生有關(guān)。Martin 等[29]使 EN2 在人正常乳腺上皮細胞系中異位表達后，人正常乳腺上皮細胞則表現(xiàn)出惡性病變的特性，如細胞周期縮短、細胞與細胞間的接觸性喪失，應(yīng)用 RNA 干擾技術(shù)使人乳

）中的 RT-PCR 的檢測A 鑒定分光光度計測定 OD260 和 OD280 值，計算所用樣品中 RNA 的含/A280 值在 LNCAP、DU145、PC3 前列腺癌細胞系及人正常前列腺PE-1 分別為：2.10、2.02、2.03、1.80，均在 1.8~2.0 附近，說明 Rtion 的檢測及 EN2 基因 PCR 擴增產(chǎn)物電泳結(jié)果n 作為內(nèi)參在 LNCAP、DU145 和 PC3 前列腺癌細胞系，人正常前 RWPE-1 中的表達，擴增片段大小與預(yù)期相符，擴增條帶亮度也相樣品中提取總RNA量一致，β-action可以作為RT-PCR分析的內(nèi)參因在人正常前列腺上皮細胞 RWPE-1 中呈現(xiàn)弱表達，在前列腺癌細、DU145 和 PC3 中明顯表達，其中在 PC3 和 DU145 細胞中表達水AP 中的表達水平要高于 PC3 和 DU145 中的表達。

【參考文獻】：
期刊論文
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