研究目的:高齡男性的生育健康是一個(gè)急需關(guān)注的社會(huì)問(wèn)題。本團(tuán)隊(duì)在前期研究中發(fā)現(xiàn)miR-574在高齡雄鼠精子中高表達(dá)�；趍iR-574的人鼠同源性,本研究擬進(jìn)一步分析臨床高齡病人及高齡動(dòng)物模型精子樣本中miR-574的表達(dá)情況,并通過(guò)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)明確其具體的調(diào)控機(jī)制,在此基礎(chǔ)上探索其在臨床應(yīng)用的可能性,以期為評(píng)估和改善男性精子質(zhì)量提供靶點(diǎn)。材料與方法:構(gòu)建小鼠自然高齡（18月齡鼠）及對(duì)照（10周齡鼠）模型,以及D-gal誘導(dǎo)小鼠高齡（8周齡鼠,D-gal誘導(dǎo)42天）及對(duì)照（8周齡鼠,生理鹽水誘導(dǎo)42天）模型,收集各組精子,并在臨床上收集高齡/年輕男性精子樣本。提取各組精子總RNA,實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)miR-574的表達(dá)趨勢(shì)。同時(shí)取附睪尾精子,檢測(cè)其濃度、活力、畸形率,分析這些參數(shù)與miR-574表達(dá)水平相關(guān)性。在小鼠精母細(xì)胞系GC2細(xì)胞中,通過(guò)轉(zhuǎn)染miR-574的模擬劑和抑制劑以過(guò)表達(dá)或抑制miR-574,檢測(cè)ROS水平、ATP水平和線粒體膜電位。通過(guò)miRNA靶點(diǎn)預(yù)測(cè),發(fā)現(xiàn)線粒體通路相關(guān)基因mt-ND5可能是miR-574的靶基因,用實(shí)時(shí)定量PCR法和western blot檢測(cè)其mRN... 

【文章來(lái)源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２．?２１７８例男性精液樣本按年齡分組進(jìn)行精液參數(shù)分析

?領(lǐng)士學(xué)位論文???Ａ?ｍｉ＿?“??Ｓｅｅｄ??Ｍｕｓ?ｍｕｓｃｕｌｕｓ?１?ＧＡＧＵＧＵ＜?－?ｌ?＜．Ｉ?ｆ．?Ｉ?（■?ｉ?ｆ?■?．?Ｉ?＜．?ｉ?＇?．?ｉ?－＇??Ｈｕｍｏ?ｓａｐｉｅｎｓ?「Ｉ?ＧＡＧｌｉＣＪｌＫ?，ｌ?（．?Ｉ?＜．?Ｉ?＜．?＼＜?，１?＜?．１?（．１?ｖ??Ｓｕｓ?ｓｃｒｏｆａ?＇?＼?ＧＡＧＵＧＵＭ?（．?ｉ?＜．?ｉ?？?．Ｍ?．?＼（?．１?＜．?Ｉ?（，！?＾??Ｂ?？ｌｌ?Ａ＾．ｎｕ??ｒ－ｒｒｒ￣￣Ｉ??６?Ｖ?ｌ?＾?？，?。守?Ｉ??Ｍ?＾ｌｉｌ＾ｌｉｌｌｌｌｍ??Ｆ?ｎｓ?Ｇ?Ｈ?１??ｎｓ??？??？??？〇１?Ｉ?１?１００－１?｜?Ｉ?２９－ｉ?（?丨?ｓ?２．０－??！：ｉｉ??圖１－４．自然高齡小鼠模型的建立??（Ａ）?ＭｉＲ－５７４在多種物種中高度保守。??（Ｂ）?然高齡小鼠表現(xiàn)出頭發(fā)稀疏，機(jī)能減退和其他衰老特征。??（Ｃ－Ｅ）自然高齡小鼠模Ｍ的體重，睪丸重量和睪丸器官指數(shù)。??（Ｆ－Ｉ）自然高齡小鼠模型的精子濃度，精子活力，１）１［向運(yùn)動(dòng)能力和血清睪酮含量。??（Ｊ－Ｋ）在自然高齡小鼠模型的舉幾屮進(jìn)彳丁?Ｈ＆Ｅ染色和屯／－顯微鏡觀察。??（Ｌ）自然高齡小鼠中精子濃度和ｍｉＲ－５７４表達(dá)量的散點(diǎn)圖。??Ｆｉｇｕｒｅ?１－４．?Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ?ｏｆ?ｎａｔｕｒａｌ?ａｇｉｎｇ?ｍｉｃｅ?ｍｏｄｅｌ．??（Ａ）?ＭｉＲ－５７４?ｈｉｇｈｌｙ?ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ?ｉｎ?ｍｕｌｔｉｐｌｅ?ｓｐｅｃｉｅｓ．??１５??

Ｒ（ａ＋ｂ）?％??°?４０－，?Ｅ?Ｒ２＝０．２７８３?Ｆ?１５．?Ｒ２＝〇２２２６??？＊?Ｐ＝０．０２０３?ｐ＝〇．〇４１４??｜ｓ３〇?；?Ｉ１０－?Ｓ１０?＊??ＩＩ?＿＿?Ｉ?５．?？?全?５．?一?？？?？??｜?，〇－?ｎ?Ｅ?Ｅ??０?？＞?〇｜??〇Ｊ?，?，?，?，??々身?０?２０?４０?６０?８０?１００?０?１０?２０?３０?４０??０°＾?°?Ｓｐｅｒｍ?Ｍｏｔｉｌｉｔｙ?ＰＲ（ａ＋ｂ）?％??圖１－６．?ｍｉＲ－５７４在高齡小鼠模型精子中上調(diào)，并且與其精子活力降低有關(guān)??（Ａ）?ｍｉＲ－５７４在自然高齡小鼠模型精子中的表達(dá)。采用ｔ檢驗(yàn)比較兩組的差異。??＊＊＊?ｐ?＜０．００１??１８??


本文編號(hào)：3061040