多重置換擴(kuò)增(MDA)結(jié)合多重PCR-Y染色體微缺失檢測方法的探究
發(fā)布時間:2021-02-09 11:10
目的:第一部分:通過對男性原發(fā)不育患者Y染色體微缺失的分析研究,探討Y染色體微缺失的臨床意義,為臨床進(jìn)行男性不育的診斷、治療以及輔助生殖技術(shù)提供相應(yīng)的理論依據(jù)。第二部分:回顧性分析Y染色體微缺失患者行ICSI-ET治療的胚胎受精率、卵裂率、優(yōu)胚率、妊娠率及早期流產(chǎn)率等指標(biāo),初步探討Y染色體微缺失是否影響ICSI治療結(jié)局。第三部分:通過多重置換擴(kuò)增(MDA)聯(lián)合聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)建立單細(xì)胞AZF檢測方法,為臨床Y染色體微缺失患者植入前胚胎行AZF檢測提供新的方法,為患者合理選擇移植胚胎和更確切的遺傳學(xué)咨詢提供依據(jù)。方法:第一部分:以2012年1月~2012年10月于天津市中心婦產(chǎn)科醫(yī)院生殖中心就診的男性原發(fā)無精子癥、嚴(yán)重少弱精子癥和少精子癥患者122例為研究對象。所有患者均按照世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦的方法和診斷標(biāo)準(zhǔn)加以確診,排除內(nèi)分泌失調(diào)及輸精管阻塞等因素。留取上述患者外周血2mL,乙二胺四乙酸鹽(EDTA)抗凝,標(biāo)本在檢測前置-20℃冰箱保存。選取30例已正常生育的健康男性為對照。采用鹽析法提取DNA,選取15個位點(diǎn)進(jìn)行Y染色體微缺失檢測,包括AZFa區(qū)的sY82、sY84、...
【文章來源】:天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校
【文章頁數(shù)】:58 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
縮略語
前言
研究現(xiàn)狀、成果
研究目的、方法
一、男性不育患者外周血Y染色體微缺失的檢測
1.1 對象和方法
1.1.1 實(shí)驗(yàn)對象
1.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
1.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
1.1.4 外周血DNA的提取
1.1.5 Y染色體微缺失檢測
1.1.6 激素測定
1.1.7 統(tǒng)計學(xué)方法
1.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1.2.1 DNA提取的質(zhì)量
1.2.2 男性不育患者基礎(chǔ)臨床資料及性激素的比較
1.2.3 Y染色體微缺失結(jié)果
1.3 討論
1.4 小結(jié)
二、Y染色體微缺失患者體外受精胚胎情況及臨床結(jié)局
2.1 對象和方法
2.1.1 研究對象
2.1.2 方法
2.2 結(jié)果
2.2.1 A組和B組間患者基本情況和臨床治療指標(biāo)的比較
2.2.2 各缺失類型間的胚胎情況
2.3 討論
2.4 小結(jié)
三、MDA-PCR-AZF檢測方法的建立
3.1 對象和方法
3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
3.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
3.1.4 實(shí)驗(yàn)方法
3.1.5 單個細(xì)胞的裂解
3.1.6 多重置換擴(kuò)增
3.1.7 性別鑒定
3.1.8 AZF檢測
3.2 結(jié)果
3.3 討論
3.4 小結(jié)
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
附錄
綜述
綜述參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號:3025543
【文章來源】:天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校
【文章頁數(shù)】:58 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
縮略語
前言
研究現(xiàn)狀、成果
研究目的、方法
一、男性不育患者外周血Y染色體微缺失的檢測
1.1 對象和方法
1.1.1 實(shí)驗(yàn)對象
1.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
1.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
1.1.4 外周血DNA的提取
1.1.5 Y染色體微缺失檢測
1.1.6 激素測定
1.1.7 統(tǒng)計學(xué)方法
1.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1.2.1 DNA提取的質(zhì)量
1.2.2 男性不育患者基礎(chǔ)臨床資料及性激素的比較
1.2.3 Y染色體微缺失結(jié)果
1.3 討論
1.4 小結(jié)
二、Y染色體微缺失患者體外受精胚胎情況及臨床結(jié)局
2.1 對象和方法
2.1.1 研究對象
2.1.2 方法
2.2 結(jié)果
2.2.1 A組和B組間患者基本情況和臨床治療指標(biāo)的比較
2.2.2 各缺失類型間的胚胎情況
2.3 討論
2.4 小結(jié)
三、MDA-PCR-AZF檢測方法的建立
3.1 對象和方法
3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
3.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
3.1.4 實(shí)驗(yàn)方法
3.1.5 單個細(xì)胞的裂解
3.1.6 多重置換擴(kuò)增
3.1.7 性別鑒定
3.1.8 AZF檢測
3.2 結(jié)果
3.3 討論
3.4 小結(jié)
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
附錄
綜述
綜述參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號:3025543
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