研究背景腎細(xì)胞癌（renal cell carcinoma,RCC）是泌尿系統(tǒng)腫瘤中發(fā)病率最高的惡性腫瘤之一,占成年人惡性腫瘤比例的2%-3%,而最常見的類型是透明細(xì)胞性腎細(xì)胞癌（clear cell renal cell carcinoma,ccRCC）,其侵襲性較高。除了手術(shù)治療,其它治療方案的效果欠佳,而且即使可以行手術(shù)治療,患者的復(fù)發(fā)率及轉(zhuǎn)移率仍較高,最高可達(dá)40%。因此研究RCC的潛在轉(zhuǎn)移機(jī)制,將具有重大的應(yīng)用價(jià)值。本課題應(yīng)用mRNA高通量表達(dá)譜芯片技術(shù),通過比對(duì)分析RCC組及相應(yīng)癌旁正常腎組織組的差異表達(dá)基因,結(jié)合文獻(xiàn)復(fù)習(xí),最終選擇了 MAG11（membrane-associated guanylate kinase with an inverted repeat member 1）作為本實(shí)驗(yàn)的研究對(duì)象。目前,關(guān)于MAGI1基因的報(bào)道少見,尚未發(fā)現(xiàn)有關(guān)MAGI1在RCC中的表達(dá)及與RCC轉(zhuǎn)移機(jī)制的文獻(xiàn)報(bào)道。MAGI1屬于鳥苷酸激酶家族的成員,主要編碼細(xì)胞骨架蛋白,具有維持細(xì)胞形態(tài)、傳導(dǎo)信息等作用。此外,該基因還參與細(xì)胞的多種生物學(xué)過程,比如在細(xì)胞增殖發(fā)育、細(xì)胞凋亡以及RN... 

【文章來源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：121 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖２ｂ劃痕試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力??

為了研宄ＭＡＧＩ１在ＲＣＣ轉(zhuǎn)移中的作用，我們?cè)冢粒矗梗负停粒茫龋渭?xì)胞中構(gòu)??建ＭＡＧＩ１過表達(dá)和ＭＡＧＩ１敲低穩(wěn)定細(xì)胞系。分別使用Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ檢測(cè)和??ＲＴ－ｑＰＣＲ檢測(cè)蛋白和ｍＲＮＡ水平上的ＭＡＧＩ１過表達(dá)和敲低的效率（圖２ａ）。劃??痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過表達(dá)和敲低ＭＡＧＩ１對(duì)ＲＣＣ細(xì)胞遷移的影響。我們發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組??相比，ｓｈ－ＭＡＧ丨１?（ＭＡＧ１丨敲低表達(dá)）細(xì)胞的遷移能力顯著增加（圖２ｂ？右）。與??對(duì)照細(xì)胞相比，ＬＶ－ＭＡＧ丨１（ＭＡＧＩ１過表達(dá)）細(xì)胞的遷移能力顯著降低（圖２ｂ，??中間）。為了進(jìn)一步檢查ＭＡＧＩ１對(duì)侵襲的影響，進(jìn)行基質(zhì)膠包被的Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ侵??襲實(shí)驗(yàn)，ＭＡＧＩ１的敲低促進(jìn)細(xì)胞侵襲，而ＭＡＧＩ１的過表達(dá)降低了侵襲潛力（圖??２ｃ）。此外，通過Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ檢測(cè)ＥＭＴ標(biāo)志物的表達(dá)水平。如圖２ｄ所示，??Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ在ｓｈ－ＭＡＧ丨丨細(xì)胞中表達(dá)下調(diào)，而Ｖｉｍｅｎｔｉｎ的表達(dá)顯著増加。ＭＡＧＩ１??低表達(dá)介導(dǎo)ＲＣＣ的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化。??＾?＾?＾??＾?…??Ｉ１－??０?６．１?１．０５?０．１７?？??Ａ－４９８???Ｉ２＂???Ｉ?ｌ±Ｓｊｔ＃Ｅ：??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＬＶ－ＭＡＯ（１?ｓｈ－ＭＡＧＩ１??Ｓ－．?．．．??＿＿?ｉ?４＇?ｊ?Ｉ??０．４１?０?８５?０．０８?＾?Ｊ－??ａｃｈｎ??２，?！???１?ｉ＋蘋學(xué)不？??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＬＶ－ＭＡＯＩ１?ｓｈ－ＭＡＯＩＩ??圖２ａ?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ檢測(cè)（左）和ＲＴ－ｑＰＣＲ檢測(cè)（右）ＭＡＧ丨１的蛋白和ｍＲＮＡ水平??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＬＶ－ＭＡＧ?１１?ｓｈ－ＭＡＧＭ?

cTranswell試驗(yàn)住對(duì)細(xì)臉住襲能力

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：2951713