研究背景腎細胞癌（renal cell carcinoma,RCC）是泌尿系統(tǒng)腫瘤中發(fā)病率最高的惡性腫瘤之一,占成年人惡性腫瘤比例的2%-3%,而最常見的類型是透明細胞性腎細胞癌（clear cell renal cell carcinoma,ccRCC）,其侵襲性較高。除了手術治療,其它治療方案的效果欠佳,而且即使可以行手術治療,患者的復發(fā)率及轉移率仍較高,最高可達40%。因此研究RCC的潛在轉移機制,將具有重大的應用價值。本課題應用mRNA高通量表達譜芯片技術,通過比對分析RCC組及相應癌旁正常腎組織組的差異表達基因,結合文獻復習,最終選擇了 MAG11（membrane-associated guanylate kinase with an inverted repeat member 1）作為本實驗的研究對象。目前,關于MAGI1基因的報道少見,尚未發(fā)現(xiàn)有關MAGI1在RCC中的表達及與RCC轉移機制的文獻報道。MAGI1屬于鳥苷酸激酶家族的成員,主要編碼細胞骨架蛋白,具有維持細胞形態(tài)、傳導信息等作用。此外,該基因還參與細胞的多種生物學過程,比如在細胞增殖發(fā)育、細胞凋亡以及RN... 

【文章來源】：山東大學山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖２ｂ劃痕試驗檢測細胞遷移能力??

為了研宄ＭＡＧＩ１在ＲＣＣ轉移中的作用，我們在Ａ－４９８和ＡＣＨＮ細胞中構??建ＭＡＧＩ１過表達和ＭＡＧＩ１敲低穩(wěn)定細胞系。分別使用Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ檢測和??ＲＴ－ｑＰＣＲ檢測蛋白和ｍＲＮＡ水平上的ＭＡＧＩ１過表達和敲低的效率（圖２ａ）。劃??痕實驗檢測過表達和敲低ＭＡＧＩ１對ＲＣＣ細胞遷移的影響。我們發(fā)現(xiàn)與對照組??相比，ｓｈ－ＭＡＧ丨１?（ＭＡＧ１丨敲低表達）細胞的遷移能力顯著增加（圖２ｂ？右）。與??對照細胞相比，ＬＶ－ＭＡＧ丨１（ＭＡＧＩ１過表達）細胞的遷移能力顯著降低（圖２ｂ，??中間）。為了進一步檢查ＭＡＧＩ１對侵襲的影響，進行基質膠包被的Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ侵??襲實驗，ＭＡＧＩ１的敲低促進細胞侵襲，而ＭＡＧＩ１的過表達降低了侵襲潛力（圖??２ｃ）。此外，通過Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ檢測ＥＭＴ標志物的表達水平。如圖２ｄ所示，??Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ在ｓｈ－ＭＡＧ丨丨細胞中表達下調，而Ｖｉｍｅｎｔｉｎ的表達顯著増加。ＭＡＧＩ１??低表達介導ＲＣＣ的上皮間質轉化。??＾?＾?＾??＾?…??Ｉ１－??０?６．１?１．０５?０．１７?？??Ａ－４９８???Ｉ２＂???Ｉ?ｌ±Ｓｊｔ＃Ｅ：??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＬＶ－ＭＡＯ（１?ｓｈ－ＭＡＧＩ１??Ｓ－．?．．．??＿＿?ｉ?４＇?ｊ?Ｉ??０．４１?０?８５?０．０８?＾?Ｊ－??ａｃｈｎ??２，?！???１?ｉ＋蘋學不？??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＬＶ－ＭＡＯＩ１?ｓｈ－ＭＡＯＩＩ??圖２ａ?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ檢測（左）和ＲＴ－ｑＰＣＲ檢測（右）ＭＡＧ丨１的蛋白和ｍＲＮＡ水平??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＬＶ－ＭＡＧ?１１?ｓｈ－ＭＡＧＭ?

cTranswell試驗住對細臉住襲能力

【參考文獻】：
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碩士論文
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本文編號：2951713