目的研究脂肪甘油三酯脂肪酶（adipose triglyceride lipase,ATGL）基因敲除對(duì)C57BL/6鼠腎臟結(jié)構(gòu)和功能的影響。方法將Atgl+/-小鼠通過(guò)近親交配繁殖得到Atgl基因敲除純合子小鼠(Atgl^-/-鼠)和野生型鼠(Atgl^+/+鼠),通過(guò)觀察Atgl^-/-鼠和Atgl^+/+鼠腎臟結(jié)構(gòu)和功能差異來(lái)研究Atgl基因敲除對(duì)小鼠腎臟結(jié)構(gòu)和功能影響。實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組(Atgl^+/+鼠)及實(shí)驗(yàn)組(Atgl^-/-鼠),為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的一致性,實(shí)驗(yàn)所用所有小鼠均為雄性;8¹0周齡;體質(zhì)量約20 g;每組8只。ELISA檢測(cè)各組小鼠尿肌酐及尿白蛋白濃度,通過(guò)計(jì)算尿白蛋白肌酐比反映腎功能變化。HE染色及透射電鏡分別觀察各組小鼠腎皮質(zhì)病理及超微病理改變。油紅O染色觀察脂肪在各組小鼠腎臟分布。腎臟組織TG定量檢測(cè)比較兩種小鼠腎臟TG含量差異。結(jié)果 Atgl^-/-鼠尿白蛋白肌酐比顯著高于對(duì)照組[（4 219.0... 

【文章來(lái)源】：第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2016年10期 北大核心

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圖1兩組小鼠腎臟大體觀

?.05，與Atgl+/+組比較2．2Atgl基因敲除導(dǎo)致腎皮質(zhì)脂滴聚集增加圖1顯示兩種小鼠腎臟大體比較。Atgl+/+小鼠約0．9cm×0．5cm大小，色澤鮮紅;而Atgl-/-小鼠較Atgl+/+小鼠明顯縮小，約0．8cm×0．45cm大小，且顏色泛白，提示可能存在較多脂肪。HE染色提示，與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組腎小管出現(xiàn)明顯腫脹，腫脹的腎小管對(duì)腎小囊的擠壓使得腎小囊體積明顯縮小，腎皮質(zhì)彌漫性存在大量空泡狀結(jié)構(gòu);油紅O染色進(jìn)一步顯示這些空泡狀結(jié)構(gòu)為脂滴，大量脂滴累及Atgl-/-小鼠腎小球及腎小管，其中以腎小管受累最嚴(yán)重(圖2)。腎臟TG定量提示Atgl-/-小鼠每毫克腎臟組織中TG含量較Atgl+/+小鼠高出10倍以上(39．89±5．14)μgvs(2.18±0．58)μg。0.2cmAtgl-/-組Atgl+/+組圖1兩組小鼠腎臟大體觀HE染色油紅O染色Atgl+/+組Atgl-/-組圖2光鏡下觀察兩組小鼠腎臟組織病理變化(×200)2．3Atgl基因敲除導(dǎo)致足細(xì)胞融合及腎小管亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)改變腎臟透射電鏡檢測(cè)結(jié)果顯示，在對(duì)照組中，腎小球?yàn)V過(guò)屏障結(jié)構(gòu)完整，足細(xì)胞足突形態(tài)正常(圖3A)，各細(xì)胞中均未見脂滴存在，腎小管細(xì)胞內(nèi)線粒體豐富，形態(tài)結(jié)構(gòu)正常(圖3C)，微絨毛形態(tài)正常;在實(shí)驗(yàn)組中，足細(xì)胞足突出現(xiàn)大量融合(圖3B)，腎小球?yàn)V過(guò)屏障結(jié)構(gòu)受損。大量脂滴堆積于足細(xì)胞及腎小管細(xì)胞中(圖3B、D)，腎小管細(xì)胞線粒體棘突可見不同程度消失(圖3D)，微絨毛不同程度脫落、萎縮，提示腎小管細(xì)胞功能失調(diào)，重吸收障礙。腎小球腎小管Atgl+/+組Atgl-/-組2%μm2%μm2%μm2%μm▲:示脂滴;↑:示線粒體;小框?yàn)樽慵?xì)胞足突;大框?yàn)樾】虻姆糯笥^察圖3透射電鏡觀察兩組小鼠腎小球、腎小管超微結(jié)構(gòu)變化3討論脂肪代謝紊亂導(dǎo)致過(guò)多

脂滴累及Atgl-/-小鼠腎小球及腎小管，其中以腎小管受累最嚴(yán)重(圖2)。腎臟TG定量提示Atgl-/-小鼠每毫克腎臟組織中TG含量較Atgl+/+小鼠高出10倍以上(39．89±5．14)μgvs(2.18±0．58)μg。0.2cmAtgl-/-組Atgl+/+組圖1兩組小鼠腎臟大體觀HE染色油紅O染色Atgl+/+組Atgl-/-組圖2光鏡下觀察兩組小鼠腎臟組織病理變化(×200)2．3Atgl基因敲除導(dǎo)致足細(xì)胞融合及腎小管亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)改變腎臟透射電鏡檢測(cè)結(jié)果顯示，在對(duì)照組中，腎小球?yàn)V過(guò)屏障結(jié)構(gòu)完整，足細(xì)胞足突形態(tài)正常(圖3A)，各細(xì)胞中均未見脂滴存在，腎小管細(xì)胞內(nèi)線粒體豐富，形態(tài)結(jié)構(gòu)正常(圖3C)，微絨毛形態(tài)正常;在實(shí)驗(yàn)組中，足細(xì)胞足突出現(xiàn)大量融合(圖3B)，腎小球?yàn)V過(guò)屏障結(jié)構(gòu)受損。大量脂滴堆積于足細(xì)胞及腎小管細(xì)胞中(圖3B、D)，腎小管細(xì)胞線粒體棘突可見不同程度消失(圖3D)，微絨毛不同程度脫落、萎縮，提示腎小管細(xì)胞功能失調(diào)，重吸收障礙。腎小球腎小管Atgl+/+組Atgl-/-組2%μm2%μm2%μm2%μm▲:示脂滴;↑:示線粒體;小框?yàn)樽慵?xì)胞足突;大框?yàn)樾】虻姆糯笥^察圖3透射電鏡觀察兩組小鼠腎小球、腎小管超微結(jié)構(gòu)變化3討論脂肪代謝紊亂導(dǎo)致過(guò)多的脂肪酸及甘油三酯聚集于非脂肪細(xì)胞包括心肌細(xì)胞、骨骼肌細(xì)胞、肝細(xì)胞等可對(duì)靶器官和細(xì)胞造成嚴(yán)重?fù)p傷，這種過(guò)程被稱作脂毒性作用［10］，但其中的分子機(jī)制還并不太清楚。文獻(xiàn)［11－12］報(bào)道，線粒體損傷誘導(dǎo)的活性氧(ＲOS)增加在這個(gè)過(guò)程中扮演重要作用。線粒體作為細(xì)胞的能量中心，也承擔(dān)著清除多余ＲOS的功能［13］。線粒體功能失調(diào)可導(dǎo)致細(xì)胞及組織ＲOS活性增加，ＲOS可通過(guò)激活下游信號(hào)分子誘導(dǎo)細(xì)胞失能或死亡［14－15］。ATGL作為


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