發(fā)布時間：2020-12-30 04:27

　　背景與目的 糖尿病腎�。―iabetic nephropathy,DN）是糖尿病的嚴(yán)重并發(fā)癥之一,也是導(dǎo)致終末期腎病（ESRD）最常見的原因^[1]。大量的研究證實(shí),DN是一種炎癥性疾病,而巨噬細(xì)胞的激活和浸潤在DN的發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用^[2]。外泌體（exosomes）是由膜衍生而來的直徑約30-100nm的囊泡,已被證實(shí)可由多種細(xì)胞分泌,游走于各體液之間,在細(xì)胞與細(xì)胞間的交流發(fā)揮著重要的作用。研究證實(shí),高糖環(huán)境下的腎臟固有細(xì)胞之間,經(jīng)由外泌體的傳遞而發(fā)生了密切的信息交流,從而減輕或加重DN^[3-6]。目前,關(guān)于細(xì)胞來源的外泌體對于巨噬細(xì)胞激活作用的研究主要集中在干細(xì)胞和脂肪細(xì)胞。例如,Zhao等的研究發(fā)現(xiàn),脂肪源干細(xì)胞分泌的外泌體通過極化M2型巨噬細(xì)胞來減輕脂肪組織的炎癥和改善肥胖^[7]。那么,在DN中,巨噬細(xì)胞的激活和腎臟固有細(xì)胞分泌的外泌體之間到底有著怎樣的聯(lián)系,目前少見研究報道。本研究以高糖作用下腎小管上皮細(xì)胞分泌的外泌體作為研究對象,探討其對巨噬細(xì)胞的作用和機(jī)制。為探究DN中腎臟固有細(xì)... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

正常糖和高糖條件下腎小管上皮細(xì)胞分泌外泌體的形態(tài)（磷鎢酸負(fù)染20000x電鏡）

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文4.2 Western blot 檢測沉淀物是否有外泌體標(biāo)志蛋白的表達(dá)圖 2 結(jié)果顯示，提取的沉淀物均檢測到外泌體標(biāo)志蛋白 CD63、TSG101 的表達(dá)，卻未檢測到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分子伴侶蛋白 Calnexin 的表達(dá)，表明提取的外泌體中不含細(xì)胞組分，純度較高。證實(shí)了該沉淀物即為外泌體。

圖 3 THP-1 單核細(xì)胞誘導(dǎo)成為巨噬細(xì)胞的鑒定Fig 3 THP-1 monocytes differentiation into macrophages注：A：1：THP-1；2：THP-1 macrophage； B：CD68-the classical macrophage marker(Flowcytometry)4.4 THP-1 巨噬細(xì)胞經(jīng)外泌體刺激后的形態(tài)改變圖 4 顯微鏡下觀察到，無論是經(jīng)正常糖外泌體刺激，還是高糖外泌體刺激，THP-1巨噬細(xì)胞的形態(tài)與空白組相比，均發(fā)生了改變。由原本的圓形，逐漸長出偽足。在同樣的刺激時長下，高糖外泌體刺激組的形態(tài)改變尤為明顯，具有偽足的細(xì)胞數(shù)明顯多于正常糖外泌體刺激組。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Mechanisms of the alternative activation of macrophages and non-coding RNAs in the development of radiation-induced lung fibrosis[J]. Nadire Duru,Benjamin Wolfson,Qun Zhou.  World Journal of Biological Chemistry. 2016(04)
[2]CD97 promotes gastric cancer cell proliferation and invasion through exosome-mediated MAPK signaling pathway[J]. Chao Li,Da-Ren Liu,Guo-Gang Li,Hou-Hong Wang,Xiao-Wen Li,Wei Zhang,Yu-Lian Wu,Li Chen.  World Journal of Gastroenterology. 2015(20)



本文編號：2946985