為了研究免疫性不育的相關機制,本課題小組在前期工作中應用免疫共沉淀結合液相色譜串聯(lián)質譜技術,篩選與不育相關的精子膜蛋白,通過生物信息軟件對其進行分析,篩選出15種與不育相關的精子膜蛋白。我們對其中一種蛋白:載脂蛋白A1（Apolipoprotein A1,APOA1）進行分析,研究其在精子中的定位及相關功能。收集來自中國人民解放軍總醫(yī)院健康查體男性精液標本26例。采用PCR技術和免疫印跡技術從分子和蛋白水平檢測APOA1的存在,并采用免疫熒光共聚焦顯微鏡觀察APOA1在人精子中的定位。設空白對照組、兔多克隆抗體IgG組和10、20和40μg/ml的APOA1抗體處理精液標本,37℃溫箱孵育精子1、2和3 h后,通過精液分析儀觀察精子前向運動變化,AnnexinⅤ檢測精子的凋亡率和JC法檢測精子線粒體膜電位變化。40μg/ml的IgG抗體和APOA1抗體分別孵育小鼠精子1h后,進行小鼠體外受精實驗,觀察兩組受精率的差異。收集不同活力的精液標本83例,采用流式細胞儀分析精子中APOA1含量百分比,統(tǒng)計學軟件分析其與精子活力的相關性。精子中存在APOA1的mRNA,其擴增片段大小為190bp... 

【文章來源】：河北北方學院河北省

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
英文縮寫
前言
材料與方法
結果
附圖
附表
討論
結論
參考文獻
綜述 精子膜中膽固醇調節(jié)相關機制研究進展
    參考文獻
致謝
個人簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
[1]免疫共沉淀聯(lián)合液相色譜串聯(lián)質譜技術應用于精子膜蛋白篩選[J]. 梁爽,向代軍,王紅霞,馬駿龍,薛丹丹,劉培培,劉萍,姜文燦,苑曉舟,李新軍,葛素君,王成彬.  中華檢驗醫(yī)學雜志. 2017 (04)
[2]High-density lipoprotein and atherosclerosis: Roles of lipid transporters[J]. Yoshinari Uehara,Keijiro Saku.  World Journal of Cardiology. 2014(10)



本文編號：2931801