本文關(guān)鍵詞：usp22在腎癌中的表達(dá)及臨床意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的研究泛素特異肽酶22(ubiquitin specific peptidase 22)在腎腫瘤發(fā)生時(shí)其在腫瘤組織及對(duì)應(yīng)癌旁組織(距離腎腫瘤"g2CM)中的表達(dá)情況,并分析癌組織和癌旁組織中USP22的表達(dá)差異情況,結(jié)合臨床病理資料,探討其可能存在的因果關(guān)系,進(jìn)而得出相關(guān)性意義。方法分析收集自2012年7月至2013年12月廈門(mén)大學(xué)附屬第一醫(yī)院泌尿外科腎癌根治手術(shù)切除的腫瘤標(biāo)本59例,手術(shù)后病理回報(bào)確認(rèn)惡性程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況以及病理分級(jí)等病理臨床數(shù)據(jù)。癌旁組織以及對(duì)應(yīng)的癌組織各59例,其中癌旁組織取材于癌組織遠(yuǎn)端("g2CM)的癌旁腎組織,而癌組織則取材于未發(fā)生壞死的癌組織部分,癌組織是肉眼明顯可分辨的,其中男性患者40人,女性患者19人,年齡約在30-91歲之間,平均58.2歲,而癌旁組織則是遠(yuǎn)離腫瘤的切緣�；颊咴诮邮苣I癌根治手術(shù)前均未接受任何放療或者化療。在59例腎腫瘤標(biāo)本中,腎透明細(xì)胞癌占主要。用Trizol抽提其中20例患者癌組織及相應(yīng)癌旁組織總RNA,經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄及合成特異性引物行實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)不同病例USP22的基因表達(dá);通過(guò)免疫組織化學(xué)(二步法)法檢測(cè)59例病例標(biāo)本的USP22蛋白表達(dá)細(xì)胞定位以及蛋白表達(dá)量情況;蛋白裂解液裂解其中20例患者對(duì)應(yīng)癌組織及癌旁組織蛋白,進(jìn)行蛋白免疫印跡(Western Blotting)檢測(cè),觀察不同病例標(biāo)本的數(shù)據(jù)差異并與臨床資料相結(jié)合,進(jìn)行相關(guān)分析,對(duì)比分析癌組織與癌旁組織USP22表達(dá)水平的差異。結(jié)果在59例腎腫瘤標(biāo)本中,腎透明細(xì)胞癌占51例(86.4%),乳頭狀細(xì)胞癌占3例(5.1%),嫌色細(xì)胞癌1例(1.7%),梭形細(xì)胞癌1例(1.7%),腎上皮樣血管平滑肌脂肪瘤1例(1.7%),嗜酸細(xì)胞腺瘤2例(3.4%)。經(jīng)檢測(cè),在59例腫瘤標(biāo)本中,免疫組化結(jié)果顯示,癌旁組織組的陽(yáng)性表達(dá)率高達(dá)93.2%,蛋白主要定位于胞質(zhì)。癌組織的蛋白表達(dá)陽(yáng)性率為47.5%,且表達(dá)強(qiáng)度較癌旁組織弱,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其和Western Blotting、以及RT-PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果均一致,癌組織中的蛋白及m RNA的表達(dá)量與癌旁組織("g2CM)相比,未見(jiàn)上升,且與癌旁組織USP22的表達(dá)相比,其表達(dá)相對(duì)較少,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與目前文獻(xiàn)報(bào)道的USP22在人類(lèi)腫瘤發(fā)生時(shí)其表達(dá)量上升的實(shí)驗(yàn)結(jié)果不相符。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示,在腎癌(透明細(xì)胞癌為主)發(fā)生時(shí),USP22的表達(dá)并未明顯升高,相反的是,相較于癌旁組織(距離腎腫瘤"g2CM)其表達(dá)量下降,結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論USP22在腎癌(透明細(xì)胞癌為主)發(fā)生時(shí),其表達(dá)量并未較癌旁組織(距離腎腫瘤"g2CM)升高。泛素特異肽酶22(USP22)視為一種潛在的腫瘤干細(xì)胞標(biāo)記物,在人類(lèi)許多腫瘤發(fā)生時(shí)其表達(dá)量會(huì)增加相應(yīng)增加,可能上調(diào)了腫瘤組織中的某些腫瘤相關(guān)基因的,從而引起正常細(xì)胞發(fā)生癌變,但本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在腎腫瘤發(fā)生時(shí),未檢測(cè)到USP22的表達(dá)增高,鑒于其機(jī)制尚不清楚,需要進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證。
【關(guān)鍵詞】：腎腫瘤 泛素特異肽酶22 免疫組織化學(xué) 實(shí)時(shí)定量PCR
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R737.11
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-16
• 1.1 USP22的發(fā)現(xiàn)及其分子結(jié)構(gòu)9-10
• 1.2 USP22參與的基因轉(zhuǎn)導(dǎo)及其調(diào)節(jié)10-11
• 1.3 USP22與人類(lèi)腫瘤11-13
• 1.4 USP22與泌尿系統(tǒng)腫瘤13
• 1.5 腎腫瘤的病因13-14
• 1.6 本論文的思路、目的和意義14-16
• 材料與方法16-29
• 2.1 主要儀器16
• 2.2 生物材料16
• 2.3 主要試劑來(lái)源16-17
• 2.4 主要試劑配制17-19
• 2.5 實(shí)驗(yàn)方法19-28
• 2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法28-29
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-44
• 3.1 總RNA的提取，逆轉(zhuǎn)錄及RT-PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-34
• 3.2 免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果34-40
• 3.3 免疫印跡（western blotting）實(shí)驗(yàn)結(jié)果40-44
• 討論44-48
• 結(jié)論48-49
• 參考文獻(xiàn)49-53
• 文獻(xiàn)綜述53-62
• 參考文獻(xiàn)59-62
• 致謝62-63

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 魏卓;腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物usp22在人膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)及臨床意義[D];華中科技大學(xué);2011年

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本文編號(hào)：292609