目的觀察轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（TGF-β1）對(duì)CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α（C/EBPα）、過氧化物酶增殖物激活受體γ（PPARγ）核轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)的影響,探討C/EBPα在TGF-β1致腎間質(zhì)纖維化過程中的表達(dá)及其機(jī)制。方法體外培養(yǎng)人腎小管上皮細(xì)胞（HK-2）,利用TGF-β1分別在不同質(zhì)量濃度（5和10 ng/m L）和不同時(shí)間點(diǎn)（0、4、12、24 h）刺激HK-2細(xì)胞,收集細(xì)胞總RNA和蛋白（核蛋白和總蛋白）以及細(xì)胞上清液。應(yīng)用realtime PCR法和Western blotting檢測(cè)C/EBPα和核轉(zhuǎn)錄因子PPARγ以及上皮細(xì)胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）相關(guān)蛋白α-SMA、E-cadherin的表達(dá)變化;ELISA方法檢測(cè)細(xì)胞上清液中單核細(xì)胞趨化蛋白1（MCP-1）的表達(dá)水平。結(jié)果 TGF-β1（5 ng/m L）刺激HK-2細(xì)胞24 h后C/EBPα蛋白與PPARγ變化一致,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;E-cadherin表達(dá)減少。TGF-β1（10 ng/m L）分別刺激0、4、12、24 h后,核蛋白中C/EBPα在12 h時(shí)表達(dá)明顯降低,PPARγ在4 h表達(dá)... 

【文章來源】：上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2015年09期 北大核心

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TGF-β1(5ng/mL)刺激對(duì)HK-2總蛋白中E-cadherin、C/EBPα、α-SMA表達(dá)的影響

TGF-β1(10ng/mL)刺激對(duì)C/EBPα、PPAＲγ及E-cadherin

JOUＲNALOFSHANGHAIJIAOTONGUNIVEＲSITYMEDICALSCIENCE|Vol．35No．9Sep．2015杜云蕾，等．轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1對(duì)腎小管上皮細(xì)胞C/EBPα及相關(guān)核轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)的影響24h后，ELISA法檢測(cè)上清中MCP-1蛋白表達(dá)水平。結(jié)果顯示:MCP-1在12、24h時(shí)分別升高6倍和10.67倍;4h與0h的表達(dá)量比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)(圖4)。注:①P＜0.05與0h比較。圖3TGF-β1(10ng/mL)對(duì)核蛋白C/EBPα、PPAＲγ表達(dá)的影響Fig3EffectofstimulationbyTGF-β1(10ng/mL)onexpressionsofnucleoproteinsC/EBPαandPPAＲγ注:①P＜0.05，②P＜0.01與0h比較。圖4TGF-β1(10ng/mL)誘導(dǎo)后HK-2細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的MCP-1蛋白表達(dá)Fig4ProteinexpressionofMCP-1insupernatantafterHK-2cellsbeinginducedbyTGF-β1(10ng/mL)3討論慢性腎臟病(chronickidneydisease，CKD)進(jìn)展為終末期腎臟病，主要是由于腎臟皮質(zhì)結(jié)構(gòu)的破壞即纖維化導(dǎo)致。間質(zhì)的病變即纖維化又在腎臟纖維化過程中起著重要的作用［3］，其病變程度是預(yù)示CKD病情的重要指標(biāo)［4］。間質(zhì)纖維化的發(fā)生是一系列細(xì)胞和細(xì)胞因子共同參與的反應(yīng)。其過程包括腎小管上皮細(xì)胞壞死、凋亡、功能的喪失、上皮細(xì)胞－間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymaltransition，EMT)，以及間質(zhì)大量炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)及炎癥反應(yīng)的參與［3］。C/EBPs是一類鋅指結(jié)構(gòu)蛋白，都含有堿性亮氨酸拉鏈區(qū)［5］。首次以轉(zhuǎn)錄因子被發(fā)現(xiàn)，C/EBPα轉(zhuǎn)錄翻譯為p42和p30兩種蛋白質(zhì)，根據(jù)在組織中的需要兩種蛋白分別發(fā)揮作用［6］。在肝臟、肺臟尤其是脂肪組織中高表達(dá)［6］，在肝臟和肺臟腫瘤中可以通過抑制增殖促進(jìn)分化，抑制腫瘤的進(jìn)展［7］。C/EBPα在EMT中的作用機(jī)制，即對(duì)轉(zhuǎn)分化的作用，研究較少。其在脂肪組織中


本文編號(hào)：2917863