研究背景與目的:腎細胞癌（renal cell carcinoma,RCC）的發(fā)病率近年來呈快速增長的趨勢,已嚴重威脅人類的健康。幾乎所有腎細胞癌對化療和放療不敏感,而近來靶向治療的興起,為治療腎細胞癌開啟了全新的道路。長鏈非編碼RNA（Longnoncoding RNAs,LncRNAs）可通過多種機制廣泛參與基因表達的調控。最近發(fā)現的一種新的非常保守的長鏈非編碼RNA THOR與惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展相關。本文研究了 THOR在腎細胞癌細胞中的表達及其生物學功能,并探討其可能的機制,以期為尋找新的治療靶點提供理論依據。研究方法和內容:1.qPCR檢測THOR在人腎細胞癌組織、腎細胞癌細胞株（786-0、A498、ACHN及原代人腎細胞癌細胞）的表達,并檢測THOR在癌旁腎組織、HK-2和原代人腎上皮細胞中的表達情況。2.針對786-0細胞株,分別運用siRNA敲減、CRISPR/Cas9敲除THOR的表達后,qPCR檢測THOR;細胞計數檢測細胞生長;MTT法檢測細胞存活;克隆形成試驗、BrdU ELISA法檢測細胞增殖。針對原代人腎細胞癌細胞,HK-2和原代人腎上皮細胞,運用siRN... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數】：115 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１?ＬｎｃＲＮＡＴＨＯＲ在腎癌組織與癌旁組織中的表達情況（＊ｐ＜０．０５）??Ｆｉｇｕｒｅ?１?－１?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＬｎｃＲＮＡ?ＴＨＯＲ?ｉｎ?ｒｅｎａｌ?ｃｅｌｌ?ｃａｒｃｉｎｏｍａ?ａｎｄ?ａｄｊａｃｅｎｔ?ｔｉｓｓｕｅｓ?（＊ｐ＜０．０５）??

Ｎ：?Ｓｕｒｒｏｕｄｉｎｇ?ｒｅｎａｌ?ｔｉｓｓｕｅｓ??Ｔ：?ＲＣＣ?Ｔｕｍｏｒ?ｔｉｓｓｕｅｓ??圖１－１?ＬｎｃＲＮＡＴＨＯＲ在腎癌組織與癌旁組織中的表達情況（＊ｐ＜０．０５）??Ｆｉｇｕｒｅ?１?－１?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＬｎｃＲＮＡ?ＴＨＯＲ?ｉｎ?ｒｅｎａｌ?ｃｅｌｌ?ｃａｒｃｉｎｏｍａ?ａｎｄ?ａｄｊａｃｅｎｔ?ｔｉｓｓｕｅｓ?（＊ｐ＜０．０５）??１．２．２?ＬｎｃＲＮＡＴＨＯＲ在不同細胞株中的表達情況??觀察到ＬｎｃＲＮＡＴＨＯＲ在人腎細胞癌組織中具有特異性表達后，我們接下??來檢測腎細胞癌細胞中的ＬｎｃＲＮＡＴＨＯＲ表達情況。結果顯示在腎小管上皮細??胞株ＨＫ－２?（“ＨＫ－２”）及原代人腎小管上皮細胞（“Ｅｐｉ”）中未檢測到ＬｎｃＲＮＡ??ＴＨＯＲ表達。在３種腎細胞癌細胞株（７８６－０，?Ａ４９８和ＡＣＨＮ）中ＬｎｃＲＮＡＴＨＯＲ??有表達，其中在７８６－０細胞系中表達量相對較高，在２種不同原代人腎細胞癌??細胞（“ＲＣＣ１”和“ＲＣＣ２”）中１＾１＾人１１１０１１也有表達，上述各細胞株與１？：－２??比較差異均具有統(tǒng)計學意義（＊ｐ＜０．０５）。（圖１－２）??２３??

計學意義（＊ｐ＜０．０５）。其中ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９編輯作用后細胞生長能力受抑制程度最??高。無意義轉染對照細胞（ｓｉ－Ｃ）與未轉染的親代對照細胞（Ｐａｒｅｎｔａｌ）相比，培??養(yǎng)第９６小時時活細胞計數值無明顯差異。（圖２－２）??３７??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Long Non-coding RNA MEG3 Induces Renal Cell Carcinoma Cells Apoptosis by Activating the Mitochondrial Pathway[J]. 王淼,黃韜,羅剛,黃超,肖行遠,汪良,蔣國松,曾甫清.  Journal of Huazhong University of Science and Technology(medical Sciences). 2015(04)
[2]Cancer statistics: updated cancer burden in China[J]. Wanqing Chen.  Chinese Journal of Cancer Research. 2015(01)



本文編號：2900204