本文關鍵詞：不明原因不育癥患者精子超微結構的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:以不明原因不育癥患者精液精子為研究材料,利用透射電鏡觀察其精子超微結構的畸變,探討其超微結構的畸變與男性不育之間的關系,比較常規(guī)電鏡包埋的材料與僅用戊二醛固定材料超微結構下頭部空泡的的差異并分析其物質組成。方法:實驗一:研究對象為結婚2年,女方生殖系統(tǒng)功能正常,原因不明不育癥患者8例和結婚1年孕育有孩子的正常生育男性3例。研究對象在禁欲3-7天后,于室溫自行按摩取精。待精液自動液化后,一部分緩慢注入離心管,以650g離心10min,棄去上層精漿,沉淀精子用瓊脂糖進行預包埋,戊二醛固定1h后,PBS(pH=7.2)漂洗3次(10min/次),鋨酸固定1h,然后用Epon812環(huán)氧樹脂包埋,超薄切片用醋酸鈾-檸檬酸鉛雙重染色,透射電子顯微鏡觀察。主要觀察精子的頂體、細胞核、線粒體和微管等超微結構改變。實驗二:研究對象同實驗一。利用透射電鏡對8例不明原因不育癥患者和3例正常生育男性精液精子常規(guī)處理的電鏡材料與僅用戊二醛固定和醋酸鈾染色處理的電鏡材料進行對比研究,對精子頭部空泡、細胞核、頂體等超微結構進行觀察,分析精子頭部空泡的物質組成。結果:1、透射電鏡觀察,正常精子的質膜和頂體膜結構完整清晰,精子核呈梨狀,核染色質電子密度均勻一致,精子頭部無或有少量空泡,尾部線粒體大小形態(tài)一致,排列規(guī)律,精子尾部微管9+2結構完好。2、不育患者精子頭部形態(tài)異常、頭部空泡多發(fā),頂體超微結構產生畸變、尾部線粒體數(shù)減少或分布不均、軸絲9+2結構紊亂等。3、超微結構研究表明,不明原因不育患者精子畸形高于正常生育男性,精子頭部空泡多發(fā),空泡中含有脂類、蛋白質類及核酸類物質。結論:不明原因不育癥患者精子存在頂體、精子核、線粒體、微管等超微結構改變,精子頭部空泡增多等。其超微結構異常及過多的精子頭部空泡可能是其不育原因之一,建議不明原因不育患者增加常規(guī)透射電鏡精子檢查項目,條件允許情況下可選擇頭部無或/少或/小空泡精子進行胞漿內形態(tài)學篩選精子注射(Intracytoplasmic Morphologically Selected Sperm Injection,IMSI)輔助生殖技術。精子空泡中存在脂類、蛋白質類及核酸類物質,其來源有待進一步研究。
【關鍵詞】：不明原因不育癥 精子 頭部空泡 超微結構
【學位授予單位】：河北大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R698.2
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 英文縮略詞表9-11
• 第1章 文獻綜述11-20
• 一 研究背景11-12
• 二 研究現(xiàn)狀12-16
• 三 研究目的及意義16-17
• 參考文獻17-20
• 第2章 實驗研究20-36
• 實驗一 不明原因不育癥患者精子超微結構的研究20-27
• 一 實驗材料20-21
• 二 實驗方法和步驟21
• 三 結果21-24
• 四 討論24-26
• 五 結論26-27
• 實驗二 不明原因不育患者精子頭部空泡超微結構研究27-33
• 一 實驗材料27
• 二 實驗方法和步驟27-28
• 三 結果28-31
• 四 討論31-32
• 五 結論32-33
• 參考文獻33-36
• 致謝36-37
• 攻讀碩士學位期間取得的科研成果37

  本文關鍵詞：不明原因不育癥患者精子超微結構的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：284893