目的:以ACHN人腎癌細(xì)胞為研究對象,研究不同濃度及不同作用時間下益氣解毒方藥物血清對ACHN人腎癌細(xì)胞增殖、凋亡及對其Notch信號通路中Jagged1配體mRNA表達(dá)的影響。方法:(1)采用CCK8法觀察高、中、低濃度益氣解毒方藥物血清及空白血清作用ACHN人腎癌細(xì)胞24h、48h、72h后對ACHN人腎癌細(xì)胞的生長抑制影響。(2)利用流式細(xì)胞技術(shù)檢測不同濃度益氣解毒方藥物血清干預(yù)24h后ACHN人腎癌細(xì)胞凋亡情況。(3)應(yīng)用RT-qPCR方法檢測不同濃度益氣解毒方藥物血清作用24h后ACHN細(xì)胞Jagged1基因的相對表達(dá)含量的影響。結(jié)果:(1)益氣解毒方藥物血清對ACHN細(xì)胞的增殖有抑制作用且呈時間及濃度依賴性。(2)益氣解毒方藥物血清可促進(jìn)ACHN細(xì)胞的凋亡呈濃度依賴性。(3)益氣解毒方能夠下調(diào)ACHN細(xì)胞Jagged1基因的相對表達(dá)含量且呈濃度依賴性。結(jié)論:益氣解毒方藥物血清可抑制ACHN人腎癌細(xì)胞的增殖,并誘導(dǎo)凋亡其作用機(jī)制可能與下調(diào)Jagged1配體基因的表達(dá)有關(guān)。
【學(xué)位單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R737.11
【部分圖文】：

CCK-8試劑檢測盒結(jié)果顯示，不同濃度的益氣解毒方藥物血清對ACHN人腎的增殖均有抑制作用，隨著藥物血清濃度增大及作用時間的增加，ACHN人腎的增殖抑制率也隨之增加，其結(jié)果呈濃度及時間依賴性。不同劑量益氣解毒方清組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；各作用時間組之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意0.05）。結(jié)果見圖表4及圖1。表 4 不同濃度益氣解毒方方含藥血清對 ACHN 細(xì)胞的增殖抑制作用（n=3，x±s）低濃度藥物血清組 中濃度藥物血清組 高濃度藥物血清組 空白血清組24h 2.15±1.85 7.72±4.99 12.41±4.32 1.52±1.7648h 4.81±1.35 14.60±3.25 23.74±2.62 1.33±1.3872h 9.92±2.53 24.54±6.65 31.25±3.72 1.36±2.32注：與對照組*P<0.05，＊＊P <0.01

物血清作用 ACHN 細(xì)胞 24 小時后的 mRNA 表達(dá)，結(jié)果顯示 ACHN 人腎癌細(xì)Jagged1 的 mRNA 表達(dá)呈下調(diào)狀態(tài)且呈濃度依賴性，與對照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（＜0.05）。結(jié)果見表 6 及圖 3。表 6 不同濃度益氣解毒方藥物血清作用后 PC-3 細(xì)胞 Notch 信號分子基因相對表達(dá)水平（n=x±s）組別 低濃度藥物血清組 中濃度藥物血清組 高濃度藥物血清組 空白血清組Jagged1 0.701±0.049 0.397±0.061 0.232±0.022 1.015±0.011注：與對照組*P<0.05，＊＊P <0.01

圖 1.Notch 信號通路配體（A）及受體（B）結(jié)構(gòu)Fig1 The structure of Notch ligand(A) and its receptor(B)1.2 Notch 信號通路的激活與傳導(dǎo)Notch 相對于一些其他細(xì)胞信號通路而言結(jié)構(gòu)相對簡單，激活過程中沒有第二信使的參與，因此相比于其他信號通路不能產(chǎn)生級聯(lián)放大的作用。相比于之前２步酶切激活途徑學(xué)說，Notch 信號通路活化的“三步蛋白水解模型”已被廣泛認(rèn)可。Notch 信號通路的激活過程如下（１）Notch 的無效前鏈單體形式在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)合成并經(jīng)胞內(nèi)運(yùn)輸至高爾基體中，在高爾基體中 Notch 的前鏈單體蛋白被 Furin 樣轉(zhuǎn)化酶裂解并分解成相對分子量 180000 的 N 末端胞外亞基和相對分子量 120000 的 C末端跨膜片段，兩者被 Ca2+依賴性的非共價鍵共同結(jié)合為成異源二聚體并被轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞膜上（２）Notch 受體與配體相結(jié)合后 Notch 受體被金屬蛋白酶（ADAM）家
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本文編號：2837576