發(fā)布時(shí)間：2020-10-09 05:32

　　 第一部分番茄紅素抑制人前列腺癌細(xì)胞生長和促進(jìn)凋亡目的:探討番茄紅素在體外對前列腺癌細(xì)胞株LNCaP、PC3和DU145的增殖和凋亡的影響,以期明確番茄紅素對前列腺癌細(xì)胞生長的抑制作用。方法:應(yīng)用CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測番茄紅素在體外抑制前列腺癌細(xì)胞生存能力,應(yīng)用Annexin V/propidium iodide雙染實(shí)驗(yàn)檢測番茄紅素在體外促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞凋亡的能力。應(yīng)用qRT-PCR方法檢測Caspase-3在番茄紅素處理的前列腺癌細(xì)胞中的表達(dá)變化。結(jié)果:在LNCaP、PC3和DU145三種細(xì)胞系中,番茄紅素的治療導(dǎo)致細(xì)胞存活率降低,且呈時(shí)間-濃度依賴性。而不經(jīng)治療的細(xì)胞(給予同體積的THF/BHT溶劑處理)存活率增加。其中在番茄紅素的治療中,LNCaP細(xì)胞表現(xiàn)出最明顯的活性抑制作用。1μM和5μM L番茄紅素處理細(xì)胞能顯著增加細(xì)胞的凋亡水平。0-5μmol/L的番茄紅素對PrEC細(xì)胞未見明顯毒性。番茄紅素(0,處理三種前列腺癌細(xì)胞(LNCaP、PC3和DU145細(xì)胞)后Caspase-3的表達(dá)增高,且呈濃度依賴性。小結(jié):番茄紅素能在體外顯著抑制前列腺癌細(xì)胞的增殖和促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞的凋亡。第二部分番茄紅素降低人前列腺癌細(xì)胞炎癥因子的表達(dá)目的:用番茄紅素處理前列腺癌細(xì)胞,檢測炎性相關(guān)因子的表達(dá),進(jìn)一步探究番茄紅素的抗腫瘤機(jī)制。方法:運(yùn)用Elisa試劑盒檢測番茄紅素處理前列腺癌細(xì)胞后IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α、IL-10、TGF-β的表達(dá)。結(jié)果:番茄紅素能降低前列腺癌細(xì)胞中炎癥因子IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α的表達(dá)和免疫因子IL-10、TGF-β的表達(dá),對正常前列腺細(xì)胞中這些因子的表達(dá)水平無效。小結(jié):番茄紅素通過抗炎作用抑制前列腺癌的發(fā)展。番茄紅素在前列腺癌中還發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)的作用。第三部分番茄紅素提高人前列腺癌異種移植的小鼠的生存能力目的:研究番茄紅素在整體動物上的作用并探究其相關(guān)分子機(jī)制。方法:用前列腺癌細(xì)胞LNCaP、PC3和DU145建立裸鼠前列腺癌異種移植模型,并給予不同濃度的番茄紅素治療,監(jiān)測裸鼠的生存狀態(tài)和生存期,并觀察成瘤體積,并檢測裸鼠血清中相關(guān)炎癥因子的表達(dá)和腫瘤組織中增殖標(biāo)志物Ki67的表達(dá);用TRAMPC2細(xì)胞建立正常免疫應(yīng)答小鼠前列腺癌模型,給予番茄紅素治療,檢測小鼠體內(nèi)Tc1、Th1、Tc17和Th17α以及Treg的蛋白表達(dá);并進(jìn)一步用流式細(xì)胞儀檢測小鼠腫瘤組織中CD56+CD16+(NK免疫細(xì)胞標(biāo)志物)、F4/80+(巨噬細(xì)胞免疫細(xì)胞標(biāo)志物)和CD15+CD16+(中性粒細(xì)胞免疫細(xì)胞標(biāo)志物)的蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:利用異位移植腫瘤技術(shù)在Balb/c雄性小鼠體內(nèi)建立人類前列腺癌模型。未給予番茄紅素治療的小鼠生存率最低,給予番茄紅素治療能使小鼠生存期變長,且番茄紅素治療與小鼠生存期呈正相關(guān)性,高劑量組小鼠生存率最高,三株前列腺癌細(xì)胞接種小鼠結(jié)果一致。LNCaP、PC3和DU145細(xì)胞形成的瘤塊體積隨番茄紅素劑量的增加而減小,而LNCaP細(xì)胞形成的瘤塊體積減小程度和劑量依賴性最大。番茄紅素治療后,小鼠血清中IL-1、IL-6、IL-8和TNFα的表達(dá)與未治療組相比顯著降低。治療組和對照組中Ki67水平的無顯著差異。在具有正常免疫應(yīng)答能力的C57BL/6小鼠左前腿皮下接種TRAMPC2細(xì)胞,番茄紅素灌胃。取瘤塊組織,用ELISA法檢測Tc1、Th1、Tc17和Th17α以及Treg的蛋白表達(dá)。其結(jié)果表明,與未治療的對照組相比,番茄紅素治療使模型小鼠的免疫細(xì)胞增加,而Treg的表達(dá)降低。番茄紅素使CD56+CD16+(NK免疫細(xì)胞標(biāo)志物)、F4/80+(巨噬細(xì)胞免疫細(xì)胞標(biāo)志物)和CD15+CD16+(中性粒細(xì)胞免疫細(xì)胞標(biāo)志物)的蛋白表達(dá)水平升高。小結(jié):番茄紅素在體內(nèi)有效抑制腫瘤的生長,延長腫瘤小鼠的生存期。結(jié)論:1.番茄紅素在體外顯著抑制人前列腺癌細(xì)胞的增殖和促進(jìn)其凋亡。2.番茄紅素通過抗炎作用和免疫調(diào)節(jié)作用抑制人前列腺癌的發(fā)展。3.番茄紅素在體內(nèi)通過抑制炎癥進(jìn)而抑制前列腺癌的進(jìn)展。
【學(xué)位單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R737.25
【部分圖文】：

示：在這三種細(xì)胞系中，番茄紅素的治療導(dǎo)致細(xì)胞存活率降低，且呈時(shí)濃度依賴性。而不經(jīng)治療的細(xì)胞(給予同體積的 THF/BHT 溶劑處理)存活增加。其中在番茄紅素的治療中，LNCaP 細(xì)胞表現(xiàn)出最明顯的活性抑制用。我們還發(fā)現(xiàn)，1 μM 和 5 μM 番茄紅素處理細(xì)胞能顯著增加細(xì)胞的凋水平，結(jié)果見圖 1B，與細(xì)胞存活率減少的結(jié)果相一致。

圖 2 番茄紅素對前列腺癌病人來源的培養(yǎng)細(xì)胞存活及凋亡的影響Fig. 2 Effect of lycopene on the survival and apoptosis of cultured cells fprostate cancer patients. (a) The cell survival rate was determined by CCK-8(b) AnnexinV/propidium iodide double staining was used to detect the apoptlevel. All data were compared with the control group and expressed percentage.** P < 0.01,*** P < 0.001 vs the control.2. PrEC 中番茄紅素的毒性評估作為對照，我們也評估了在正常前列腺細(xì)胞系 PrEC 中番茄紅素的性，我們用 0-5 μM 的番茄紅素處理 PrEC 細(xì)胞，處理后監(jiān)測 72 小時(shí)，在24，48，72 小時(shí)分別檢測細(xì)胞活性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，0-5 μmol/L 的番茄素對 PrEC 細(xì)胞未見明顯毒性，如圖 3 所示。該結(jié)果表明：番茄紅素對前腺癌細(xì)胞有殺滅作用，而對正常的前列腺細(xì)胞無影響。

4 Caspase-3 在前列腺癌細(xì)胞中的表達(dá)變 of caspase-3 in prostate cancer cells. ** P <討 論導(dǎo)致癌癥死亡的第五大原因。前列腺癌是性腫瘤。前列腺癌的早期癥狀不明顯，早晚期，前列腺癌可能由復(fù)雜的遺傳、環(huán)境方法有手術(shù)、內(nèi)分泌治療和化療，70 多了前列腺癌對雄激素清除的反應(yīng)。他們證移性前列腺癌的進(jìn)展，并且在沒有雄激素胞凋亡[9；10]。目前常用的抑制雄激素的方激素與受體的結(jié)合。手術(shù)外科去勢（切除

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2 ;番茄紅素的保健功效[J];吉林蔬菜;2019年02期

3 ;夏吃西瓜 降壓護(hù)心[J];心血管病防治知識(科普版);2017年07期

4 ;番茄紅素:實(shí)現(xiàn)在面包酵母中的生物合成[J];科學(xué)家;2017年05期

5 ;番茄紅素助男性增精養(yǎng)護(hù)前列腺[J];科學(xué)大觀園;2017年09期

6 張英;;早餐食用番茄可減輕皮膚干癢[J];新長征(黨建版);2017年06期

7 鐘凱;;番茄應(yīng)該生吃還是熟吃?[J];益壽寶典;2017年15期

8 ;紅色食物降低前列腺癌風(fēng)險(xiǎn)[J];祝您健康;2017年06期

9 ;類胡蘿卜素與人體健康[J];飲食科學(xué);2017年08期

10 張瓊;;研究證明:補(bǔ)充番茄紅素 遠(yuǎn)離疾病保長壽[J];中老年保健;2015年06期

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1 王s

本文編號：2833289