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探討FetuinA、MGP通過調(diào)控NF-KB通路對磷酸鈣晶體誘導(dǎo)HK-2表達(dá)及釋放MCP-1、TGF-β的抑制作用

發(fā)布時間:2020-09-25 15:02
   目的: 探討FetuinA. MGP通過抑制NF-KB通路對磷酸鈣晶體誘導(dǎo)HK-2表達(dá)及釋放MCP-1、TGF-β的調(diào)控作用。方法:1、采用100ug/mlCaP刺激HK-2,于刺激后1、3、6、24、48、72h提取各組細(xì)胞總RNA, RT-PCR分別檢測細(xì)胞于(1、3、6h)NF-KB mRNA及MCP-1mRNA、(24、48、72h)TGF-βmRNA表達(dá)水平。2、分別采用100ug/mlCaP+50mmol/L PDTC、100ug/mlCaP+100mmol/LPDTC. 100ug/mlCaP+200mmol/L PDTC刺激HK-2,于(6、72h)提取細(xì)胞總RNA,RT-PCR分別檢測細(xì)胞于6h MCP-lmRNA 及 72hTGF-βmRNA表達(dá)水平。3.分 別 采 用100ug/mlCaP+1000ng/mlFetuinA 100ug/mlCaP+2500ng/mlFetuinA、100ug/mlCaP+5000ng/mlFetuinA、 100ug/mlCaP+2000ng/mlMGP.100ug/mlCaP+4000ng/mlMGP 100ug/mlCaP+6000ng/mlMGP刺激HK-2,于刺激后3h提取各組細(xì)胞總RNA, RT-PCR分別檢測細(xì)胞于3h NF-KB mRNA表達(dá)水平。4、采用100ug/ml CaP刺激HK-2,于刺激后1、3、6、24、48、72h收集細(xì)胞培養(yǎng)液;分別采用100ug/ml CaP+50mmol/L PDTC、100ug/ml CaP+100mmol/L PDTC、100ug/ml CaP+200mmol/L PDTC刺激HK-2,于刺激后6、72h收集細(xì)胞培養(yǎng)液,ELISA法檢測MCP-1、TGF-β含量。結(jié)果:1、100ug/ml CaP HK-2組,NF-KBmRNA、MCP-1mRNA、TGF-βmRNA表達(dá)均高于正常對照HK-2,其中NF-KBmRNA表達(dá)于3h達(dá)高峰,MCP-1mRNA表達(dá)于6h達(dá)高峰,TGF-βmRNA表達(dá)于72h達(dá)高峰,與對照組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2、100ug/mlCaP+50mmol/L PDTC、100ug/mlCaP+100mmol/L PDTC、100ug/mlCaP+200mmol/L PDTC組HK-2 MCP-1mRNA、TGF-βRNA表達(dá)均低于100ug/mlCaP組,與對照組比較, 差異有統(tǒng)計學(xué)意義 (P0.05)。 3、100ug/mlCaP+1000ng/mlFetuinA、100ug/mlCaP+2500ng/mlFetuinA、 100ug/mlCaP+5000ng/mlFetuinA、100ug/mlCaP+2000ng/mlMGP、 100ug/ml CaP+4000ng/mlMGP、100ug/mlCaP+6000ng/mlMGP組HK-2NF-KB mRNA表達(dá)均低于100ug/mlCaP組,與對照組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。4、100ug/ml CaP HK-2組細(xì)胞培養(yǎng)液上清MCP-1、TGF-β含量均高于正常對照HK-2,與對照組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。100ug/ml CaP+50mmol/L PDTC、100ug/mlCaP+100mmol/L PDTC、100ug/ml CaP+200mmol/L PDTC組細(xì)胞培養(yǎng)液上清MCP-1、TGF-β含量均低于100ug/ml CaP組,與對照組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.磷酸鈣作用于腎小管上皮細(xì)胞誘導(dǎo)其釋放MCP-1、TGF-β炎癥介質(zhì),兩者可能在Randall斑發(fā)生及發(fā)展中起到重要的作用。2.磷酸鈣晶體刺激腎小管上皮細(xì)胞釋放炎癥介質(zhì)MCP-1、TGF-β可能機制是通過激活NF-KB通路。3.FetuinA、MGP通過調(diào)控NF-KB通路,抑制MCP-1、TGF-β表達(dá)及釋放,減輕腎臟炎癥損傷,這可能是FetuinA、MGP參與腎結(jié)石形成機制之一。
【學(xué)位單位】:廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位年份】:2015
【中圖分類】:R691.4
【文章目錄】:
個人簡歷
部分中英文對照
中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
全文小結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:2826716

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