背景和目的神經(jīng)源性膀胱(neurogenic bladder,NB)是神經(jīng)源性膀胱尿道功能障礙的簡(jiǎn)稱,由神經(jīng)本身的病變或者外傷、手術(shù)等對(duì)神經(jīng)損害所引起,臨床表現(xiàn)特征為膀胱逼尿肌或(和)尿道括約肌的功能障礙導(dǎo)致儲(chǔ)尿和排尿異常。NB患者晚期可因NB所致的泌尿系感染和腎功能衰竭而死亡。NB臨床多見,但發(fā)病機(jī)制不完全清楚,治療困難。在過(guò)去的幾十年中,很多方法用來(lái)治療NB,這些方法可在一定程度上改善膀胱的排尿和儲(chǔ)尿功能,但不能從根本上恢復(fù)膀胱神經(jīng)支配,臨床效果不佳。目前唯一有效的在臨床應(yīng)用的治療NB的方法是骶神經(jīng)調(diào)節(jié)術(shù),但也需要更多的臨床病例來(lái)驗(yàn)證。2001年Xiao教授首先提出了神經(jīng)吻合治療脊髓損傷和脊柱裂等引起的NB,并且報(bào)道其方法有一定的效果,后來(lái)國(guó)外的Chang和Havton教授也報(bào)道了神經(jīng)吻合治療NB有一定效果。2011年,在這方面研究較多的國(guó)內(nèi)專家侯春林教授通過(guò)不同的神經(jīng)吻合方式證實(shí)了神經(jīng)吻合治療NB有一定的效果。但是,2015年Rasmussen教授根據(jù)自己的研究發(fā)現(xiàn),神經(jīng)吻合對(duì)于治療脊髓損傷引起的下尿路功能障礙沒有作用。由于神經(jīng)吻合治療NB效果仍有爭(zhēng)議,從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)行深入研究神經(jīng)吻合是否能夠治療NB很有必要。2012年Gao通過(guò)建立腰骶部脊神經(jīng)離斷神經(jīng)源性膀胱模型并進(jìn)行神經(jīng)端側(cè)吻合,通過(guò)逆行神經(jīng)示蹤和電刺激等技術(shù)證明神經(jīng)端側(cè)吻合在大鼠NB模型中有一定的治療作用。但是其沒有進(jìn)行尿動(dòng)力學(xué)檢查,因此不能充分證明神經(jīng)端側(cè)吻合對(duì)于恢復(fù)NB大鼠膀胱功能的作用。因此,對(duì)神經(jīng)端側(cè)吻合后的大鼠進(jìn)行尿動(dòng)力學(xué)檢查和膀胱形態(tài)學(xué)檢測(cè),來(lái)研究神經(jīng)端側(cè)吻合對(duì)于腰骶部脊神經(jīng)離斷引起的NB大鼠膀胱功能及形態(tài)的恢復(fù)很有必要。導(dǎo)致神經(jīng)吻合效果不好的一個(gè)重要因素是神經(jīng)的生長(zhǎng)速度慢,從損傷到去神經(jīng)的靶器官實(shí)現(xiàn)神經(jīng)重建所需要的時(shí)間的長(zhǎng)短對(duì)于靶器官功能恢復(fù)有重要影響。因此開發(fā)出促進(jìn)神經(jīng)再生的藥物將會(huì)有很大的幫助。神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子家族的其他成員對(duì)神經(jīng)元的存活和分化至關(guān)重要,但其不利的藥代動(dòng)力學(xué)(必須通過(guò)注射方式給藥和腦滲透性差)以及非特異性作用和毒性限制了其在臨床上的全身應(yīng)用。能夠增強(qiáng)神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子信號(hào)傳導(dǎo)以及克服這些障礙的化合物可能顯示更大的治療潛能。他克莫司(tacrolimus,FK506)是一種廣泛應(yīng)用的免疫抑制劑,國(guó)內(nèi)外學(xué)者在臨床應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)FK506不僅有免疫抑制的作用,還具有神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)和神經(jīng)保護(hù)作用。但是,當(dāng)進(jìn)行自體神經(jīng)吻合或只需要發(fā)揮神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)和神經(jīng)保護(hù)作用時(shí),免疫抑制不可避免地成了副作用。非免疫抑制神經(jīng)免疫親和素配體FK1706是免疫抑制神經(jīng)免疫親和素配體FK506的一種衍生物,與FK506相比,免疫抑制作用減弱,至少在發(fā)揮神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)作用的劑量下沒有明顯的免疫抑制作用。本團(tuán)隊(duì)前期工作已經(jīng)初步證實(shí)FK1706有促進(jìn)NB大鼠神經(jīng)吻合后神經(jīng)生長(zhǎng)的效果。建立NB大鼠模型,通過(guò)尿動(dòng)力學(xué)和膀胱形態(tài)學(xué)測(cè)定來(lái)進(jìn)一步了解FK1706是否能通過(guò)促進(jìn)神經(jīng)端側(cè)吻合后神經(jīng)再生來(lái)改善NB大鼠膀胱功能和形態(tài)很有必要。此外,神經(jīng)免疫親和素配體FK1706促進(jìn)神經(jīng)軸突再生的作用機(jī)制目前仍不明確。一種假說(shuō)認(rèn)為FK1706通過(guò)與FKBP12結(jié)合形成FKBP復(fù)合物抑制鈣調(diào)磷酸酶的活性,鈣調(diào)磷酸酶可以抑制生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43(Growth-Associated-Protein43,GAP43)的表達(dá)和活性,而GAP43是神經(jīng)元生長(zhǎng)錐內(nèi)磷酸蛋白的主要成分,是外周神經(jīng)再生時(shí)位于生長(zhǎng)錐內(nèi)最具活性的一類蛋白,在外周神經(jīng)的再生中具有重要的作用。FK1706通過(guò)抑制鈣調(diào)磷酸酶而促進(jìn)GAP43的表達(dá)和活性,從而發(fā)揮促進(jìn)神經(jīng)生長(zhǎng)的作用。另一種假說(shuō)認(rèn)為FK1706促進(jìn)神經(jīng)再生的作用和FKBP12無(wú)關(guān),而是通過(guò)與神經(jīng)元胞膜上的FKBP52結(jié)合促使熱休克蛋白90(Heat shock protein 90,Hsp90)從類固醇受體復(fù)合物(FKBP52/Hsp90/p23/SR)中解離,解離的Hsp90通過(guò)調(diào)節(jié)NGF發(fā)揮作用的Ras/Raf/MEK/ERK信號(hào)通路來(lái)增強(qiáng)NGF促進(jìn)神經(jīng)再生的作用,另外解離出的p23也可能促進(jìn)神經(jīng)再生。Gold對(duì)敲除FKBP12的小鼠海馬細(xì)胞原代培養(yǎng)發(fā)現(xiàn),神經(jīng)免疫親和素配體仍然有增強(qiáng)NGF促進(jìn)神經(jīng)再生的作用,說(shuō)明FKBP12對(duì)于免疫親和素配體促進(jìn)神經(jīng)再生不是必須的。Gold認(rèn)為是FKBP52而非FKBP12介導(dǎo)了免疫親和素配體的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)作用,并且通過(guò)將FKBP52抗體作用于加入免疫親和素配體的SH-S Y5Y細(xì)胞培養(yǎng)基,發(fā)現(xiàn)FKBP52抗體能夠阻斷免疫親和素配體增強(qiáng)NGF促進(jìn)神經(jīng)增長(zhǎng)作用,說(shuō)明FKBP52才是免疫親和素配體增強(qiáng)NGF促進(jìn)神經(jīng)再生關(guān)鍵。Price研究表明FK1706是通過(guò)增強(qiáng)NGF促進(jìn)神經(jīng)再生發(fā)揮神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)作用的,但是FK1706與FKBP52結(jié)合后如何增強(qiáng)NGF作用,進(jìn)而促進(jìn)神經(jīng)再生目前未知,也就是他們之間的銜接點(diǎn)不明確。因此,要想明確FK1706發(fā)揮神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)作用的具體機(jī)制,研究FK1706與FKBP52結(jié)合后如何促進(jìn)NGF的作用非常必要。因此,本研究的主要目的包括:①建立腰骶部脊神經(jīng)離斷及吻合成年SD大鼠NB模型,并進(jìn)行尿流動(dòng)力學(xué)檢查及膀胱形態(tài)學(xué)檢測(cè),探討神經(jīng)端側(cè)吻合對(duì)NB大鼠膀胱形態(tài)和功能的恢復(fù)作用;②建立腰骶部脊神經(jīng)離斷再吻合成年SD大鼠NB模型,并應(yīng)用FK1706,探討FK1706通過(guò)促進(jìn)端側(cè)吻合后神經(jīng)再生對(duì)NB大鼠膀胱功能和形態(tài)的改善作用;③培養(yǎng)SH-SY5Y細(xì)胞,并給予FK1706、NGF和Geldanamycin等干預(yù),探討FK1706增強(qiáng)NGF促進(jìn)SH-SY5Y細(xì)胞的軸突延長(zhǎng)的機(jī)制。第一部分:成年SD大鼠NB模型的建立及神經(jīng)吻合后膀胱功能及形態(tài)學(xué)研究材料和方法1.50只健康成年雄性SD大鼠,體重(280±20)g,按照隨機(jī)數(shù)字表法分為神經(jīng)端側(cè)吻合組(end-to-side nerve coaptation group,ECG,n=20)、未吻合組(no coaptation group,NCG,n=20)和對(duì)照組(control group,CG,n=10)。麻醉后,打開椎管暴露L3-S1脊髓節(jié)段,分離脊神經(jīng),ECG組切斷左側(cè)L6和S1脊神經(jīng),然后將左側(cè)L6脊神經(jīng)殘端的遠(yuǎn)端在L4水平吻合到左側(cè)L4脊神經(jīng)的側(cè)面;NCG組切斷左側(cè)L6和S1脊神經(jīng),不進(jìn)行神經(jīng)吻合;CG組不進(jìn)行任何處理作為正常對(duì)照。2.術(shù)后4個(gè)月,再次麻醉大鼠,暴露盆神經(jīng)節(jié),用微量注射器將4%熒光金(FluoroGold,FG)注入左側(cè)盆神經(jīng)節(jié)。7天后,對(duì)各組大鼠進(jìn)行膀胱壓力容積測(cè)定、電刺激測(cè)定膀胱壓力變化。壓力測(cè)定后,取膀胱進(jìn)行稱重,之后將膀胱組織置于10%的中性福爾馬林,石蠟包埋,進(jìn)行切片,然后進(jìn)行HE(hematoxylin andeosin,HE)和VG(VanGieson,VG)染色,10%的中性福爾馬林通過(guò)心臟灌注全身,然后取L3-S1的脊髓組織,進(jìn)行冰凍切片。記錄并比較各組大鼠的充盈期最大膀胱測(cè)壓容積、排尿期最大逼尿肌壓力、殘余尿量、膀胱纖維化面積、脊髓組織熒光標(biāo)記細(xì)胞等。3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理分析,計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(χ±s)表示,兩組之間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),三組及三組以上比較采用單因素方差分析。以α = 0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn),P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1.逆行神經(jīng)示蹤:熒光顯微鏡下觀察各組大鼠不同脊髓節(jié)段FG標(biāo)記的神經(jīng)元。ECG大鼠,FG標(biāo)記的神經(jīng)元主要位于L4脊髓節(jié)段,L6和S1脊髓節(jié)段未觀察到FG標(biāo)記的神經(jīng)元;NCG大鼠,L3-S1脊髓節(jié)段均未觀察到FG標(biāo)記的神經(jīng)元;CG大鼠,FG標(biāo)記的神經(jīng)元主要分布在L6和S1脊髓節(jié)段,L4脊髓節(jié)段未觀察到FG標(biāo)記的神經(jīng)元。2.膀胱壓力容積測(cè)定:NCG大鼠和ECG大鼠充盈期最大膀胱測(cè)壓容積、殘余尿量和膀胱順應(yīng)性較CG大鼠明顯增加,但ECG大鼠最大膀胱測(cè)壓容積、殘余尿量及膀胱順應(yīng)性較NCG有明顯改善;CG大鼠和ECG大鼠排尿期最大逼尿肌壓無(wú)明顯差異,但都大于NCG大鼠。電刺激CG大鼠左側(cè)L6脊神經(jīng)前根,引起膀胱收縮并觸發(fā)排尿,平均最大逼尿肌壓為(35.8±3.3)mmHg,電刺激ECG大鼠吻合口近端L4脊神經(jīng)前根,引起膀胱收縮并觸發(fā)排尿,平均最大逼尿肌壓為(18.1±2.2)mmHg,電刺激NCG大鼠L4脊神經(jīng)前根(與ECG大鼠相同部位),膀胱壓力無(wú)明顯變化,也沒有排尿現(xiàn)象發(fā)生。3.膀胱濕重及形態(tài)學(xué)測(cè)定:測(cè)壓后稱取膀胱濕重,發(fā)現(xiàn)ECG和NCG大鼠膀胱濕重較對(duì)照組增加,但ECG大鼠膀胱濕重較NCG輕。取膀胱組織做石蠟切片,然后進(jìn)行HE和VG染色。膀胱HE切片顯示:CG大鼠HE染色顯示正常的上皮和肌層,ECG和NCG大鼠膀胱HE染色顯示肌層紊亂且水腫,但是ECG肌層紊亂和水腫的程度較NCG輕。VG染色顯示:ECG和NCG大鼠膀胱纖維化程度較CG高,但ECG大鼠膀胱纖維化程度較NCG低。第二部分:FK1706對(duì)NB大鼠神經(jīng)吻合后神經(jīng)再生及膀胱形態(tài)功能的研究材料和方法1.50只健康成年雄性SD大鼠,體重(280±20)g。按照隨機(jī)數(shù)字表法分為FK1706+神經(jīng)端側(cè)吻合組(FK1706 + end-to-side nerve coaptation group,FK1706+ECG,n=20)、神經(jīng)端側(cè)吻合組(ECG,n=20)和手術(shù)對(duì)照組(surgical control group,SCG,n=10)FK1706+ECG大鼠麻醉成功后,打開椎管,分離脊神經(jīng),離斷左側(cè)L6和S1脊神經(jīng)前后根,然后將左側(cè)L6前根端側(cè)吻合到左側(cè)L4前根上,術(shù)后連續(xù)8周給予皮下注射FK1706溶液;ECG大鼠的手術(shù)方法和FK1706+ECG大鼠相同,術(shù)后連續(xù)8周注射相同劑量的30%DMSO;SCG大鼠離斷L6后根和S1前后根,作為手術(shù)對(duì)照組,術(shù)后連續(xù)8周注射相同劑量的30%DMSO。2.術(shù)后4個(gè)月,進(jìn)行電刺激膀胱壓力測(cè)定,清醒狀態(tài)下膀胱壓力容積測(cè)定,取膀胱標(biāo)本行HE和VG染色,取節(jié)前盆副交感神經(jīng)行western blot和qPCR檢測(cè)及半薄切片神經(jīng)形態(tài)學(xué)檢測(cè)。記錄并比較各組大鼠的充盈期最大膀胱測(cè)壓容積、排尿期最大逼尿肌壓力、殘余尿量、膀胱纖維化面積、節(jié)前盆副交感神經(jīng)(pelvic parasympathetic nerve,PPN)中神經(jīng)纖維數(shù)量及節(jié)前PPN中神經(jīng)再生相關(guān)蛋白的表達(dá)等。3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理分析,計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(χ±s)表示,兩組之間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),三組及三組以上比較采用單因素方差分析。以α= 0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn),P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1.膀胱壓力容積測(cè)定:FK1706+ECG和ECG大鼠的充盈期最大膀胱測(cè)壓容積、殘余尿量和膀胱順應(yīng)性較SCG大鼠的明顯增加,但是FK1706+ECG大鼠的最大膀胱測(cè)壓容積、殘余尿量和膀胱順應(yīng)性低于ECG大鼠。三組大鼠的排尿期最大逼尿肌收縮壓無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。電刺激SCG大鼠L6VR時(shí),可以觀察到膀胱內(nèi)壓升高,升高值為[(34.6±3.8)mmHg],電刺激L4VR沒有觀察到膀胱壓力變化;電刺激FK1706+ECG和ECG大鼠吻合口近端L4VR時(shí),可以觀察到大鼠膀胱內(nèi)壓升高,升高值分別為[(22.3±2.7)mmHg]和[(17.8±3.1)mmHg]。電刺激后SCG大鼠的膀胱內(nèi)壓升高大于FK1706+ECG大鼠和ECG大鼠,且FK1706+ECG大鼠的膀胱內(nèi)壓升高大于ECG大鼠(P0.001)。2.膀胱濕重及形態(tài)學(xué)測(cè)定:測(cè)壓后稱取膀胱濕重,發(fā)現(xiàn)FK1706+ECG大鼠和ECG大鼠膀胱濕重較SCG組增加,但FK1706+ECG大鼠膀胱濕重較ECG大鼠輕。HE染色顯示:SCG大鼠膀胱組織形態(tài)正常,上皮扁平,肌束排列整齊,肌束間結(jié)締組織緊密;FK1706+ECG和ECG大鼠膀胱肌層排列不規(guī)則,并且有水腫,但FK1706+ECG大鼠相對(duì)較輕。VG染色顯示:FK1706+ECG大鼠和ECG大鼠膀胱纖維化面積明顯大于SCG大鼠膀胱纖維化面積,但是FK1706+ECG大鼠膀胱纖維化程度較ECG大鼠輕。3.大鼠節(jié)前PPN神經(jīng)形態(tài)學(xué)觀察:FK1706+ECG大鼠和ECG大鼠節(jié)前PPN半薄切片中有髓神經(jīng)纖維的數(shù)量都小于SCG大鼠有髓神經(jīng)纖維數(shù)量(717.5 ±29.1)。另外,FK1706+ECG大鼠節(jié)前PPN有髓神經(jīng)纖維數(shù)量(590.4 ±55.6)明顯大于ECG組大鼠有髓神經(jīng)纖維數(shù)量(392.6 ±38.8)。4.神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白的表達(dá)量的變化:曝光后,經(jīng)灰度分析軟件分析,三組大鼠節(jié)前PPN中S100、GAP43和βⅢ微管蛋白三種蛋白在三組中的相對(duì)表達(dá)量均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。其中FK1706+ECG大鼠中三種蛋白的表達(dá)量最高,ECG大鼠次之,而SCG大鼠表達(dá)量最低。5.神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白qPCR結(jié)果:三種軸突再生相關(guān)的標(biāo)記物(S100、GAP43和βⅢ微管蛋白)在三組大鼠中mRNA水平的表達(dá)量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,FK1706+ECG大鼠表達(dá)量最高,ECG大鼠次之,而SCG大鼠表達(dá)量最低。經(jīng)公式2-△△Ct計(jì)算各組大鼠三種標(biāo)記物mRNA表達(dá)量的相對(duì)倍數(shù),結(jié)果顯示FK1706+ECG 的 S100β 是 SCG 的 2.1 倍,ECG 的 S100β 是 SCG 的 1.8 倍;FK1706+ECG 的 GAP43 是 SCG 的 2.2 倍,ECG 的 GAP43 是 SCG 的 1.5 倍;FK1706+ECG的βⅢ微管蛋白是SCG的2.3倍,ECG的βⅢ微管蛋白是SCG的1.9 倍。第三部分:FK1706增強(qiáng)NGF促進(jìn)周圍神經(jīng)軸突再生及機(jī)制的初步實(shí)驗(yàn)研究材料和方法1.培養(yǎng)SH-SY5Y神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,制成單細(xì)胞懸液,調(diào)整細(xì)胞密度為1×105/ml,每孔加入100μl細(xì)胞懸液,均勻鋪在96孔板中,待細(xì)胞貼壁后,按對(duì)照組、NGF(10ng/ml)、FK1706(lnM)+NGF、FK1706+NGF+geldanamycin(10ng/ml)分組處理,每組處理3個(gè)重復(fù),培養(yǎng)24小時(shí),提取蛋白通過(guò)Western blot進(jìn)行p-Raf-1蛋白分析。測(cè)定細(xì)胞軸突長(zhǎng)度:每組處理5個(gè)重復(fù),培養(yǎng)96h后,拍照,測(cè)量細(xì)胞突起,每個(gè)重復(fù)3個(gè)視野。2.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理分析,計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(χ±s)表示,兩組之間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),三組及三組以上比較采用單因素方差分析。以α = 0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn),P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1.為了觀察FK1706增強(qiáng)NGF促進(jìn)SH-SY5Y神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞軸突延長(zhǎng)的作用及初步研究其作用機(jī)制,分別將細(xì)胞進(jìn)行了分組并做了不同的處理。結(jié)果NGF組細(xì)胞突起長(zhǎng)度明顯長(zhǎng)于對(duì)照組細(xì)胞的突起長(zhǎng)度,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。并且FK1706+NGF組細(xì)胞突起長(zhǎng)度又明顯長(zhǎng)于NGF組細(xì)胞的突起長(zhǎng)度,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對(duì)于FK1706+NGF+ Geldanamycin組,細(xì)胞突起長(zhǎng)度比FK1706+NGF組細(xì)胞突起長(zhǎng)度縮短,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.曝光后,經(jīng)灰度分析軟件分析,發(fā)現(xiàn)NGF組p-Raf-1蛋白相對(duì)表達(dá)量明顯較對(duì)照組增加,FK1706+NGF組p-Raf-1蛋白相對(duì)表達(dá)量較NGF組增加,而FK1706+NGF+Geldanamycin 組 p-Raf-1 蛋白相對(duì)表達(dá)量較 FK1706+NGF 組明顯降低。第四部分:結(jié)論通過(guò)上述三部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出如下結(jié)論。1.大鼠L6和S1脊神經(jīng)離斷可以引起神經(jīng)源性膀胱;2.大鼠L4VR和L6VR神經(jīng)端側(cè)吻合可以重建新的神經(jīng)通路,恢復(fù)膀胱的神經(jīng)支配;3.大鼠L4VR和L6VR神經(jīng)端側(cè)吻合可以部分恢復(fù)因腰骶部脊神經(jīng)離斷引起的NB大鼠受損的膀胱形態(tài)和功能;4.大鼠L4VR和L6VR神經(jīng)端側(cè)吻合后應(yīng)用FK1706能夠促進(jìn)神經(jīng)再生;5.FK1706能夠通過(guò)促進(jìn)L6VR和L4VR端側(cè)吻合后神經(jīng)再生來(lái)改善腰骶部脊神經(jīng)離斷引起的NB大鼠受損的膀胱形態(tài)和功能;6.FK1706能夠增強(qiáng)NGF促進(jìn)神經(jīng)再生的作用,且與FK1706和FKBP52結(jié)合后解離的Hsp90與Ras/Raf/MAPK信號(hào)通路中的Raf-1的相互作用有關(guān)。
【學(xué)位單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R694.5
【部分圖文】：

圖１．１實(shí)驗(yàn)分組示意圖和吻合大體圖（Ｘｉｏ）逡逑

危履Ｐ偷慕縞⒓吧窬酖嗆蝦蟀螂墜δ薌靶翁囔а繡常]3?附圖逡逑ｉｔ邋ｉｌｌ逡逑圖１．１實(shí)驗(yàn)分組示意圖和吻合大體圖（Ｘｉｏ）逡逑Ａ：對(duì)照組示意圖；Ｂ：未吻合組示意圖；Ｃ：Ｌ４ＶＲ和Ｌ６ＶＲ端側(cè)吻合組示意圖；ＤN４ＶＲ和逡逑Ｌ６ＶＲ端側(cè)吻合大體圖；Ｅ：邋Ｌ６ＶＲ和Ｌ４ＶＲ端側(cè)吻合四個(gè)月后大體圖。ＤＲ：ｄｏｒｓａｌｒｏｏｔ，后逡逑根；ＶＲ：邋ｖｅｎｔｒａｌ邋ｒｏｏｔ，前根；ＣＧ：邋ｃｏｎｔｒｏｌ邋ｇｒｏｕｐ，對(duì)照組；ＮＣＧ：邋ｎｏ邋ｃｏａｐｔａｔｉｏｎ邋ｇｒｏｕｐ，未吻合逡逑組；ＥＣＧ：邋ｅｎｄ－ｔｏ－ｓｉｄｅ邋ｃｏａｐｔａｔｉｏｎ邋ｇｒｏｕｐ邋端側(cè)吻合組；Ｌ：邋ｌｅｆｔ，左側(cè)；Ｒ：邋ｒｉｇｈｔ，右側(cè)；Ｐ：邋ｐｒｏｘｉｍａｌ，逡逑近端；Ｄ：邋ｄｉｓｔａｌ，遠(yuǎn)端。逡逑－？除坑壓力定逡逑－？~|根力測(cè)定逡逑盆神經(jīng)節(jié)＋逡逑ＥＣＧ—｜邐ｆ注射熒光金逡逑分組邐一邋

本文編號(hào)：2820229