【摘要】：目的:(1)建立合適的水下爆炸沖擊波致兔急性腎損傷(AKI)的爆炸模型。(2)根據(jù)此模型,利用酶標免疫吸附法(ELISA)檢測兔血清中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)、腎損傷因子-1(KIM-1)和基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)三種細胞因子的表達量,同時利用Western blot分析腎組織MMP-9的表達情況,研究這些因子在水下爆炸沖擊波致兔AKI中的意義。方法:(1)40只新西蘭兔隨機分成4組:正常對照組(N1組)、兔距離爆炸源1.8m組、1.0m組和0.5m組,每組10只。麻醉后,以1.0g太安炸藥作為水下爆炸源,分別對三組實驗組進行爆炸。爆炸后進行簡單必要的救治,同時記錄爆炸后兔存活率及生理變化,采用ELISA測定4組不同時間段血清NGAL的濃度,于爆炸后24h取各組腎臟行病理切片檢查。(2)模型建立成功后,選取20只兔,隨機分成正常(N2)組和損傷(I)組,每組10只。以1.0 g太安炸藥作為水下爆炸源,對I組實驗兔進行水下爆炸,爆炸后進行簡單的救治。采用ELISA測定兩組不同時間段血清NGAL、KIM-1和MMP-9的變化,采用Western blot分析法檢測腎組織MMP-9的表達情況。結果:(1)24h內,對照組全部存活,病理示腎小球、腎小管及腎間質結構清晰。1.8m組死亡1只,病理示灶狀出血。1.0m組死亡1只,病理示腎間質內較多出血并伴有炎性細胞浸潤。0.5m組當場死亡1只,致傷后半小時死亡1只,8h后死亡2只,13h后死亡1只,病理示腎間質內可見大量出血并伴有較多炎性細胞浸潤。與對照組相比,爆炸組傷后4h血清中NGAL濃度開始上升(p0.05),24h仍有統(tǒng)計學意義。(2)水下爆炸沖擊波致兔AKI,爆炸后各時間段比較,損傷組血清中NGAL、MMP-9的濃度均顯著高于正常組(P0.01);而2組血清KIM-1爆炸前后比較,差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05),Western blot結果顯示正常對照組實驗兔腎組織幾乎不表達MMP-9,而損傷組MMP-9的表達量明顯增加。結論:(1)兔距爆炸源1.0m處可模擬水下沖擊波效應,具有致死率低,重復性好的特點,是一種穩(wěn)定可靠的水下爆炸致兔腎損傷的實驗模型。(2)血清NGAL、MMP-9可以作為水下爆炸引起AKI的早期監(jiān)測因子。
【學位授予單位】：蚌埠醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R692
【圖文】：

用剃毛刀進行脫毛，露出頸部皮膚，用無菌碘伏棉球消毒，于頸部作 L 型逐層切開皮膚及皮下組織，仔細分離出左頸總動脈，遠心端 5 號絲線結扎，端置入留置針并固定。留置針置入成功后，隨即抽取 5ml 血液用于爆炸前NGAL 的檢測。松開實驗兔并重新固定（背部向外，腹部緊貼木板），腎區(qū)減少兔毛對爆炸沖擊波的影響。隨后將兔垂直放于特制的保護箱中，兔腎區(qū)保護箱的窗口，窗口用薄膜封住，與爆炸源位于同一水平面（約水下 15c其余部位（如頭部、胸部、四肢等）均保護在箱體內，雙耳塞入脫脂棉球。組不同距離的實驗兔依次放進特定的水下爆炸環(huán)境下，以 1.0g 太安炸藥作下爆炸源，分別對三組實驗組進行爆炸，爆炸由專業(yè)人員實施。爆炸后立即實驗兔，清理呼吸道及口腔分泌物保持通暢，松開動物改側臥位，記錄兔存及生理變化。分別于爆炸后 4h、12h、24h 采血 5mL，采用 ELISA 法測定不間段血清 NGAL 的濃度，于爆炸后 24h 放血致死實驗兔，解剖胸腔及腹腔各組腎臟行病理切片檢查。對照組除不致傷外，其余步驟均與爆炸組相同

用剃毛刀進行脫毛，露出頸部皮膚，用無菌碘伏棉球消毒，于頸部作 L 型逐層切開皮膚及皮下組織，仔細分離出左頸總動脈，遠心端 5 號絲線結扎，端置入留置針并固定。留置針置入成功后，隨即抽取 5ml 血液用于爆炸前NGAL 的檢測。松開實驗兔并重新固定（背部向外，腹部緊貼木板），腎區(qū)減少兔毛對爆炸沖擊波的影響。隨后將兔垂直放于特制的保護箱中，兔腎區(qū)保護箱的窗口，窗口用薄膜封住，與爆炸源位于同一水平面（約水下 15c其余部位（如頭部、胸部、四肢等）均保護在箱體內，雙耳塞入脫脂棉球。組不同距離的實驗兔依次放進特定的水下爆炸環(huán)境下，以 1.0g 太安炸藥作下爆炸源，分別對三組實驗組進行爆炸，爆炸由專業(yè)人員實施。爆炸后立即實驗兔，清理呼吸道及口腔分泌物保持通暢，松開動物改側臥位，記錄兔存及生理變化。分別于爆炸后 4h、12h、24h 采血 5mL，采用 ELISA 法測定不間段血清 NGAL 的濃度，于爆炸后 24h 放血致死實驗兔，解剖胸腔及腹腔各組腎臟行病理切片檢查。對照組除不致傷外，其余步驟均與爆炸組相同

P＜0.05 視為差異有統(tǒng)計學意義。2 結果2.1 一般情況24h 內，正常對照組全部存活，1.8m 組和 1.0m 組均死亡 1 只，存活率 90％0.5m 組當場死亡 1 只，致傷后半小時死亡 1 只，8h 后死亡 2 只，13h 后死亡只，死亡率 50％。2.2 病理結果爆炸組均可見不同程度的腎損傷，總體上，兔距爆炸源距離越近，損傷越重24h 后，正常組兔腎小球、腎小管及腎間質結構清晰，腎小管內無紅染物質、胞碎片，腎間質無出血及炎性細胞浸潤；1.8m 組可見灶狀出血；1.0m 組腎間內較多出血并伴有炎性細胞浸潤，管腔內見細胞碎片（圖 1、圖 2）；0.5m 組間質內可見大量出血并伴有較多炎性細胞浸潤，間質水腫明顯（圖 3）。

【參考文獻】

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1 梁向前;胡晶;馬宏昊;;球形炸藥設計及其水下爆炸沖擊波特性[J];工程爆破;2015年06期

2 馬超光;;體外沖擊波碎石術術后嚴重并發(fā)癥的診斷與治療[J];山東醫(yī)藥;2015年47期

3 谷翠芝;李清初;曾凝;唐余廣;廉溪;覃新芳;馬文峰;;急性腎損傷患者NGAL、KIM-1與血肌酐的相關性[J];廣東醫(yī)學;2015年20期

4 鄧超;王國增;章t

本文編號：2783787