發(fā)布時間：2020-07-05 00:53

【摘要】：目的:研究激素對于中等量蛋白尿FSGS患者的療效;初步探討自噬在COL4A3基因突變相關(guān)腎病發(fā)病機制中的作用;評估MCP-1作為尿液分子標(biāo)志物在COL4A3相關(guān)腎病及FSGS患者臨床預(yù)后中的潛在價值。方法:第一部分納入2006年至2016年在我科就診,臨床和病理確診為原發(fā)性FSGS,且至少2次尿蛋白在1.0-3.5g/24h之間,血白蛋白30g/L,GFR30ml/min的患者分別接受激素(0.4-0.6mg/kg)聯(lián)合ACEI/ARB類藥物(治療組)或單用ACEI/ARB類藥物治療(對照組),定期隨訪患者臨床癥狀和體征、血壓、血尿常規(guī)、血糖、血白蛋白、24h尿蛋白定量、肝腎功能及血脂等實驗室指標(biāo)。比較兩組患者緩解率、蛋白尿及腎功能情況,隨訪時間大于1年,復(fù)合終點事件為GFR30ml/min或下降30%。第二部分應(yīng)用前期已獲得的CRISPR/Cas9技術(shù)構(gòu)建的Col4a3 p.Arg1631Stop小鼠模型,通過尿常規(guī)、生化檢驗及腎臟病理檢查觀察小鼠的腎臟表型,腎組織電鏡下觀察自噬小體,采用RT-qPCR和Westernblot研究自噬相關(guān)分子的表達(dá)情況。第三部分我們在小鼠模型中通過RT-qPCR和Westernblot研究MCP-1表達(dá)水平。ELISA方法分別檢測慢病毒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的COL4A3人足細(xì)胞突變株細(xì)胞培養(yǎng)上清液,模型小鼠尿液,FSGS患者和健康對照組尿液中MCP-1水平。同時分析尿MCP-1水平與蛋白尿和血肌酐等臨床表現(xiàn)的相關(guān)性。結(jié)果:第一部分共納入102名患者(治療組N=52,對照組N=50),中位隨訪時間為36(12-117)個月。隨訪至12個月時,激素聯(lián)合ACEI/ARB治療組的總緩解率顯著高于對照組[73.1%VS 50.0%(P=0.01)],初始緩解的中位時間為3個月,而對照組為6個月。治療組患者22.2%到達(dá)復(fù)合終點,對照組為42.0%。中位生存時間治療組為72個月,對照組為57個月(P=0.03)。在10名患者中觀察到輕微不良反應(yīng)(治療組N=8,對照組N=2)。第二部分Col4a3 p.Arg1631Stop小鼠模型中純合組6周出現(xiàn)了明顯的血尿和蛋白尿,伴血肌酐顯著升高,28周小鼠腎臟病理光鏡示局灶節(jié)段腎小球硬化,電鏡示基底膜明顯增厚。純合組小鼠腎皮質(zhì)組織中自噬相關(guān)蛋白LC3-I/LC3-II、Atg16L1、Beclin-1及CHOP的表達(dá)均顯著上調(diào)。電鏡下觀察到純合小鼠足細(xì)胞自噬體明顯增多。第三部分我們發(fā)現(xiàn)Col4a3 p.Arg1631Stop小鼠純合組腎皮質(zhì)組織MCP-1表達(dá)顯著上調(diào)。嚴(yán)重COL4A3p.Leu1528stop突變組的人足細(xì)胞上清液較其他組,純合組小鼠尿液較雜合及野生組,以及FSGS患者較對照組尿液中MCP-1表達(dá)水平均明顯升高。且FSGS患者血肌酐水平與尿MCP-1水平呈顯著正相關(guān)(P0.01,Pearson相關(guān)系數(shù)0.426)。提示MCP-1表達(dá)升高可能預(yù)示COL4A3相關(guān)腎病表型和FSGS患者病情相對嚴(yán)重。結(jié)論:中小劑量激素聯(lián)合ACEI/ARB類藥物治療中等量蛋白尿FSGS患者療效優(yōu)于單用ACEI/ARB類藥物,且安全性較好,無嚴(yán)重不良反應(yīng);攜帶嚴(yán)重突變的Col4a3p.Arg1631Stop小鼠模型純合組腎臟病變較重,光鏡病理表現(xiàn)為FSGS改變,過度自噬可能是其重要發(fā)病分子機制;MCP-1有望成為評估COL4A3相關(guān)腎病表型輕重和FSGS病情嚴(yán)重程度的一個新的分子指標(biāo)。
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R692
【圖文】：

上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文1.3 退出標(biāo)準(zhǔn)若符合以下標(biāo)準(zhǔn)，患者退出本研究：（1）難以耐受的藥物過敏反應(yīng)或嚴(yán)重不良反應(yīng)；（2）血肌酐值翻倍；（3）24 小時蛋白尿定量升高至>3.5g/24h；（4）出現(xiàn)嚴(yán)重感染，需停所用激素；（4）激素治療組加用了免疫抑制劑治療，對照組加用了激素治療；（5）患者自動退出研究。2．研究方法2.1 研究流程圖

14圖 2 患者入組流程圖Figure 2 Patients enrollment flow chart病理資料所有患者均經(jīng)臨床病理確診為原發(fā)性 FSGS，除外了 SLE、過敏性紫癜及炎等繼發(fā)性因素。兩組患者病理情況如下圖，患者按哥倫比亞分型，85.3％ NOS 亞型，少數(shù)患者為門周型或頂端型。按照腎小球硬化程度評分(GSL)評

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

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本文編號：2741831