【摘要】：目的:探討女性泌尿道宿主、環(huán)境和微生物菌群三者之間的生態(tài)關(guān)系,以及健康狀態(tài)改變后宿主的反應(yīng)性變化;證明泌尿道有其特定的菌群結(jié)構(gòu)和特征,研究健康育齡期、健康絕經(jīng)后以及伴尿路感染的絕經(jīng)后女性的泌尿道菌群結(jié)構(gòu)和構(gòu)成的多樣性變化,進(jìn)一步探討菌群變化對(duì)尿路感染的影響,提供證據(jù)支持,逐步形成尿路感染診斷及治療的新觀念。方法:本課題選取研究對(duì)象共24人,分為三組,分別為正常健康育齡期女性組、正常健康絕經(jīng)后女性組以及絕經(jīng)后伴尿路感染癥狀女性組;入選方法是在青島大學(xué)附屬醫(yī)院的體檢中心共收集一般體檢的健康女性10例,其中包括絕經(jīng)后女性5人(A1-A5),育齡期女性5人(B1-B5),同時(shí)收集同時(shí)期于腎內(nèi)科門(mén)診就診,且初診時(shí)伴有明顯的尿路感染癥狀,未經(jīng)過(guò)抗生素治療的絕經(jīng)后女性共14例(C1-C14),上述入選的研究對(duì)象均要求排除陰道感染、尿道畸形、泌尿道手術(shù)、糖尿病、嚴(yán)重心腦腎疾病及應(yīng)用抗生素、免疫抑制劑等情況后,方可入組。對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌操作培訓(xùn),研究對(duì)象培訓(xùn)合格后留取尿樣,采樣完成后通過(guò)16SrRNA基因高通量測(cè)序方法研究健康育齡期、健康絕經(jīng)后及伴有尿路感染癥狀的絕經(jīng)后女性的泌尿道菌群種類構(gòu)成及結(jié)構(gòu),確定三組女性泌尿道優(yōu)勢(shì)菌群與劣勢(shì)菌群,研究尿路感染的絕經(jīng)后女性的泌尿道微生態(tài)結(jié)構(gòu)及變化,分析菌群結(jié)構(gòu)差異性對(duì)尿路感染的相關(guān)影響,為泌尿道感染性疾病的發(fā)病機(jī)制及診療提供有力的證據(jù)支持。結(jié)果:(1)研究數(shù)據(jù)顯示,三組女性的尿液樣本的菌群結(jié)構(gòu)和構(gòu)成均呈多樣化、復(fù)雜化的特點(diǎn),泌尿道菌群豐度水平及菌群結(jié)構(gòu)個(gè)體化差異明顯。相關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示,基于菌門(mén)(Phylum)級(jí)別分類,所有樣本序列分屬30個(gè)大門(mén),檢測(cè)到豐度較高的菌門(mén)為4類,主要是厚壁菌門(mén)(Firmicutes)、放線菌門(mén)(Actinobacteria)、變形菌門(mén)(Proteobacteria)和擬桿菌門(mén)(Bacteroidetes)。在健康的育齡期女性組與健康絕經(jīng)后女性組的尿液樣本中,其余菌門(mén)如酸桿菌門(mén)(Acidobacteria)豐度水平也較高,而在伴尿路感染癥狀的絕經(jīng)后女性組的尿液樣本中,該菌門(mén)檢出率及豐度則明顯下降。(2)每個(gè)樣本均以一種或者兩種種屬細(xì)菌占優(yōu)勢(shì),各樣本檢出菌屬數(shù)量差異更加明顯,在三組尿液樣本中,健康的育齡期女性組與健康絕經(jīng)后女性組尿液菌屬種類檢出率更豐富多樣,每個(gè)樣本至少有100余種菌屬存在;而在伴尿路感染癥狀的絕經(jīng)后女性組檢測(cè)的菌屬種類明顯減少,每個(gè)樣本只有大約40種菌屬存在。健康育齡期與絕經(jīng)后女性組樣本序列大多可分類至屬(Genus)水平,兩組優(yōu)勢(shì)菌種主要為乳酸桿菌屬(Lactobacillus)、加德納菌屬(Gardnerella)及鞘氨醇單胞菌屬(Sphingomonas);在伴有尿路感染癥狀的絕經(jīng)后女性組,樣本序列大多可被分類至科(Family)或者屬(Genus)的水平,優(yōu)勢(shì)菌種主要為腸桿菌科(Enterobacteriaceae)、乳酸桿菌屬(Lactobacillus)及雙歧桿菌科(Bifidobacteriaceae),個(gè)體差異明顯,常見(jiàn)的優(yōu)勢(shì)菌群特征證據(jù)顯示不夠充分。(3)伴有尿路感染癥狀的絕經(jīng)后女性組,鞘氨醇單胞菌屬(Sphingomonas)豐度明顯下降;而腸桿菌科(Enterobacteriaceae)豐度較另外健康育齡期與健康絕經(jīng)后女性組的豐度明顯升高,乳酸桿菌屬(Lactobacillus)的豐度水平較健康育齡期組、健康絕經(jīng)后女性組明顯下降。比較菌群鞘氨醇單胞菌屬、腸桿菌科、乳酸桿菌屬差異性,運(yùn)用SPSS 20.0將樣本進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn),檢驗(yàn)結(jié)果顯示各組各個(gè)菌群都不服從正態(tài)性分布,因此采用中位數(shù)和四分位數(shù)間距來(lái)描述其集中趨勢(shì)和離散趨勢(shì),選擇用多個(gè)獨(dú)立樣本的秩和檢驗(yàn),計(jì)算結(jié)果顯示上述3組菌群差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㩳0.05)。叢毛單胞菌科(Comamonadaceae)、厭氧球菌屬(Anaerococcus)、芽孢桿菌屬(Lysinibacillus)、足球菌屬(Pediococcus)、草酸桿菌科屬未定菌(Oxalobacteraceae-Undibacterium)等細(xì)菌在健康育齡期、絕經(jīng)后女性組中被檢測(cè)到的豐度較伴尿路感染癥狀的絕經(jīng)后女性組高,而伴尿路感染癥狀的絕經(jīng)期女性組豐度較高菌屬有腸球菌(Enterococcus)、鏈球菌屬(Streptococcus)等,但因本實(shí)驗(yàn)樣本量少等原因,數(shù)據(jù)比較其差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㧐0.05)。結(jié)論:各組女性尿液樣本均檢測(cè)到大量菌群存在,證實(shí)了泌尿道存在大量細(xì)菌,存在其特定的菌群及結(jié)構(gòu);研究數(shù)據(jù)顯示,三組樣本菌群結(jié)構(gòu)和構(gòu)成呈多樣化、復(fù)雜化及個(gè)體差異化,厚壁菌門(mén)、放線菌門(mén)、變形菌門(mén)和擬桿菌門(mén)是其中占比例最大的四大菌門(mén)。對(duì)樣本進(jìn)一步數(shù)據(jù)分析,發(fā)現(xiàn)三組樣本均以厚壁菌門(mén)中的乳酸桿菌屬為優(yōu)勢(shì)菌屬,但是伴尿路感染癥狀的絕經(jīng)后女性組泌尿道菌群表現(xiàn)為乳酸桿菌屬、鞘氨醇單胞菌屬顯著減少,而腸桿菌科豐度顯著增加,提示伴有尿路感染癥狀的絕經(jīng)后女性泌尿道優(yōu)勢(shì)菌及菌群構(gòu)成均發(fā)生了明顯改變,這可能是引起絕經(jīng)期女性易發(fā)生尿路感染重要原因,為泌尿道感染性疾病的發(fā)病機(jī)制及診療提供有力的證據(jù)支持。
【圖文】：

健康育齡期、絕經(jīng)期女性尿液門(mén)水平熱圖

圖 5.絕經(jīng)期伴尿路感染癥狀女性尿液菌群門(mén)水平熱圖2 大多數(shù)樣本可分類到到屬（Genus）水平，，基于菌屬水平，兩種種屬細(xì)菌占優(yōu)勢(shì)，各樣本檢出菌屬數(shù)量差異更加明顯，健康絕經(jīng)后女性組尿液菌屬種類檢出率更豐富多樣，每個(gè)樣存在；而在伴尿路感染癥狀的絕經(jīng)后女性組檢測(cè)的菌屬種類有大約 40 種菌屬存在。計(jì)算菌群豐度的相關(guān)指數(shù)包括下列幾
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R691.3

【參考文獻(xiàn)】

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2 李湘燕;鄭波;劉玉村;;2012年中國(guó)女性尿路感染細(xì)菌分布及耐藥狀況[J];中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志;2015年11期

3 褚昊月;孫靜;張穎;郭靜;亓慶國(guó);;不同齲敏感兒童牙菌斑中4種致齲菌的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)分析[J];上�？谇会t(yī)學(xué);2015年03期

本文編號(hào)：2674268