【摘要】：目的:全球范圍內(nèi),每年有將近150000人死于膀胱癌。目前,針對(duì)進(jìn)展期膀胱,主要有內(nèi)腔鏡和開(kāi)放手術(shù)、局部或系統(tǒng)性免疫治療、放化療等治療方案,盡管這些治療策略已經(jīng)改善了治療效果并延長(zhǎng)了膀胱癌患者的生存期以及生活治療,但該疾病仍然無(wú)法完全治愈而且還要具有高復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn),并治療預(yù)后均不太理想。近些年來(lái)學(xué)者們發(fā)現(xiàn),有一群未或低分化的膀胱腫瘤細(xì)胞,他們稱(chēng)之為膀胱腫瘤干細(xì)胞,他們認(rèn)為腫瘤的復(fù)發(fā)與不良預(yù)后與膀胱腫瘤干細(xì)胞有關(guān)�，F(xiàn)如今已有許多關(guān)于膀胱腫瘤干細(xì)胞分子標(biāo)志物的研究被發(fā)表,CD44、Ck5、CD47、ALDH等分子被認(rèn)為是腫瘤干細(xì)胞的分子標(biāo)志物,科學(xué)家們基于這些分子標(biāo)志物的研究,為膀胱癌的治療提供新的研究方向與方法。將舊藥重新用于新用途,例如在針對(duì)腫瘤的臨床治療中使用舊藥去達(dá)到抑癌效果是一個(gè)非常有吸引力的,令人興奮的領(lǐng)域。雙硫侖就是類(lèi)似的一個(gè)很好的例子。雙硫侖由于其獨(dú)特的已知特性,低成本,低副作用和對(duì)不同癌癥的高選擇性以及與其他藥物的協(xié)同活性而被重新用作潛在的抗癌藥物。而且雙硫侖抑制腫瘤細(xì)胞的機(jī)制之一就是作為ALDH的抑制劑。本次實(shí)驗(yàn)探討雙硫侖對(duì)膀胱腫瘤中ALDH1A1表達(dá)的影響及其增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對(duì)順鉑敏感性的潛在機(jī)制。方法:將實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組和雙硫侖(DSF)組。檢索相關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù),查詢(xún)ALDH1A1膀胱癌標(biāo)本中的表達(dá)情況。提取EJ細(xì)胞與SV-HUC-1細(xì)胞的mRNA,檢測(cè)兩者ALDH1A1的表達(dá)情況。采用克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)DSF對(duì)膀胱腫瘤細(xì)胞成團(tuán)能力的影響。提取DSF干預(yù)組與對(duì)照組膀胱腫瘤細(xì)胞RNA,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)DSF處理后,腫瘤細(xì)胞內(nèi)ALDH1A1及其他干性相關(guān)基因的表達(dá)差異。通過(guò)劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)DSF干預(yù)后0H以及24H時(shí),DSF對(duì)膀胱腫瘤細(xì)胞遷移能力的影響。流式周期檢測(cè)DSF干預(yù)后對(duì)于膀胱腫瘤細(xì)胞周期的影響。利用CCK8法以及流式檢測(cè)細(xì)胞凋亡方法檢測(cè)DSF對(duì)腫瘤細(xì)胞順鉑敏感性的影響。結(jié)果:DSF組膀胱腫瘤細(xì)胞的克隆成球數(shù)目明顯低于對(duì)照組。對(duì)照組和DSF組克隆形成后,用結(jié)晶紫將球團(tuán)染色,溶解結(jié)晶紫后,兩組溶液570nm的吸光度分別為0.884±0.022和0.490±0.027,差異有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。與正常尿路上皮細(xì)胞SV-HUC-1相比,膀胱癌EJ細(xì)胞中ALDH1A1的表達(dá)量明顯增高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。與對(duì)照組相比,DSF組中細(xì)胞的ALDH1A1的表達(dá)水平明顯下調(diào),NOTCH2,SHH等干細(xì)胞基因的表達(dá)亦有下調(diào),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與對(duì)照組相比,DSF干預(yù)后的膀胱腫瘤細(xì)胞的遷移能力明顯下降。與對(duì)照組相比,DSF干預(yù)后的膀胱腫瘤細(xì)胞處于G1期的數(shù)量明顯增加,而S期細(xì)胞數(shù)量下降。順鉑聯(lián)合DSF與單用順鉑兩種方法分別對(duì)膀胱腫瘤細(xì)胞干預(yù)24h,測(cè)得順鉑的中位殺細(xì)胞濃度分別為8umol和32umol,差異亦具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),說(shuō)明在DSF干預(yù)后的膀胱腫瘤細(xì)胞對(duì)順鉑變得敏感。結(jié)論:膀胱癌組織較癌旁組織有較高的ALDH1A1表達(dá)。膀胱癌細(xì)胞ALDH1A1表達(dá)高于正常尿路上皮細(xì)胞。雙硫侖作為ALDH的抑制劑,可通過(guò)降低膀胱腫瘤細(xì)胞內(nèi)ALDH1A1的表達(dá),影響膀胱腫瘤細(xì)胞的遷移、克隆形成能力以及影響細(xì)胞周期等表型,并且增強(qiáng)了膀胱腫瘤細(xì)胞對(duì)于順鉑的敏感性。
【圖文】：

蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文 雙硫侖抑制膀胱腫瘤干細(xì)胞 ALDH1A1 的表達(dá)并增強(qiáng)其順鉑敏感性第三章 結(jié)果3.1 膀胱癌中 ALDH1A1 表達(dá)情況肌肉浸潤(rùn)性膀胱癌內(nèi) ALDH1A1 的表達(dá)高于非肌肉浸潤(rùn)性膀胱癌，腫瘤的ALDH1A1 的表達(dá)水平亦與患者的總體生存率相關(guān)：通過(guò)檢索 Oncomine（https://www.oncomine.org）和 GEPIA 等數(shù)據(jù)庫(kù)發(fā)現(xiàn)，肌肉浸潤(rùn)性膀胱癌內(nèi)ALDH1A1 基因的表達(dá)高于非肌肉浸潤(rùn)性膀胱癌（圖 1a）； ALDH1A1 表達(dá)水平較高的膀胱癌患者，其總體生存率降低（圖 1b）。

2 膀胱癌 EJ 細(xì)胞與正常尿路上皮細(xì)胞中 ALDH1A1 表達(dá)情況。預(yù)后膀胱癌 EJ 細(xì)胞中 ALDH1A1 基因表達(dá)情況制膀胱腫瘤細(xì)胞內(nèi) ALDH1A1 基因的表達(dá)水平：被 2500nm，膀胱腫瘤細(xì)胞內(nèi) ALDH1A1 mRNA 表達(dá)水平明顯降低（P量為對(duì)照組的 3.6 倍（圖 3）。說(shuō)明，DSF 抑制了膀胱癌 E的表達(dá)。
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R737.14

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 閆帥;張贊;楊巍;樊青春;李孝忠;;銩激光在膀胱腫瘤治療中的心得體會(huì)[J];航空航天醫(yī)學(xué)雜志;2019年03期

2 成燕;;淺談膀胱腫瘤患者的疾病獲益感[J];世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘;2019年26期

3 李坤;高倫祥;;經(jīng)尿道膀胱腫瘤電切術(shù)和開(kāi)放手術(shù)治療膀胱腫瘤的療效對(duì)比[J];臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)電子雜志;2019年32期

4 郎斌;;長(zhǎng)鏈非編碼RNA在膀胱腫瘤中的研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代泌尿生殖腫瘤雜志;2017年05期

5 朱存樂(lè);李傳洪;王峰;張寶鵬;羅鋒;王晉龍;;西藏地區(qū)膀胱腫瘤單中心回顧性臨床分析[J];西藏醫(yī)藥;2017年06期

6 祝子清;何露;伍莊;呂艷;吳順理;鄭新民;;經(jīng)尿道等離子“V”型電極膀胱腫瘤整塊切除術(shù)的臨床研究(附29例報(bào)告)[J];現(xiàn)代泌尿生殖腫瘤雜志;2018年03期

7 高永亮;;經(jīng)尿道電切術(shù)治療表淺膀胱腫瘤70例報(bào)告[J];實(shí)用中西醫(yī)結(jié)合臨床;2017年05期

8 鐘曄;劉健;;經(jīng)尿道膀胱腫瘤電切術(shù)聯(lián)合膀胱灌注對(duì)膀胱腫瘤的治療價(jià)值評(píng)估[J];大家健康(學(xué)術(shù)版);2015年22期

9 陳志雄;潘翔男;劉永昌;;經(jīng)尿道雙極電切術(shù)聯(lián)合吡柔比星膀胱灌注治療淺表膀胱腫瘤的臨床療效[J];中國(guó)藥物經(jīng)濟(jì)學(xué);2015年04期

10 馬占通;;經(jīng)尿道膀胱腫瘤電切術(shù)治療膀胱腫瘤84例的療效觀察[J];臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)電子雜志;2015年12期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 楊曉峰;;膀胱腫瘤微創(chuàng)、精準(zhǔn)和靶向外科診療的科學(xué)問(wèn)題和研究策略[A];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)泌尿外科專(zhuān)業(yè)委員會(huì)第十四次全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議暨2016年廣東省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)泌尿外科專(zhuān)業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2016年

2 肖家全;張琦;劉鋒;祁小龍;章越龍;毛夏娃;章偉;毛祖杰;張大宏;;窄光膀胱鏡聯(lián)合鈥激光治療膀胱腫瘤(附3例報(bào)告)[A];2009年浙江省男科、泌尿外科學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

3 王錫斌;鄒陽(yáng)陽(yáng);;超聲引導(dǎo)對(duì)膀胱腫瘤穿刺活檢的臨床價(jià)值[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十次全國(guó)超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

4 魏強(qiáng);鄭碩;李響;李虹;楊宇如;王佳;曾浩;韓平;王坤杰;石明;盧一平;范天勇;陳宗福;;近十一年華西醫(yī)院泌尿外科膀胱腫瘤住院病人的構(gòu)成情況[A];第十六屆全國(guó)泌尿外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

5 丁小波;粱朝朝;蔣云仙;葉元平;劉明;邢江n\;張賢生;郝宗耀;周俊;樊松;邰盛;王克孝;;膀胱腫瘤數(shù)據(jù)庫(kù)的建立、意義與資料分析[A];第十六屆全國(guó)泌尿外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

6 余升;;經(jīng)尿道雙極等離子體電切治療淺表膀胱腫瘤15例[A];2013年貴州省泌尿外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

7 湯富剛;呂江紅;壽金朵;徐海珊;楊倩;唐海林;潘美;林莎;方凡;趙博文;;腔內(nèi)超聲對(duì)膀胱腫瘤診斷價(jià)值的研究[A];2005年浙江省超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2005年

8 余賢明;;經(jīng)尿道膀胱腫瘤電切術(shù)治療膀胱腫瘤[A];貴州省醫(yī)學(xué)會(huì)泌尿外科分會(huì)2006年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

9 黃曉飛;吳曉風(fēng);潘克寧;;10例膀胱腫瘤的診治分析[A];2007年貴州省醫(yī)學(xué)會(huì)泌尿外科分會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2007年

10 胡曉華;張子揚(yáng);彭煜;;膀胱腫瘤的手術(shù)方式探討[A];第十五屆全國(guó)泌尿外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2008年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 代廷榮;無(wú)痛血尿要防腫瘤[N];中國(guó)石油報(bào);2003年

2 張超群 范曉莉;建立膀胱腫瘤免疫治療動(dòng)物模型[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2005年

3 張紓難;中醫(yī)臨床禁忌系列講座：淋證[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2003年

4 程樹(shù)元;血尿，，人體發(fā)出的警告[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2004年

5 安徽省懷寧縣醫(yī)院醫(yī)療服務(wù)中心 黃芳;尿潴留的簡(jiǎn)易外治[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2009年

6 孫震鵬;膀胱腫瘤術(shù)后灌注前別喝水[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2008年

7 孫健邋胡瓊珍;腹腔鏡下成功根治小兒膀胱腫瘤[N];健康報(bào);2008年

8 東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院泌尿外科 陳明　(主任醫(yī)師) 吳葉青;膀胱腫瘤需要做哪些檢查[N];家庭醫(yī)生報(bào);2008年

9 健康時(shí)報(bào)特約記者 劉東邋鄒爭(zhēng)春;可抑制膀胱腫瘤復(fù)發(fā)[N];健康時(shí)報(bào);2007年

10 北京同仁醫(yī)院泌尿外科主任醫(yī)師 劉躍新;膀胱腫瘤早診新技術(shù)[N];健康報(bào);2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 石小軍;PD-1阻斷聯(lián)合SA-GM-CSF膜錨定膀胱腫瘤干細(xì)胞疫苗治療轉(zhuǎn)移性膀胱癌及機(jī)制研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2018年

2 張慶松;miR-3619-5p通過(guò)作用于β-catenin和CDK2并且激活p21~(WAF1/CIP1)基因抑制膀胱腫瘤[D];華中科技大學(xué);2018年

3 鄭凱;Angiostatin對(duì)膀胱腫瘤新生血管抑制作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2004年

4 鄭連文;BCL-2反義寡核苷酸治療膀胱腫瘤的研究[D];吉林大學(xué);2004年

5 楊登科;結(jié)核桿菌Ag85B/IL-2融合蛋白的原核表達(dá)、純化及其對(duì)膀胱腫瘤免疫治療效應(yīng)的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2004年

6 羅軍;NF-κB在膀胱腫瘤細(xì)胞抑制T淋巴細(xì)胞功能中的作用研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2004年

7 劉海濤;分泌IL-2和IFN-α2a的基因重組卡介苗構(gòu)建和抗膀胱腫瘤實(shí)驗(yàn)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2005年

8 胡向農(nóng);未甲基化CpG寡核苷酸誘導(dǎo)人PBMC抗膀胱腫瘤細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];四川大學(xué);2005年

9 郭啟振;Survivin在膀胱腫瘤早期診斷，預(yù)后判斷以及細(xì)胞凋亡方面的作用[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2006年

10 李杜漸;單核細(xì)胞趨化因子在卡介苗誘導(dǎo)膀胱局部抗腫瘤免疫反應(yīng)中的作用及機(jī)制[D];四川大學(xué);2004年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 謝漢平;經(jīng)尿道激光剜除術(shù)與電切術(shù)治療非肌層浸潤(rùn)性膀胱癌的臨床研究[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2019年

2 張濤;雙硫侖抑制膀胱腫瘤細(xì)胞ALDH1A1的表達(dá)并增強(qiáng)其順鉑敏感性[D];蘭州大學(xué);2019年

3 郭偉;薯蕷皂苷元對(duì)膀胱腫瘤細(xì)胞的抑制作用的研究[D];武漢大學(xué);2017年

4 孔小川;M1型巨噬細(xì)胞通過(guò)抑制NF-κB信號(hào)通路逆轉(zhuǎn)M2型巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)的膀胱腫瘤上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2018年

5 劉坤;超聲對(duì)膀胱腫瘤診斷價(jià)值的評(píng)估[D];大連醫(yī)科大學(xué);2018年

6 王亞輝;膀胱腫瘤病灶內(nèi)miR-21的表達(dá)量變化及其與癌細(xì)胞侵襲、血管新生的潛在相關(guān)性研究[D];蘭州大學(xué);2018年

7 王登殿;姜黃素通過(guò)下調(diào)Shh信號(hào)通路抑制膀胱腫瘤干細(xì)胞活性[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2018年

8 于維馮;女性膀胱腫瘤術(shù)后預(yù)后的相關(guān)影響因素研究[D];青島大學(xué);2018年

9 于國(guó)強(qiáng);肌層浸潤(rùn)性膀胱癌的保膀胱綜合治療[D];河南科技大學(xué);2017年

10 徐曉東;基于微流控共培養(yǎng)條件下膀胱腫瘤細(xì)胞能量代謝特點(diǎn)的研究[D];青島大學(xué);2015年

本文編號(hào)：2668852